卧龙自然保护区一例野猪死亡的原因分析

何廷美，钟锐，施小刚，毕波，黄迪，周潇潇，李敏，周紫峣，彭广能*

（1.四川卧龙国家级自然保护区管理局四川阿坝 623000；2.四川农业大学动物医学学院成都 611130；3.成都市动物疫病预防控制中心成都 610041）

野猪，哺乳纲偶蹄目猪科猪属，杂食动物，其分布几乎遍及中国。栖息环境从森林到灌丛、草地和沼泽都有分布，与家畜、人类重叠面积广，是人类影响环境和自然区域之间的重要联系[1]。同时野猪作为众多传染性病原的宿主在野生动物和家养动物疾病传播中起着重要作用，例如结核分枝杆菌[2,3]。笔者就一例野猪的死亡原因展开调查，为保护卧龙自然保护区野生动物提供一定的科学资料。

1 临床症状及解剖

2020 年4 月2 日，保护站巡护工作人员在卧龙自然保护区耿达镇崔家磨子沟（经度：103.29381；纬度：31.08219）处发现一只野猪，不能站立行走，侧躺于沟谷旁，呼吸微弱，经过抢救无效死亡。剖解野猪体况较差，头面部、肩胛部和四肢有大面积脱毛、皮屑和痂皮，被毛根部有出血点，体表有多量蜱虫寄生；腹腔脏器可见脾脏体积偏小，胃部有出血点，小肠肠道有轻微粘连，盲肠中有大量泥沙碎石沉积，体积膨大，其余未见异常。

2 细菌分离鉴定：

将病料（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）无菌接种在LB 普通琼脂培养基上，37℃培养。12h 后可见在普通LB 培养基上生长出表面光滑湿润、圆形凸起、边缘整齐的乳白色菌落（见图1a）。革兰氏染色镜检，油镜下可见大量蓝紫色球菌（见图1b）。分离菌株用细菌16S rDNA 通用引物扩增测序，测序结果经BLAST同源性对比后确认该菌为猪葡萄球菌。

3 病毒核酸检测

图1 a 分离株菌落形态

图1 b 革兰氏染色后油镜下细菌形态（1000×）

参照北京亿森宝生物科技有限公司通用型单重荧光PCR 检测试剂盒，对猪瘟、非洲猪瘟、猪呼吸与繁殖综合征、口蹄疫、猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）核酸进行q PCR 或者q RT-PCR 扩增。检测结果为PCV2 阳性，其余病毒核酸检测均为阴性。

4 肠道寄生虫检查

采集大肠和小肠内容物，进行漂浮和沉淀法镜检未见寄生虫虫卵。提取粪便DNA，设计隐孢子虫、十二指肠贾第虫、毕氏肠微孢子虫、芽囊原虫的特异性引物，通过巢氏PCR 扩增，1%琼脂糖凝胶电泳对其进行检测，检测结果均为阴性。

5 组织病理学

对该野猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、小肠、皮肤进行了组织经病理学检查，结果见图2a-i。

6 讨论

首先，该野猪有严重的寄生虫寄生和多量蜱虫感染，导致体况较差。蜱虫不仅是多种疾病的传播媒介，还可在叮咬时释放毒素引发蜱瘫，蜱瘫主要是由于神经系统的功能削弱，宿主运动性纤维传导障碍[4]，引起上行性肌肉麻痹而导致全身无力、四肢瘫痪。同时该毒素也有可能导致宿主心律失常、呼吸衰竭而亡[5]。所以多量蜱虫寄生可能是导致野猪丧失行动能力同时死亡的加速器。

同时该野猪PCV-2 检测呈阳性。PCV-2 感染可能会导致机体内淋巴细胞的凋亡和耗竭、干扰素生成功能受损，机体免疫反应降低，引起严重的免疫抑制和多系统病变[6]。

图2 a 心：陈旧性梗死。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 b 肝：淤血及含铁血黄素沉积。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 c 脾：大量含铁血黄素沉积。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 d 肺：肺泡壁增厚淤血。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 e 肺：肺出血，肺泡腔内见数量不等的红细胞。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 f 肾：肾小管上皮细胞变性坏死，肾小球系膜基质增生。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 g 胰腺：胰腺及胰岛组织结构正常，未见明显组织病理损伤。HE，Ba r=50μm，200×.

图2 h 小肠：小肠黏膜层坏死。HE，Ba r=200μm，40×.

图2 i 皮肤：寄生虫感染，毛囊及皮脂腺数量明显减少，皮肤表面形成痂皮，在痂皮下方或内部见大量虫体。HE，Ba r=200μm，40×.

猪葡萄球菌感染可能引起猪的渗出性皮炎、化脓性肺炎、败血性多发性关节炎，严重者可能因败血症死亡[7]。由此推断该野猪的死亡可能是由于在营养不良、免疫力低下的状态下继发了猪葡萄球菌感染导致的。

最后，病理切片显示该野猪肺脏存在出血的现象，肝脏有含铁血黄素沉积，可能是由于内脏被外力创伤或者某些出血性疾病所致。而野猪小肠黏膜层也存在坏死的现象，同时剖检可见整个小肠有轻微粘连的情况，盲肠有大量的碎石泥沙堆积，胃部有出血点，不排除存在急腹症等严重的胃肠道疾病，而这些疾病一般病情多变，发展迅速，处理不当也可能造成死亡。

综上所述，推测造成该野猪死亡的原因可能是蜱虫等寄生虫感染和PCV-2 阳性，双重“打击”导致猪只免疫力极度低下，同时继发了猪葡萄球菌感染造成多器官功能衰竭而死。