肺泡灌洗液GM试验检查对提高侵袭性真菌病诊断率的研究

陈伟玲 李乐 邓虹 黄颖妍

[摘要] 目的 分析侵袭性真菌病（IFD）诊断中BALF GM试验的准确率、特异度、灵敏度。 方法 选定本院2018年1月至2021年1月收治的40例疑似IFD患者作为观察组，以及同期收入院的40例肺部细菌性感染者组作为对照组，比较两组BALF以及血清GM试验结果。计算GM试验的诊断准确率、灵敏度、特异度。 结果 观察组BALF及血清GM试验结果均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;观察组以及对照组BALF GM试验结果均高于血清 GM试验结果，差异均有统计学意义（P<0.05）;BALF GM试验诊断准确率85.00%、灵敏度91.89%、特异度66.67%均高于血清GM试验的75.00%、81.08%、33.33%，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 BALF GM试验在IFD诊断中具有较高的准确率、灵敏度、特异度，对IFD患者病情判断及临床治疗具有重要的指导意义。

[关键词] 侵袭性真菌病;半乳甘露聚糖检测;肺泡灌洗液;诊断效能

[中图分类号] R519          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2021）33-0120-04

[Abstract] Objective To analyze the accuracy， specificity and sensitivity of bronchoalveolar lavage fluid galactomannan （BALF GM） test in the diagnosis of invasive fungal disease（IFD）. Methods A total of 40 patients with suspected IFD admitted to our hospital from January 2018 to January 2021 were selected as the observation group， and 40 patients with pulmonary bacterial infection admitted to our hospital in the same period were selected as the control group. The BALF and serum GM test results of the two groups were compared. The diagnostic accuracy， sensitivity and specificity of GM test were measured. Results The test results of BALF and serum GM in the observation group were higher than those in the reference group， with statistically significant differences（P<0.05）. The results of BALF GM test in the observation group and control group were higher than those of serum GM test， with statistically significant differences （P<0.05）. The diagnostic accuracy （85.00%）， sensitivity （91.89%） and specificity （66.67%） of BALF GM test were higher than those of serum GM test（75.00%， 81.08%， 33.33%）， and the differences were statistically significant（P<0.05）. Conclusion BALF GM test has high accuracy， sensitivity and specificity in the diagnosis of IFD， and it has important guiding significance for the diagnosis and clinical treatment of patients with IFD.

[Key words] Invasive fungal disease; Detection of galactomannan; Alveolar lavage fluid; Diagnostic efficiency

侵襲性真菌病（Invasive fungal disease， IFD）是由于真菌侵入血液或组织而引发组织损伤、炎性反应的感染性疾病[1]。近年来，随着抗肿瘤药物、抗生素、免疫抑制剂的广泛应用，IFD的发生率明显增高[2]。据流行病学调查显示，我国IFD的发生率高达41.18%，死亡率高达60%[3]。IFD具有疾病进展速度快、病情凶险、死亡率高等特点[4]。故及早对IFD患者病情作出诊断，对改善患者预后具有重要意义。半乳甘露聚糖检测（GM试验）是近年来兴起的一项诊断技术，优点是无创伤性、灵敏度高、特异度高[5]。基于此，为进一步探究IFD诊断中GM试验的临床价值，本研究选定本院2018年1月至2021年1月收治的40例疑似IFD患者以及同期收入院的40例肺部细菌性感染者研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选定本院2018年1月至2021年1月收治的40例疑似IFD患者作为观察组，以及同期收入院的40例肺部细菌性感染者组作为对照组，已征得患者家属知情并签署知情同意书。观察组男21例、女19例;年龄42～85岁，平均（63.24±10.17）岁;病程在2～11 d，平均（6.52±2.34）d;原发疾病：6例风湿性心脏病、8例间质性肺疾病、5例糖尿病、21例慢性阻塞性肺疾病（COPD）;体重46～87 kg，平均（61.52±5.07）kg。对照组男22例、女18例;年龄43～85岁，平均（64.01±11.21）岁;病程3～10 d，平均（6.54～2.31）d;原发疾病：8例风湿性心脏病、7例间质性肺疾病、6例糖尿病、19例COPD;体重48～86 kg，平均（61.58±5.01）kg。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

