ALB、CD64及BCL-2在重症肺炎中的表达及与病情严重程度、预后的关系研究

刘瑞莹 李群 杨帅 唐惠星 高倩

重症肺炎为临床事件的危急重症，病情严重者可诱发多种器官衰竭，危及生命。近年来，随着感染的高危宿主增多，细菌耐药性增加导致细菌耐药或者多药耐药现象日益严重，尽管不断有学者研究出现新的抗菌药物，但重症肺炎仍是临床中诊治困难的疾病，且大多患者预后差［1-2］。相关研究表明血清白蛋白（serum albumin，ALB）与非感染性疾病的预后存在密切联系，也有学者报道重症肺炎疾病严重程度及预后与ALB 有关，但缺乏明确证据［3］。中性粒细胞CD64（cluster of differentiation 64，CD64）是临床公认的细菌感染性重要标志物，对多种感染性疾病的诊断有重要价值［4］。B 细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell leukemia 2，BCL-2）可拮抗凋亡细胞的表达，抑制细胞凋亡，可保护患者支气管内皮的完整性，并通过抑制巨噬细胞浸润，减轻支气管平滑肌炎性反应，但BCL-2 表达与重症肺炎患者预后关系的研究不足［5］。本研究将探讨ALB、CD64 及BCL-2 的表达重症肺炎患者病情严重程度及预后的关系，给临床检测患者病情、促进患者预后提供参考。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月至2018年1月本院收治的52 例重症肺炎患者及52 例普通肺炎患者，设为重症肺炎组及普通肺炎组。重症肺炎组男25例，女27 例；平均年龄（53.59±3.12）岁；合并糖尿病及高血压的患者32 例，合并支气管哮喘11例，合并慢性阻塞性肺疾病9 例。普通肺炎组男27 例，女25 例；平均年龄（53.66±3.20）岁；合并糖尿病及高血压的患者29 例，合并支气管哮喘12例，合并慢性阻塞性肺疾病11 例。两组性别、年龄的一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院医学伦理委员会批准，受试者签署知情同意书。

纳入标准：①所有患者均符合《中国成人社区获得性肺炎诊断及治疗指南》［6］中关于普通肺炎及重症肺炎的相关诊断标准；②纳入研究前未进行其他治疗；③临床资料、影像资料完整；④年龄在32～79 岁之间。两组排除标准：①合并其他恶性肿瘤、器官衰竭等严重者；②入院24 h 内死亡或自动出院的患者；③妊娠期、哺乳期妇女，精神疾病者，合并血液系统疾病及腹腔、泌尿生殖系统、神经中枢系统感染者；④无法进行胸部影像学检查者。

1.2 方法

1.2.1 检测方法

所有对象均在医生协助下完善相关检查，于次日清晨空腹抽取静脉血5 mL 自然凝固后以3 000 rpm 离心10 min，取血清。采用强生Vitros350 全自动干式化学分析仪，以酶联免疫吸附法测定血清中ALB 水平。采用免疫组化染色，将两组患者肺部组织标本经常规石蜡切片、脱水，测定BCL-2 及CD64 水平，小鼠抗人荧光色素标记的单克隆抗体CD64、BCL-2 由美国Beckman Coulter 提供，DBA显色剂由北京中杉金色桥生物技术公司提供，抗体免疫组织化学试剂盒由上海嵘葳达实业有限公司提供。ALB 正常范围值：35～51 g/L［7］。

1.2.2 染色强度评分标准

BCL-2、CD640 染色染色强度评分标准［8］：棕黄色，则判断为阳性。检查结果无阳性细胞，则为阴性（-），阳性细胞不足50%，则判定为阳性（+），阳性细胞数量超过5%，则为强阳性（++）。阳性率=阳性例数/总例数×100%。

