血清缺血修饰清蛋白诊断糖尿病肾病的临床意义

黄业贤 赵良宇

1 型糖尿病(T1DM)特别容易发展为DN,导致终末期肾病。因此,需要进一步了解影响T1DM 肾脏疾病进展的因素,为疾病早期诊疗提供参考依据［1-3］。DN是终末期肾病(ESRD)的主要病因,约占40%以上,氧化应激在糖尿病及其并发症和发病机制中起着重要作用,而缺血修饰清蛋白(ischemia-modified albumin,IMA)是一种与机体氧化应激反应相关的标志物［4］,然而,糖尿病患者的血清IMA 水平尚未有定论。本研究旨在探讨糖尿病患者的代谢特点与血清IMA 水平的关系,选取2019年2月～2020年2月本院收治的150 例DN 患者和150 例健康体检者作为研究对象,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年2月～2020年2月本院收治的150 例DN 患者作为观察组,另选取同期150 例健康体检者作为对照组。其中对照组年龄55～78 岁,平均年龄(71.14±6.13)岁；男女比例86∶64。观察组年龄54～79 岁,平均年龄(71.62±5.31)岁；男女比例85∶65。两组年龄、性别等一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 方法 禁食1 d 后,抽取静脉血并用K2EDTA管内血样进行HbA1c 检测。分离血清,校准血清,用于常规化学检测。采用罗氏Cobas 8000 全自动生化分析仪对本院实验室空腹血糖、胆红素、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、TG、IMA 进行生化分析。并严格按照操作规程收集两组的尿液进行24 h 尿蛋白定量检测。IMA 采用白蛋白钴结合试验(ACB),标本中白蛋白与Co2+结合后剩余的Co2+与二硫苏糖醇(DTT)反应生成红褐色的物质,在505 nm 波长下比色,其吸光度与Co2+浓度呈正比。与校准品比较,可计算出标本中缺血修饰蛋白水平。

1.3 观察指标 对比两组24 h 尿蛋白定量、IMA 水平以及DN 检出率(DN 的金标准是24 h 尿蛋白定量)。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t 检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组24 h 尿蛋白定量、IMA 水平对比 观察组24 h 尿蛋白定量(84.45±11.25)mg/24 h、IMA(75.49±6.32)U/ml 均高于对照组的(0.10±0.04)mg/24 h、(68.22±1.02)U/ml,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 两组检出率对比 观察组采用IMA 联合HbA1c、TG 的DN 检出率为96.67%,与采用24 h 尿蛋白定量的98.7%对比,差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组采用IMA 联合HbA1c、TG 的DN 检出率为3.33%,与采用24 h 尿蛋白定量的2.00%对比,差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表1 两组24 h 尿蛋白定量、IMA 水平对比(±s)

表1 两组24 h 尿蛋白定量、IMA 水平对比(±s)

注：与对照组比较,aP＜0.05

表2 两组检出率对比［n(%)］

3 讨论

T1DM 或T2DM 患者均存在患DN 的风险,但前者的疾病风险、损伤程度更高［5］。DN 的分子病理生理学是多因素的,涉及血流动力学因素(血管内皮生长因子、肾素-血管紧张素-醛固酮和内皮素系统)、促炎因子(如白细胞介素-1、6、18)、促炎细胞因子［如转化生长因子β(TGFβ)］以及其他生化紊乱(多元醇、蛋白激酶C)等。然而,由于上述分子调节的过程与方式各异,因此仍然很难界定DN 的不同临床阶段。DN的发病机制是一个复杂的过程,目前尚未阐明。尿蛋白排泄增加被认为是DN 的早期征象,其原因可归因于肾小球膜过滤缺陷,由高血糖、氧化应激、缺血和炎症引起的肾内皮损伤等,临床诊疗时有一定的参考价值。氧化应激可能参与了DM 的发病和并发症。有关报道称［6］,在各种类型的糖尿病、妊娠期糖尿病中,IMA 水平升高,并提示与糖耐量减低、高脂血症和其他一些代谢参数有关,因此,在糖尿病肾病的早期诊断中,应寻找敏感、新颖的生物标志物。

IMA 作为一种新的心肌缺血的血清标志物,引起了广泛的关注。IMA 是一种氧化应激标志物,现在被用作检测心肌缺血的敏感生物标记物,并作为氧化应激的临床观察指标［7,8］。检测血清IMA 水平的试验是白蛋白钴结合试验,试验原理是基于清蛋白对Co2+的亲和力降低,这是由于蛋白质的N-末端区域发生了改变,而自由基损伤、缺氧,酸中毒,钠和钙泵中断,以及游离铁和铜离子暴露都是清蛋白结构改变的潜在机制,然而,确切的生化机制仍未阐明［9,10］。

IMA 的特点是当机体心肌组织中的肌肉损伤或缺氧时,具有较高灵敏度,并与冠状动脉血流减少相关的机制有关,其次,可提示缺血损伤促进的活性氧物种(ROS)的改变。活性氧自由基引起许多损害,在所现阶段进行的研究中,IMA 在缺血开始后不久上升,在6～12 h 保持高水平后,24 h 内恢复正常；在另一项研究中［11］,IMA 诊断缺血的敏感性为80%,特异性为31%,阴性预测值为92%。有关资料显示,心肌缺血和缺血再灌注损伤通过氧化应激导致自由基的产生。此外,心肌缺血和缺血-再灌注损伤会发生蛋白质、脂质和DNA 等分子的生化修饰。有研究表明,脑卒中时自由基生成增加,特别是缺血和再灌注,IMA 还与心肌和其他缺血模型中的高氧化应激有关［12］。IMA 被认为是心肌缺血、肌肉缺血、肺栓塞和肠系膜缺血的敏感生化标记物。急性缺血性脑卒中患者血清IMA 水平升高,这些水平与缺血组织体积相关,缺血性脑卒中患者的IMA 水平高于其他研究中的健康人。在心肌组织早期缺血时,IMA 水平会增加,并保持较高水平。除此之外,IMA 与DN 也有一定的关联性。临床中,血清IMA水平在心脏功能不全、肺栓塞、心肺复苏、终末期肾病、脑血管缺血、急性肠系膜缺血、系统性硬化、关节镜膝关节手术、运动后骨骼缺血、糖尿病等疾病中升高。本次试验结果表明,观察组的24 h 尿蛋白定量、IMA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；两组采用IMA 联合生化指标HbA1c、TG 的检出率与采用24 h 尿蛋白定量的DN 检出率组内对比,差异无统计学意义(P＞0.05)。由此可见,IMA 检查可作为DN 诊断的辅助检查手段,且诊断准确率高。

综上所述,IMA 对糖尿病肾病的诊断价值高,值得推广。