cIAP-1、NDY-1在卵巢癌中的表达及临床意义

李苑瑛 薛 艳 黄雪梅

细胞凋亡抑制蛋白(cIAP-1)能够参与到上皮细胞的凋亡调控过程中，显著促进癌细胞的持续性扩增[1]；组蛋白去甲基化酶(NDY-1)是甲基化的修饰因子，通过对癌细胞核转录基因的甲基化修饰作用，影响癌细胞的增殖速度，使癌细胞的分化成熟发生障碍[2]。有研究指出cIAP-1或者NDY-1与乳腺癌或者甲状腺癌等恶性肿瘤有着密切的关系[3]，但是与卵巢癌的相关性研究却不多。本文主要研究cIAP-1、NDY-1与卵巢癌的关系，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集我院在2017年1月至2020年2月期间保存的上皮性卵巢癌组织标本67例，患者年龄34～63岁，平均年龄(52.0±0.4)岁，其中浆液性上皮癌32例、黏液性上皮癌21例、子宫内膜样上皮癌14例；同时选取36例卵巢良性肿瘤组织，年龄31～67岁，平均年龄为(51.5±1.0)岁；40例正常卵巢组织，年龄30～66岁，平均年龄为(52.1±0.5)岁。研究对象纳入标准：①均经病理组织学确诊；②术前未经放化疗等手段进行治疗；③患者本人及家属知情并同意。排除标准：临床病历资料不全者。

1.2 检验方法

将所有组织标本切片处理，用免疫组化链霉卵白素一生物素复合体法(strep avidin-biotin complex，SABC法) 染色法进行染色，用二氨基联苯胺(diamionben zidene，DAB)进行显色。cIAP-1、NDY-1蛋白则采用通用型二抗、SP试剂盒以及DAB显色盒(由北京中杉金桥生物技术开发公司生产)。阳性及阴性对照则以阳性片及PBS代替一抗，并在高倍显微镜下观察cIAP-1、NDY-1蛋白的表达情况，同时严格按照SP试剂盒说明书严格操作。

1.3 疗效判定

cIAP-1主要在胞质中表达，NDY-1主要在细胞核中表达，为淡蓝色背景下黄色或棕黄色团块样染色物质；采用半定量积分法对染色强度进行评分：0分为无着色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色；阳性细胞比例评分为：1分为≤25%，2分为>25%～50%，3分为>50%～75%，4分为>75%。其中染色强度和阳性细胞比例得分之积，阳性表达为≥4分，阴性表达为<4分。

1.4 统计学方法

本次研究所得数据使用SPSS 19.0软件包，得到的计数资料采用χ2检验，相关性采用Spearson秩相关，当P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各卵巢组织cIAP-1、NDY-1表达比较

上皮性卵巢癌组织cIAP-1、NDY-1阳性表达率明显高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织(χ2=62.363、43.919，35.179、20.541，P均<0.05)；卵巢良性肿瘤组织cIAP-1、NDY-1阳性表达率明显高于正常卵巢组织(χ2=4.736和4.133，P均<0.05)。见表1。

表1 各卵巢组织cIAP-1、NDY-1表达比较(例，%)

2.2 cIAP-1、NDY-1表达与上皮性卵巢癌临床病理关系

中低分化患者cIAP-1和NDY-1阳性表达率明显高于高分化患者(P<0.05)；FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期患者NDY-1阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。见表2。

表2 cIAP-1、NDY-1表达上皮性卵巢癌临床病理关系(例，%)

