H型高血压与亚甲基四氢叶酸还原酶基因的关系①

范巧菊，徐 男，隋小芳，费秀斌，黄佳滨，陈尚君(.佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 54003；.珠海市人民医院，广东 珠海 59000)

高血压是一种十分常见的疾病，是冠心病、脑卒中、周围血管疾病、心力衰竭、肾功能不全、视网膜出血、视力障碍的重要影响因素[1]。9.78亿成年人(约占据全球成年人的28%)罹患高血压[2]。遗传基因是诱发高血压疾病发生的因素之一[3]。H型高血压是伴有高同型半胱氨酸血症，即Hcy≥10 μmol/L[4]。血浆同型半胱氨酸升高是许多不良事件发生的危险因素，如痴呆、阿尔茨海默病、骨折，尤其是心血管疾病[5]。一项来自中国卒中一级预防试验的多社区随机研究显示，在20,702名成人中，只有19.7%的高血压患者没有发生H型高血压[6]。

1 资料与方法

1.1 研究对象

所有研究对象是2018-01～03于佳木斯大学附属第一医院就诊的高血压患者279例，其中有139例H型高血压患者(H组)和140例原发性高血压患者(HT组)。原发性高血压组标准纳入标准参照2017年《高血压防治指南》；H型高血压组纳入标准，即符合原发性高血压且Hcy≥10μmol/L。所有以上研究对象是长期居住在佳木斯地区且没有血缘关系的汉族人，本研究已经通过佳木斯大学附属第一医院伦理委员会的认可，且已经获得研究对象的知情同意书，同意提供外周静脉血做基因型检测分析。

1.2 实验方法

采集研究对象外周血2mL放入EDTA真空抗凝管中，贮藏于-20℃冰柜中。用盐析法从冷冻EDTA外周血中提取基因组DNA。采用聚合酶链式反应限制片段长度多态性对SNP进行基因型分析，采用高分辨率HRM进行基因型分析。为了保证基因分型的质量，我们随机选取了三种基因型样本进行直接测序，结果没有区别。

1.3 统计学方法

采用SPSS22.0软件处理。Hardy-Weinberg平衡检验验证样本的群体代表性，P>0.05为符合HWE。研究样本均值的组间比较使用成组t检验。分类变量用频数表示，不同基因型间比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 H组、HT组临床基本资料的比较

H组、HT组研究对象的临床基本资料比较，见表1，H组、HT组在年龄组成、性别比例方面无差异，具有可比性(P>0.05)。与HT组比较，H组中Hcy高于HT组，差异有统计学意义，其他临床指标无明显差异(P>0.05)。

表1 H组、HT组一般临床资料的比较

2.2 MTHFR C677T变异位点在两组间的基因型和等位基因频率的分布比较

两组间MTHFR C677T基因多态性的基因型和等位基因频率分布，见表2。与HT组相比，H组中CC、CT基因型频率均低于HT组(15.11% vs. 34.28%，43.16% vs.47.86%)；TT基因型频率明显高于HT组(41.73% vs. 17.86%)，差异具有统计学意义(P=0.00001)。等位基因C频率低于HT组(36.70% vs. 58.21%)，等位基因T频率高于HT组(63.30% vs. 41.79%)，无统计学差异(P=0.85)。

表2 H组、HT组MTHFR C677T基因多态性的基因型及等位基因频率分布

2.3 不同基因型(CC、CT、TT基因型)的患者Hcy的分布比较

根据MTHFR C677T基因多态性在高血压患者中的分布，将其分为3组(CC、CT、TT组)来观察患者Hcy的水平。携带TT基因型的患者与CC、CT基因型患者Hcy水平的比较，差异有统计学意义(P<0.05)；携带CC基因型与CT基因型患者Hcy水平的比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见图1。

图1 不同基因型(CC、CT、TT基因型)患者中Hcy的水平

3 讨论

临床研究表明，75%的中国高血压患者伴有高同型半胱氨酸血症(HHcy)，即为H型高血压[7]。Hcy在人体内是含硫氨基酸的中间代谢产物，其中亚甲基四氢叶酸还原酶和半胱氨酸β合成酶的变化可以影响Hcy水平[8]。MTHFR是Hcy代谢途径中的关键酶，MTHFR C>T的错义突变导致了TT和CC基因型载体的正常酶活性分别降低了70%和35%左右，使得体内同型半胱氨酸水平升高[9]，Hcy浓度的升高会增加对血管内皮的损伤和促进氧化，这将导致血管内皮的损伤和抗氧化剂的不均衡性，促进平滑肌细胞增殖、分化和钙离子的沉积，减少弹性胶原蛋白，使动脉壁弹性和顺应性降低，诱导血管收缩，继而导致高血压的发生。本研究显示H型高血压患者群体中TT基因型、T等位基因频率明显高于原发性高血压患者，表明携带TT基因型人群罹患H型高血压的风险显著增高。然而，影响血压变化的因素较多，MTHFR C677T基因多态性对高血压患病影响的比重易被其他因素稀释，因此可能在不同的人群、种族、环境变化中难得出一致的结论。

综上，本研究证实MTHFR C>T基因与H型高血压密切相关，同时明确了携带TT基因型高血压患者的Hcy水平比CC和CT基因型显著增高，为H型高血压的早期发现提供了临床基础。