1.2.3 肺部感染严重程度评定标准

按照临床肺部感染评分（Clinical Pulmonary Infection Score，CPIS）［9］及序贯器官衰竭评分（Sequential Organ Failure Assessment Score，SOFA）［10］标准对两患者进行评分，记录两组患者得分情况。CPIS评分：总分为0～12 分，评分≦6 分可停用抗生素，评分越低代表患者肺部感染程度越轻。SOFA 评分：总分0～24分，总分评分越高代表患者预后越差。

1.2.4 随访

以电话随访或门诊复查的方式对重症肺炎患者进行为期2年的随访，随访截止时间2020年1月或死亡。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计量资料采用（±s）描述，行t检验；计数资料通过n（%）描述，采用χ2检验；绘制ROC 曲线，Kaplan-Meier 生存分析ALB、CD64、BCL-2 表达对重症肺炎患者预后生存的影响，使用tarone 法进行检验；影响患者预后的相关因素采用非条件单因素和多因素Logistic回归分析；P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 对比ALB、CD64 及BCL-2 在两组患者中的表达情况

重症肺炎患者ALB 水平低于普通肺炎者，重症肺炎患者CD64 及BCL-2 阳性表达率显著高于普通肺炎者，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。见表1、图1。

表1 ALB、CD64 及BCL-2 在两组患者中的表达情况［n（%），（±s）］Table 1 the expression of ALB，CD64 and Bcl-2 in the two groups［n（%），（±s）］

表1 ALB、CD64 及BCL-2 在两组患者中的表达情况［n（%），（±s）］Table 1 the expression of ALB，CD64 and Bcl-2 in the two groups［n（%），（±s）］

组别重症肺炎组普通肺炎组t/χ2值P 值n 52 52阴性14（26.92）32（61.54）阴性17（32.69）30（57.69）--ALB（g/L）20.74±5.74 28.87±4.58 7.984 0.001 CD64阳性38（73.08）20（38.46）12.630 0.001 BCL-2阳性35（67.31）22（42.31）6.561 0.010

图1 重症肺炎组BCL-2、CD64 免疫组化染色图（SP，×300）Figure 1 BCL-2 and CD64 immunohistochemical staining image of severe pneumonia group（SP，×300）

2.2 不同ALB、CD64 及BCL-2 水平与重症肺炎患者SOFA、CPIS 评分的关系

ALB≦30 g/L、CD64 及BCL-24 阳性者SOFA、SOFA 评分低于ALB＞30 g/L、CD64 及BCL-24 阴性者，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 ALB、CD64 及BCL-2 表达与重症肺炎患者预后的相关性

ALB≦30 g/L 及＞30 g/L 平均生存期分别为（22.55±1.33）个月、（26.75±1.45）个月；CD64 阳性及阴性平均生存期分别为（18.29±1.39）个月、（22.79±1.19）个月；BCL-2 阳性及阴性平均生存期分别为（21.43±1.34）个月、（27.29±1.47）个月。生存分析显示ALB＞30 g/L 者生存期较长，CD64 及BCL-2 阴性者生存期较长，Keplanmeier 生存曲线差异有统计学意义（P＜0.05）。见图2。

表2 不同ALB、CD64 及BCL-2 水平与重症肺炎患者SOFA、CPIS 评分的关系（±s）Table 2 The relationship between different levels of ALB，CD64 and Bcl-2 and SOFA and CPIS scores in patients with severe pneumonia（±s）

表2 不同ALB、CD64 及BCL-2 水平与重症肺炎患者SOFA、CPIS 评分的关系（±s）Table 2 The relationship between different levels of ALB，CD64 and Bcl-2 and SOFA and CPIS scores in patients with severe pneumonia（±s）

组别ALB（g/L）t 值P 值CD64（%）t 值P 值BCL-24（%）t 值P 值n≦30＞30 40 12--阳性--38阴性14--阳性--35阴性17----SOFA 评分5.41±0.74 6.55±0.85 4.524 0.001 6.12±1.13 5.29±0.89 2.475 0.017 6.34±1.36 5.47±1.12 2.4307 0.025 CPIS 评分6.79±1.12 7.64±1.25 2.246 0.029 7.27±139 6.41±1.20 2.048 0.046 7.33±1.38 6.41±1.25 2.349 0.023