2.3 相关性分析

上皮性卵巢癌组织cIAP-1和NDY-1表达呈正相关(γs=0.724，P<0.05)，见表3。

表3 相关性分析

3 讨论

临床上卵巢生发上皮细胞的持续性恶变，能够导致卵巢癌的发生，特别是在合并有雌激素受体敏感性改变的群体中，卵巢癌的发病风险可进一步上升，远期复发率和病死率也明显提高[4-5]。临床上手术治疗或者综合性的放化疗均对卵巢癌的治疗有着重要的作用，但是生存时间仍然较短，3年内的病死率仍然较高[6-7]，预后极差。卵巢癌的高侵袭性是预后较差的原因之一。恶性肿瘤的发生与发展过程中，有多种因素的参与，抑癌与促癌基因的失衡导致了肿瘤的发生，而与细胞增殖、迁徙能力有关的多种细胞因子的表达及协同作用共同决定了肿瘤的生物学特性。不同的肿瘤相关蛋白均能够通过对于癌细胞的生物学特征的影响，进而促进早期恶性肿瘤的发生。cIAP-1是细胞凋亡调控蛋白，具有稳定癌细胞染色体末端端粒结构的功能，可以抑制癌细胞的凋亡，促使癌细胞的侵袭和浸润能力的明显增强。同时cIAP-1的表达上升能够提高癌细胞G1/S期的细胞比例，促进癌细胞快速跨越G0期[8]；NDY-1是甲基化的修饰因子，能够通过对癌转录基因的修饰作用，促进癌细胞上游转录启动子的激活，导致癌细胞DNA持续性扩增的风险增加[9]。此外NDY-1对于卵巢上皮细胞有一定的修饰作用，还可以提高癌细胞的变形能力，促进癌细胞的转移和扩散[10]。

本次研究通过免疫组化方法检测了cIAP-1、NDY-1在卵巢癌患者中的表达情况，结果发现在卵巢良性肿瘤或者卵巢癌患者中，cIAP-1、NDY-1的表达阳性率均明显的上升，其中卵巢癌患者中的cIAP-1、NDY-1表达上升更为明显，提示cIAP-1、NDY-1能够显著影响卵巢上皮病变过程。通过汇集不同的相关文献，笔者认为这主要与cIAP-1、NDY-1的下列几个作用有关[11-12]：①cIAP-1的上升可以抑制癌细胞的凋亡速度，同时提高了癌细胞对患者基膜组织的浸润能力，还能够诱导癌细胞浸润临近正常盆腔组织；②NDY-1的上升能够导致癌细胞转录活性的上升，增强癌细胞上皮-间质转换的能力。此外黄华艺[13]的研究也发现，cIAP-1的表达浓度在卵巢癌患者中可平均上升30%以上，尤其是在那些合并有明显高肿瘤负荷表现或者远期病死率较高的患者中表达的更加明显。采用免疫组化染色分析发现，cIAP-1、NDY-1主要表达于癌细胞的细胞间质中，尤其是在细胞异型性较为明显的区域，cIAP-1、NDY-1的染色强度更深。在探讨cIAP-1、NDY-1的表达与卵巢癌临床病理特征的相关性研究中，可以发现在癌细胞分化程度较差的患者中，cIAP-1、NDY-1的表达阳性率较高，其中NDY-1的表达还能够进一步提高患者的临床分期，提示了cIAP-1、NDY-1对于卵巢癌临床病理特征的影响，这主要由于cIAP-1、NDY-1能够导致卵巢癌细胞分化成熟障碍；同时NDY-1的表达还能够促进癌细胞对于盆腔内其他组织器官的侵袭，增加了卵巢癌的临床分期。此外本次研究中并未发现cIAP-1、NDY-1的表达与淋巴结转移的相关性，因此推测cIAP-1、NDY-1的表达并不能影响癌细胞对于淋巴结的粘附能力。相关关系分析也可见，cIAP-1、NDY-1的表达呈现出显著的正性相关关系，提示了cIAP-1、NDY-1可能在促进卵巢癌的发生过程中具有一定的内在关联。

本次研究的创新性在于探讨了cIAP-1、NDY-1的表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系。综上所述，cIAP-1、NDY-1在卵巢癌中的呈高表达，与癌细胞分化和肿瘤分期具有一定相关性，其可能通过某种机制相互调节，共同促进卵巢癌的发生及肿瘤的进展。