纳入标准：①体温≥37.5℃，连续予以抗生素治疗4 d无效者;②年龄18～85岁者;③X线、CT检查，肺部存在新病灶者;④无明显纤维支气管镜检查禁忌证者;⑤病历资料完整、齐全者;⑥均知情，已同意行纤维支气管镜检查和肺泡灌洗术者。

排除标准：①研究前1周接受过抗真菌、抗细菌治疗者;②处于妊娠期、哺乳期女性;③合并免疫、血液系统疾病者;④中途从此项研究退出者;⑤合并恶性肿瘤者;⑥重大脏器功能障碍、衰竭者;⑦合并严重营养不良者;⑧合并帕金森、痴呆者;⑨患者已确诊侵袭性肺部真菌感染;⑩本人或家属拒绝行纤维支气管肺泡灌洗术者;？輥？輯？訛存在纤维支气管肺泡灌洗术禁忌证者。

1.2 方法

GM试验方法：①血清采集：采用ELISA法测定，具体步骤：采集空腹静脉血2 mL，置于无热源肝素抗凝管中，送检验科化验。②BALF采集：予以2%的利多卡因局麻，在目标端的支气管的开口处，将纤维支气管镜顶端紧密插入，通过活检孔快速注入50～100 mL经过37℃灭菌处理的氯化钠溶液，在13.30 kPa～19.95 kPa的负压吸引下将灌洗液回收，详细记录液体回收量，至少在30%～40%，经过低温及离心处理BALF后，取上清液完成GM试验。BALF及血清GM试验单次I值在1.0以上，即可判定为阳性，反之即为阴性[6]。

1.3 观察指标

比较两组BALF及血清GM试验结果。计算GM试验的诊断准确率、灵敏度、特异度。

1.4 统计学方法

采用SPSS 26.0统计学软件检验，正态分布计量资料，组间对比采用独立样本t检验，以均数±标准差（x±s）表示，检验水准α=0.05，以P<0.05为差异具有统计学意义。BALF以及血清GM试验结果，采用Kappa检验。检验水准α=0.05，Kappa≥0.75，表示一致性较好;0.4≤Kappa<0.75表示一致性一般，Kappa<0.4表示一致性较差。

2 结果

2.1 BALF及血清GM试验结果比较

观察组BALF以及血清GM试验结果均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;观察组以及对照组BALF GM试验结果均高于血清GM试验结果，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 GM试验诊断效能

40例疑似IFD患者最后临床诊断37例，BALF GM试验确诊36例，血清GM试验确诊31例。BALF GM试验诊断准确率85.00%、灵敏度91.89%、特异度66.67%均高于血清GM试验75.00%、81.08%、33.33%，差异均有统计学意义（P<0.05）;BALF GM试验结果明显高于血清GM试验结果，对IFD早期诊断和临床治疗有很大意义。见表2～3。

3 討论

IFD又被称为“侵袭性真菌感染”，是指真菌侵入人体血液以及组织中，生长、繁殖过程中引发炎症反应、器官功能障碍、组织损害的一种病理生理过程，表现为胸闷、无力、失眠、头晕、干呕、咳嗽等[7-8]。以曲霉、酵母样真菌为主的丝状真菌是引发IFD的主要病原菌，多见于血液系统肿瘤、器官移植、重症监护室的患者[9]。近年来，随着我国糖皮质激素以及抗生素的广泛应用，IFD的发生率明显增高[10]。真菌培养是临床诊断IFD的传统方法，耗费时间长、灵敏度低，不能及时检出IFD[11]。病理活检虽然是确诊IFD的金标准，但具有一定的创伤性，且诊断费用昂贵，大部分患者不能接受，并未在临床中广泛推广开来[12]。故寻求一种无创伤、灵敏度、特异度均较高的诊断技术是目前临床高度关注的内容。