图2 重症肺炎患者预后生存曲线Figure 2 Survival curve of patients with severe pneumonia

2.4 52 例重症肺炎患者两年生存率

随访期间，52 例重症肺炎患者共死亡23例，存活29 例，死亡率为44.20%，存活率为55.77%。

2.5 影响重症肺炎患者预后生存的因素分析

SOFA 及CPIS 评分＞6 分、CD64（阳性）、BCL-24（阳性）、ALB（≦30 g/L）是影响重症肺炎患者预后生存的独立危险因素（P＜0.05）。见表3。

3 讨论

重症肺炎是由细菌、病毒或其他非典型病原体引起的肺实质炎症，严重威胁我国居民的生命安全。对肺炎进行早期的诊断和治疗对改善患者预后有重要意义，目前临床多依据影像学表现来诊断肺炎［11-12］。相关研究指出，ALB 与慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者预后密切相关，但相关感染源分层分析未明确［13］。既往研究表明，正常生理情况下，CD64 在中性粒细胞表面呈低水平表达，而机体受到炎性感染时，多种炎症因子受到刺激，使CD64 表达迅速升高［14］。本研究重点探讨ALB、CD64、BCL-2 表达与重症肺炎患者疾病严重程度与预后的相关性。

本研究结果显示，重症肺炎患者ALB 水平低于普通肺炎者，重症肺炎患者CD64 及BCL-2 阳性表达率均高于普通肺炎者，这一研究结果与既往文献报道结果一致［15］。分析其原因：ALB 在肝脏中合成，对促进患者机体代谢，运输营养起着重要作用，重症肺炎患者血清ALB 降低考虑与患者感染程度严重及营养消耗过度有关。因此重症肺炎患者体内CD64 及BCL-2 表达量显著上升，这与Hiwa 等学者［16］研究报道结果一致。

SOFA 及SOFA 评分为临床常用的评估患者各器官功能及肺部感染程度的指标。国外研究指出，BCL-24 可促进促炎质生成，抑制抗炎介质表达，从而促进感染性疾病的发生，加重感染性疾病病情严重程度［17］。本研究结果提示ALB、CD64 及BCL-2 水平异常会影响患者疾病严重程度。

表3 影响重症肺炎患者预后生存的单因素和多因素分析Table 3 Univariate and multivariate analysis of prognosis and survival in patients with severe pneumonia

生存分析提示ALB、CD64 及BCL-2 与重症肺炎患者预后存在密切联系。随访结果显示，52 例重症肺炎患者共死亡23 例（44.20%），重症肺炎患者2年生存率为55.77%。本研究通过非条件多因素Logistic 回归模型进一步分析，得出SOFA 及CPIS评分＞6 分、CD64（阳性）、BCL-24（阳性）、ALB（≦30 g/L）影响重症肺炎患者预后生存的独立危险因。亦说明患者感染加重时，可通过消耗ALB 水平调节免疫功能，而ALB 水平下降也提示患者脏器负担加重，制约吞噬细胞的活性，加重患者感染程度；CD64、BCL-24 水平上调会加重患者感染，这也是疾病严重程度越高患者CD64、BCL-24 水平越高的原因［18］。

综上所述，重症肺炎患者体内ALB 呈阴性、CD64 及BCL-2 呈阳性，上述指标表达异常会加重患者病情发展；OFA 及CPIS 评分＞6 分、CD64（阳性）、BCL-24（阳性）、ALB（≦30 g/L）影响重症肺炎患者预后生存的独立危险因素。但本研究中纳入样本量较少，研究结果难免出现偏倚，后续将扩大样本量，进一步深入研究ALB、CD64、BCL-24 的表达与重症肺炎患者疾病严重程度与预后的关系，为临床诊治症状肺炎提供新方向。