天津市售贝类产品中13种麻痹性贝类毒素膳食暴露评估

时文博　陈永平　韩现芹　王愿宁　李春青　高丽娜

摘要：使用液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）对156个天津市售贝类产品中的13种麻痹性贝类毒素进行测定。根据测定结果，采用点评估方法对麻痹性贝类毒素进行急性膳食暴露风险评估。结果显示在成年人群中，天津市售贝类产品中13种麻痹性贝类毒素的急性风险指数%ARFD为 0～0.313，均小于1，说明急性膳食暴露水平均为安全状态，可放心食用。

关键词：市售贝类;麻痹性贝类毒素;膳食暴露;风险评估

中图分类号：R114       文献标识码：B

近年来，海洋环境污染日益严重，有毒藻类导致的赤潮频发。而贝类由于自身滤食性的特征，滤食到有毒藻类后会在体内积累产生贝类毒素。贝类毒素有多种类型，目前已经发现的主要有麻痹性贝类毒素（PSP）、腹泻性贝类毒素（DSP）、记忆缺失性贝类毒素（ASP）等。其中麻痹性贝类毒素是其中分布范围最广，发生频率最高，人体危害最大的一类[1-2]。近年来，因食用贝类导致麻痹性贝类毒素中毒的事件时有发生，天津作为贝类消费量较大的城市，风险隐患较高。本文使用液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法对天津市售的9个品种贝类中13种麻痹性贝类毒素进行了检测，并对其膳食暴露风险进行了评估，对保障消费者舌尖上的安全具有积极的促进作用。

1  材料和方法

1.1  样品采集

采样时间为2017年9月至2019年7月，每2个月采样1次，采集天津市沿海码头及批发市场上销售的9个品种共计156个贝类样品，具体采样品种及数量见表1。样品采集后清水清洗，取出全部组织，使用高速组织搅拌机搅碎后，-18℃冷冻保存。

1.2  试剂与仪器

13种麻痹性贝类毒素（STX、dcSTX、NEO、dcNEO、GTX1、GTX2、GTX3、GTX4、GTX5、dcGTX2、dcGTX3、C1、C2）标准物质，购于加拿大海洋生物研究所。乙腈、甲酸、乙酸均为色谱纯，甲酸铵、氨水均为优级纯。

岛津LC-20A高效液相色谱仪;AB SCIEX 4000QTRAP三重四级杆质谱仪;Milli-Q Advantage A10超纯水系统;Supelco ENVI-Carb固相萃取柱（3 mL，500 mg）;均质机;漩涡震荡器;Sigma 3-30K高速冷冻离心机;恒温水浴锅。

1.3  样品检测

样品前处理方法改进自吴海燕等[3]，前处理后采用液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法进行测定。为统一评估标准，计算检测样品中麻痹性贝类毒素的总毒力STXeq[4]。

其中Xi为各麻痹性贝类毒素的含量，ri为麻痹性贝类毒素的毒性因子，见表2。

13种麻痹性贝类毒素的检测结果如表3所示，在所采集的156个贝类样品中，共有44个样品检出麻痹性贝类毒素，检出率为28.2%。按贝类品种看，共6个品种检出，检出率由高到低排序分别为扇贝 66.7%、紫贻贝58.3%、毛蚶58.3%、脉红螺20.8%、牡蛎16.7%、菲律宾蛤仔16.7%。检出的浓度（μg STXeq/kg）范围分别为紫贻贝15.3～288.5、扇贝8.2～220.8、毛蚶31.3～180.9、脉红螺3.9～55.1、牡蛎1.8～66.8、菲律宾蛤仔15.2～15.6。

2  膳食暴露评估方法

膳食暴露评估是一种评价某种食物食用安全性的方法，是根据人体对某种污染物通过食物的摄入量进行的定量评估。膳食暴露评估目前有多种模型，其中最常用的是点评估模型[5]。目前国内外常用的点评估方法为分慢性膳食暴露评估模型和急性膳食暴露评估模型。本文评估的13种麻痹性贝类毒素被人体摄入后主要表现为急性中毒症状，因此本文使用急性膳食暴露的点评估模型进行评估。

使用国际通用的每日摄入量估算方法建立13种麻痹性贝类毒素急性膳食暴露的点评估模型，每个月取所有检出品种中的最高残留量作为评估数据，分别计算天津居民食用贝类产品产生的麻痹性贝类毒素的膳食暴露量EXPa。

EXPa为急性膳食暴露量（μg·kg-1·d-1）;LP为人群日消费量（g·d-1）;HR为贝类产品可食部分麻痹性贝类毒素最高浓度;f为加工因子;bw为人群平均体重（kg）。本文中各月贝类毒素残留量数据取各品种中的最高值，天津成年居民平均体重及每日贝类产品平均摄入量数据来源于《中国居民营养与健康状况调查报告-营养与健康状况数据集（2002）》，具体评估数据见表4、表5。

