酶联免疫吸附试验与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检验中的应用

韦清青

摘要：目的 对比分析甲苯胺红不加热血清试验（tolulized red unheated serum test，TRUST）、酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）在梅毒检验中的价值。方法 将2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者给予TRUST与梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（treponema pallidum particle assay，TPPA）检验，并与2020年1月至12月233例实施ELISA+TPPA+TRUST检验结果对比。结果 TRUST+TPPA+ELISA检出率高出TRUST+TPPA12.44%，存在差异（P<0.05）。结论 TRUST+TPPA+ELISA检验方式在梅毒中检出率更高，值得临床广泛推广应用。

关键词：梅毒螺旋体感染;甲苯胺红不加热血清试验;梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验;梅毒;酶联免疫吸附试验

【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2021）16-01

近年来，随着人们生活方式与理念的改变，梅毒感染人群越来越多。梅毒由梅毒螺旋体（treponema palludim，TP）感染所致，具有较大危害性、传染性，常见传播方式为性行为传播、血液传播、胎盘垂直传播等[1-2]。另外，该病临床症状较复杂，早期多于生殖器官上出现硬下疳，且随临床分期加重，病原体随血液循环向全身扩散，逐渐侵袭体内多器官，进而威胁到患者生命健康[3]。目前针对梅毒主要以早确诊、早治疗，血清学检测是临床诊断常用方式包含梅毒螺旋體明胶颗粒凝聚试验（treponema pallidum particle assay，TPPA）、甲苯胺红不加热血清试验（tolulized red unheated serum test，TRUST）、酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）等，TPPA虽临床诊断准确性高，但其费用极高，存在一定局限性，难以作为常规筛查项目[4-5]。现就其他两种检测进行对比，分析其在梅毒检测中的临床价值。如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2019年4月至12月本院收治的233例疑似梅毒患者给予TRUST与梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验（treponema pallidum particle assay，TPPA）检验，其中，男性65例，女性168例，年龄20～70岁，平均（45.02±1.04）岁，与2020年1月至12月233例实施ELISA+TPPA+TRUST的患者中男性64例，女性169例，年龄20～70岁，平均（45.10±1.09）岁。纳入两组疑似梅毒患者一般资料对比无差异（P>0.05）。

1.2 方法

所有患者就诊后给予TRUST、ELISA、TPPA进行TP阳性检测。（1）TRUST：在加样卡片圈中放置50ul血清样本，均匀涂在整个卡片圈，轻摇匀抗原液，试剂盒由上海荣盛生物药业有效公司所产，试剂盒提供针头加入抗原液1滴，之后将卡片放置到立体脱色摇床上，且以100r/min速度进行振荡，摇匀8分钟，在亮光下立即观察结果。通常以圆圈内出现红色或粉色絮状物为阳性。（2）ELISA（英科新创（厦门）科技有效公司）：具体操作：分别在相应孔中加入100uL阴、阳性对照血清或待测样本，覆上封板膜置37℃温育60分钟，用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间），并分别在每孔中加入酶标记抗原100uL，随后再次覆上封板膜温育30分钟，洗涤5次，洗涤后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间），之后每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，暗置30分钟后每孔加入终止液50uL，混匀。测定时用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时，需用空白对照孔调零），并记录结果。操作完毕将两组检验结果进行观察和对比。

1.3统计学处理

采用SPSS21.0统计分析软件，符合正态分布的计量资料以（）表示，两组间比较采用t检验;计数资料以率表示，两组间比较采用X2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

TRUST+TPPA+ELISA检出率高出TRUST+TPPA 12.44%，存在差异（P<0.05），见表1：

3 讨论

近些年来，我国梅毒感染患者持续增加，成为报告病例数最多的性病梅毒传染性强、潜伏期长，潜伏期及Ⅱ期患者临床症状不明显，多表现为皮肤病，易被患者所忽略，而梅毒患者感染艾滋病是健康人群5倍以上，对此，加强对TP的检测极为重要[6-7]。

TPPA是敏感性、特异性高的检测方式具有良好的诊断准确性，但其收试剂价格的限制，从而难以被临床广泛使用，因此，无法作为常规筛查的项目[8]。ELISA法是以已经工程重组抗原研制的方式，可对血清中梅毒特异性抗体检测，在梅毒诊断中具有极高敏感度，适于大规模数据筛查和疾病的诊断。TRUST是以非特异类脂质抗原进行抗心磷脂抗体检测，该类抗原多数和其他非特异行抗体出现交叉反应，故诊断性不高[9-10]。由本文研究结果呈现，TRUST+TPPA+ELISA检出率高出TRUST+TPPA 12.44%，存在差异（P<0.05）。并和周晓玲[11]学者研究结果相似。就其原因，ELISA法酶纯度高、催化反应的转化率高，具有较高专一性，并且性能稳定，灵敏度显著高于凝集反应，该方式可同时用于检测血清中梅毒抗体IgM和IgG，因此，易检出梅毒抗体弱阳性标本，结合酶化学反应的抗体与抗原反应的特异性和敏感性，故有效提高了该方式的减出率[12-13]。

综上所述，TRUST+TPPA+ELISA检验方式更具有价值，患者检出率更高。

参考文献：

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