近年来，GM试验被广泛应用于临床，并得到广大临床医务工作者的认可、赞同，具有诊断迅速、灵敏度高、特异度高、无创伤等优点[13]。本研究显示，观察组BALF以及血清GM试验结果均高于对照组，观察组以及对照组BALF GM试验结果均高于血清 GM试验结果（P<0.05），表明在IFD诊断中，BALF GM试验与血清GM试验结果存在差异，血清GM试验浓度相对较低。究其原因，可能与以下几点有关：当机体受到真菌感染后，吞噬细胞会将大量的真菌吞噬，持续释放高浓度的3-β-D 葡聚糖，导致患者体液及血液中的3-β-D 葡聚糖含量均明显增高，但在IFD发病早期，真菌并没有进入到患者的血液中，故血清GM试验的诊断结果低于BALF GM试验，不利于对IFD的早期诊断[14]。另外，血清GM试验诊断结果还会受到半合成青霉素、磺胺类药物、抗肿瘤药物、球蛋白、白蛋白等因素的影响而出现假阳性[15]。BALF GM试验检测的是GM，很好的解决了以上问题，曲霉菌细胞壁由GM等成分组成，如果曲霉菌入侵患者机体，GM就会被释放出来，在放射学征象以及临床症状还没出现时，GM就可以被检测出来。故在IFD诊断中，BALF GM试验与血清GM试验结果存在一定的差异。在周建林等[16]研究中，侵袭性肺曲霉菌感染（IPA）组血清GM试验数据为（0.65±1.08）μg/L、BALF GM试验数据为（2.41±2.19）μg/L;非IPA组血清GM试验结果为（0.20±0.15）μg/L、BALF GM试验数据为（0.37±0.33）μg/L，IPA组BALF及血清 GM试验数据均高于非IPA组（P<0.05）。不论是IPA组还是非IPA组，BALF GM试验数据均高于血清GM试验数据（P<0.05）。证实了BALF GM试验的可靠性，与本研究结果接近。

本研究显示，BALF GM试验诊断准确率85.00%、灵敏度91.89%、特异度66.67%均高于血清GM试验（P<0.05）。表明IFD诊断中BALF GM试验具有较高的灵敏度以及特异度。究其原因，可能与IFD患者肺泡中存在大量的吞噬细胞，吞噬细胞将真菌吞噬之后，会释放大量的GM，故BALF GM试验在IFD诊断中的敏感性较高。另外，BALF GM试验中采用ELISA法检测血清GM，是早期诊断侵袭性曲霉菌的重要方法，灵敏度以及特异度均较高。但需要注意的是：BALF GM试验也会受到青霉菌、镰刀菌、新型隐球菌、双歧杆菌等因素的影响而发生交叉反应，进而出现假阳性，故GM试验结果并非百分百的精准、可靠，也存在假阳性的可能。故在IFD患者采用BALF GM试验诊断的过程中，必要时可根据患者个体差异性，联合病理诊断，最大限度提高IFD的诊断准确率，避免患者错过最佳的治疗时间。BALF GM试验在采集样本的过程中，存在一定的侵入性，会引发一定的不适，降低患者治疗配合度、依从性，故在临床实践过程中，医生应不断的完善自身操作技巧，确保标本一次性采集成功，尽可能减轻患者不适。

本研究也存在一定的不足，例如样本容量较小、研究时限较短，对本次结果的一般性、普遍性、有效性有所影响，故还需临床继续扩大样本容量、延长研究时限，为评估BALF GM试验在IFD诊断中的临床价值提供更多参考依据。

综上所述，IFD患者采纳BALF GM试验诊断，极大的提高了诊断准确率、灵敏度、特异度，可作为IFD诊断的首选技术，在IFD诊治工作中具有重要的指导意义。

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（收稿日期：2021-06-24）