根据评估对象的膳食暴露量EXPa计算急性膳食暴露风险指数%ARfD，用来对急性膳食暴露评估进行评价。

式中ARfD为急性参考剂量[6]，指每人每天摄入13种麻痹性贝类毒素后不会产生任何健康损害的安全剂量。参考欧洲食品安全局（EFSA）的规定[7]，麻痹性貝类毒素中STX的ARfD为0.5。

当%ARfD≤1时，说明人群急性膳食暴露水平处在安全状态，不会对健康造成风险。当%ARfD>1时说明人群急性膳食暴露水平处在不安全状态，需采取相应措施。

3  膳食暴露评估结果

按照上述膳食暴露评估方法与数据，通过计算得出9种检出的贝类产品中13种麻痹性贝类毒素的急性膳食暴露量EXPa和急性暴露风险指数%ARfD，加工因子f为1，结果如表6、表7所示。

由表7数据可见，各贝类产品13种麻痹性贝类毒素的急性暴露风险指数%ARfD范围为0～0.313，均小于1。若将%ARfD=1时麻痹性贝类毒素摄入量设为暴露风险耐受值，则不同年龄段天津成年居民13种麻痹性贝类毒素暴露量占最高耐受值22.4%～31.3%，当单日贝类产品摄入量至少达到平均日摄入量的3.19～4.46倍时，可能会导致个体产生膳食暴露风险。

点评估法进行膳食暴露评估使用了各月贝类产品中13种麻痹性贝类毒素最大残留浓度作为评估数据，并没有考虑到个体差异，消费习惯，时空差异导致贝类毒素浓度变化等因素。因此在个别极端条件下，如特定时间内大量摄入有毒贝类，仍有可能导致急性暴露风险指数%ARfD>1。因为采用所有采集品种中最高残留量进行评估，因此评估可能被高估，评估出的暴露风险高于实际暴露风险，评估结果较为保守，但可以涵盖并保护绝大多数人群。因此为了降低风险，应减少极端条件的产生，在贝类毒素水平较高的时间控制贝类产品食用，避免一次性超量食用有毒贝类产生高膳食暴露风险。

4  总结

所采集的156个贝类产品中13种麻痹性贝类毒素的急性暴露风险指数%ARfD范围为0～0.313，均小于1，为安全状态。说明天津市售9种贝类产品中13种麻痹性贝类毒素对一般成年人群食用造成的的急性膳食暴露风险均在安全范围中，居民仅通过食用贝类产品导致麻痹性贝类毒素对人体造成风险的可能性不大。从年龄变化来看，60岁以下年龄段，男性的暴露风险略高于女性，60岁以上年龄段女性的暴露风险略高于男性。从品种风险来看，紫贻贝、扇贝、毛蚶三个品种的膳食暴露风险相对较高，其余品种暴露风险较低。通过从季节变化来看，夏季、秋季的暴露风险高于春季和冬季，其中7月的暴露风险值最高，最高风险指数为0.313。在特定极端条件下，大量食用有毒贝类可能会导致风险指数提高产生暴露风险危害健康，因此建议消费者在高风险季节食用高风险品种贝类时注意控制摄入量，切勿一次性超量食用贝类增大膳食暴露风险。同时建议有關部门在高风险季节加强麻痹性贝类毒素监测与预警，更好的保障贝类产品的质量安全和消费者的健康。

参考文献

[1]Faber S. Saxitoxin and the induction of paralytic shellfish poisoning[J].Journal of Young Investigators，2012，23（1）：1-7.

[2]李芳，李雪梅，李献刚，等. 贝类毒素检测方法研究概况[J]. 食品研究与开发，2015，36（23）：184-186.

[3]吴海燕，郭萌萌，邴晓菲，等. 液相色谱-四极杆/线性离子阱复合质谱测定双壳贝类中麻痹性贝类毒素[J]. 海洋与湖沼，2017（3）：508-515.

[4]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局. GB 5009.213-2016贝类中麻痹性贝类毒素的测定[S]. 北京：中国标准出版社，2016.

[5]王向未，仇厚援，张志恒，等. 食品中膳食暴露评估模型研究进展[J]. 浙江农业学报，2012， 24（004）：733-738.

[6]刘志伟. 一个新的毒理学阈值-急性参考剂量[J]. 卫生研究，2003（01）.

[7]EFSA.  Marine biotoxins in shellfish–Saxitoxin group Scientific Opinion of  the Panel on Contaminants in the Food chain[J]. The EFSA Journal，2009（1019）：1-76.