探究全自动血细胞分析仪在血常规检验中的应用价值

吕丹

血常规是一种通过观察血细胞形态分布、数量变化等判定疾病的方法,是实验室检验的重要项目。以往血常规多通过血涂片显微镜细胞形态学检查,但对检验人员的要求较高,如操作不当或血涂片制备不合格均会导致误差,影响疾病的诊断结果［1,2］。随着检验仪器的快速发展,全自动血细胞分析仪因精确度高、检测速度快、操作简单的优势被广泛用于血常规检查中［3］。但全自动血细胞分析仪检测血常规也存在误差现象。为进一步探究其应用价值,本研究对复检血常规标本分别进行全自动血细胞分析仪检验、涂片镜检检测,以便探究全自动血细胞分析仪在血常规检验中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2018年8月～2019年7月本院检验科1712 份患者的血常规标本资料,均经血细胞全自动血细胞分析仪检测,符合血细胞形态学复检标准的共878 份,其中男488 份,女390 份；年龄7～82 岁,平均年龄(58.57±20.46)岁。以上患者均符合此次研究标准。患者均对本次研究目的知悉,且自愿参加,并签署相关知情同意书。此次研究已通过本院伦理委员会审核批准。

1.2 方法 878 份患者的血常规标本均行全自动血细胞分析仪和涂片镜检检测。

1.2.1 仪器与设备 全自动血细胞分析仪(sysmex型)；双目显微镜(O 淋巴细胞mpusCX22)；瑞士染色液购自杭州滨河微生物试剂有限公司；乙二胺四乙酸二钾真空抗凝管(贝斯特,EDTA-K2型)。

1.2.2 检测方法 抽取患者静脉血2 ml,均匀摇晃且静置1 h 后,在室温下由同一位经验丰富的检验医师完成全自动血细胞分析仪检测,并进行瑞氏染色液染色。染色方法如下：将厚薄均匀、头体尾明显的干燥血涂片标本用蜡笔在两头划线,滴瑞氏染液4～5 滴,固定1 min 后以1：(1～2)的比份加缓冲液,吹均匀后染色5 min,冲洗、晾干。在显微镜下观察细胞的形态、数量、大小、分类等。为减少结果变异的发生,所有标本检测和复查均在5 d 内完成。

1.3 检测标准

1.3.1 标本复检标准［4］白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)至少存在一项减少,或RBC 增加但全自动血细胞分析仪无报警提示,PLT＜50×109/L或＞350×109/L,WBC＜2.5×109/L 或＞15×109/L；或WBC分类存在异常者；或血红蛋白(Hb)浓度＞160 g/L 或＜60 g/L,平均RBC 体积＞100 fl 或＜70 fl；中性粒细胞＞0.85；嗜酸粒细胞＞0.10；嗜碱粒细胞＞0.10；淋巴细胞＞0.60；单核细胞＞0.15。

1.3.2 镜检阳性标准 RBC 形态学、PLT、有核红细胞改变幅度为重度以上,WBC 检验和分类结果一致,可见未成熟粒细胞、异型淋巴细胞、血小板聚集、细胞核左移、原始细胞,可见血液寄生虫、中毒颗粒等异常。

1.4 观察指标 比较全自动血细胞分析仪和涂片镜检检测的血常规结果,包括中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、幼稚细胞/核左移、原始细胞/异型淋巴细胞检出率及血常规异常标本总检出率。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

复查878 份血常规异常标本中,其中中性粒细胞427 份,全自动血细胞分析仪检出率为100.00%,涂片镜检检出率为99.30%；嗜酸粒细胞84 份,全自动血细胞分析仪检出率为83 份(98.81%),涂片镜检检出率为92.86%；嗜碱粒细胞56 份,全自动血细胞分析仪检出率为96.43%,涂片镜检检出率为87.50%；淋巴细胞167 份,全自动血细胞分析仪检出率为95.81%,涂片镜检检出率96.41%；单核细胞56 份,全自动血细胞分析仪检出率为89.29%,涂片镜检检出率为100.00%；原始细胞/异型淋巴细胞42 份,全自动血细胞分析仪检出率为80.95%,涂片镜检检出率为97.62%；幼稚细胞/核左移46 份,全自动血细胞分析仪检出率为82.61%,涂片镜检检出率为95.65%；全自动血细胞分析仪对中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、淋巴细胞的检出率与涂片镜检比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；全自动血细胞分析仪对单核细胞、原始细胞/异型淋巴细胞、幼稚细胞/核左移检出率低于涂片镜检,差异有统计学意义(P＜0.05)。全自动血细胞分析仪血常规异常标本总检出率为96.36%(846/878),涂片镜检总检出率为96.81%(850/878),比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 两种检测方法的血常规结果比较［n(%)］

3 讨论

不同疾病对应的血细胞形态变化也不一致。涂片镜检是血常规检查的金标准,具有较高的准确度,适合用于各种血液病的初筛［5］。但涂片镜检的干扰因素较多,如血涂片制备厚薄不均、细胞分布不均、两侧未留有间隙；染色过酸或过碱；染色时间不适；检验人员技术不合格等均可能影响涂片镜检的准确度。此外,不同的检验人员对细胞的判断存在误差,也会在一定程度上影响疾病的判断。早些年,中华医学会检验分会根据国际血液学复查专家组成立的针对自动血细胞计数和白细胞计数的复检标准,发布了41 条筛查规则。即使这样,国内医疗机构仍然重视度不足。因此,应在常规临床血液检查中提高复检率,以确认仪器检查结果是否正确。应该针对有问题的标本进行描述性分析,以免对血液系统疾病造成漏诊。血细胞形态分析是常规血液检查的金标准。

随着检验设备的快速发展,全自动血细胞分析仪被广泛用于临床血常规检查中。该仪器用于血常规检查中主要具备三种功能：白细胞计数及分类、红细胞计数以及分类功能的拓展,包括造血干细胞计数、有核红细胞观察及计数、未成熟及幼稚粒细胞计数等。本研究结果显示,全自动血细胞分析仪对中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、淋巴细胞的检出率与涂片镜检比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；全自动血细胞分析仪对单核细胞、原始细胞/异型淋巴细胞、幼稚细胞/核左移检出率低于涂片镜检,差异有统计学意义(P＜0.05)。全自动血细胞分析仪血常规异常标本总检出率为96.36%(846/878),涂片镜检总检出率为96.81%(850/878),比较差异无统计学意义(P＞0.05)。由此说明全自动血细胞分析仪在血常规中具有较高的应用价值,对中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞、淋巴细胞等检出率较高,对单核细胞、原始细胞/异型淋巴细胞、幼稚细胞/核左移等分类效果较差,但必要时也可联合涂片镜检,以便提高检测准确率。分析原因在于,与以往的涂片镜检相比,全自动血细胞分析仪具有操作简单、速度快、准确度高、重复性好的优势。但全自动血细胞分析仪较难识别血细胞的形态,对血细胞形态、比例分析和观察具有局限性,容易出现假阳、假阴情况,误导疾病诊断。为了提高诊断的准确性,检查人员在检验血样前应预先校准仪器,以确保检验质量,并确保检验结果更可靠、更准确。同时还必须注意自动血细胞全自动血细胞分析仪和试剂的保存,以确保保存环境干燥,通风良好,以防止仪器受到无线电干扰或阳光直射的影响,并严格按照标准操作程序进行各种检查操作［6］。

当患者发生细菌感染时中性粒细胞发生毒性、核象变化,胞质粗大、增多或有空泡、变性,但其他因素也可能引发白细胞假性增高。病毒感染以淋巴细胞增高为主,血红蛋白含量、红细胞形态、大小均可改变。全自动血细胞分析仪在正常血细胞形态的检查中可计数成熟的白细胞、红细胞、血小板。在相关研究中得知,仪器对于大红细胞和小红细胞的判读较为准确,从直方图中能够直观读取。杨玉勤［7］的研究中得知,血液标本白细胞分类镜检中嗜酸性细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞具有较高符合率,嗜碱性细胞符合率较低。而有报警提示镜检阳性符合率为69.88%。因此,血细胞全自动血细胞分析仪对异常细胞报警提示灵敏度极高,具有较强的针对性,与镜检的符合度较高。邢莹等［6］研究中,对外周血血细胞中白细胞复检结果进行分析,发现全自动血细胞形态学数字图像全自动血细胞分析仪对各种白细胞的分类、计数特异性较高,尤其是中性粒细胞中毒形态异常检测敏感度可达100.00%,对原始细胞可达91.7%,对中性粒细胞分类计数异常敏感性达91.8%,淋巴细胞达88.5%,嗜酸粒细胞达78.9%,证明全自动血细胞分析仪在血常规中应用价值较高。但对于严重感染、白血病或其他病变者,血细胞形态会出现病理变化导致血异常,此时全自动血细胞分析仪无法准确对异变细胞计数、分类。而涂片镜检对此类细胞分类有明显优势,因此,临床常将其与涂片镜检结合,从而降低误诊、漏诊的发生。

综上所述,全自动血细胞分析仪在血常规检验中具有较高的应用价值,但必要时也可联合涂片镜检,以便提高检测准确率。