Peguero-Lo Presti 指数联合微小RNA-1对高血压合并左心室肥厚的诊断价值

宋洁，尹德录，李群星，伏开全，虞宗颖

1徐州医科大学附属连云港医院，江苏连云港222002；2连云港市赣榆区人民医院；3镇江市第四人民医院

左心室肥厚(LVH)是一种心肌细胞的生理和病理性反应，是众多心血管事件的高危因素[1]。心电图(ECG)已成为当今临床筛选和诊断LVH的首选辅助检查措施[2]。Peguero-Lo Presti 指数是一种新型LVH的ECG诊断标准,具有较高的灵敏度，但特异度低[3]。因此，临床因ECG检查高度怀疑为LVH的患者，应建议其进一步检查进行确诊。微小RNA-1(miRNA-1)是心肌的特异性miRNA，对高血压患者LVH有较高的特异性诊断价值[4]。2016年4月—2019年4月,我们选择150例3级高血压患者，以超声心动图(UCG)作为LVH的诊断金标准，探讨Peguero-Lo Presti指数联合miRNA-1对高血压合并LVH的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年4月—2019年4月江苏大学附属第四人民医院心内科住院治疗的3级高血压患者150例，其中男74例、女76例，年龄(61.30±11.55)岁，高血压病程(11.74±5.66)年。纳入标准：①年龄≥18周岁；②临床诊断为3级高血压，高血压诊断标准参照2010年中国高血压防治指南[5]，即未服用相关降压药下，多日多次测得静息状态下收缩压≥180 mmHg和(或)舒张压≥110 mmHg；③LVH超声诊断标准：左室质量指数(LVMI)男性≥115 g/m2，女性≥95 g/m2；④签署知情同意书。排除标准：①未成年人、妊娠及哺乳期妇女；②先天性肥厚型心肌病和先天性心脏病；③存在冠心病、急性冠脉综合征、心包积液、风湿性心脏病和肺源性心脏病等心脏疾病者；④存在心房颤动、房室传导阻滞和起搏器植入患者。本研究已获得医院伦理委员会批准。患者均接受UCG检查。根据UCG检查结果，分为单纯高血压组(73例)和高血压合并LVH组(77例)。单纯高血压组男30例、女43例，年龄(60.62±10.99)岁；高血压病程(11.34±5.58)年。高血压合并LVH组男44例、女33例，年龄(61.95±12.08)岁；高血压病程(12.12±5.74)年。两组性别、年龄和高血压病程差异均无统计学意义(P均>0.05)。

1.2 ECG检查及Peguero-Lo Presti指数计算 检查前患者安静休息约30 min，采用北京麦迪克斯十二导联同步心电分析系统(型号MECG-200)对患者进行12导联同步ECG检查。检查时患者取平卧位，平静呼吸，按照顺序连接肢体及胸前导联，常规设置走纸速度为25 mm/s，并设置电压为10 mm/mV，描记心电图；去除导联。测量所有导联最深的S波振幅(SD)和V4导联的S波振幅(SV4)值，根据公式SD+SV4计算Peguero-Lo Presti指数，如果最深的S波振幅在V4，则双倍。LVH的电压诊断标准为男性≥2.8 mV，女性≥2.3 mV。心电图的测量及计算均由两位高年资心电图医师独立完成。

1.3 血浆中miRNA-1表达检测 采用RT-PCR法检测患者血浆中miRNA-1表达。采集患者肘静脉血4～6 mL，应用TRIzol试剂盒提取总RNA，并进行溶解，随后采用Bio-Rad法检测所抽取的RNA浓度。采用逆转录试剂盒进行RNA逆转录反应，将所得的逆转录产物cDNA于-20 ℃下保存备用。按照miRNA-1的逆转录引物序列5′-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGA

CATACAC-3′设计miRNA-1的RT-PCR引物；同时根据序列：5′-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3′设计内参U6逆转录引物。采用聚合酶链反应试剂盒进行PCR扩增反应：在冰上依次加入1 μL的cDNA、miRNA和U6引物各1 μL、10 μL的TaqMan GEx MASTER Mix试剂，随后加入双蒸水补至20 μL。在95 ℃反应10 min，92 ℃反应15 s，随后60 ℃反应1 min，共进行60个循环的扩增。将所得的产物在荧光定量PCR仪上进行分析，测量Ct值，以U6为内参，计算miRNA-1的表达量。

2 结果

2.1 Peguero-Lo Presti指数对高血压合并LVH的诊断价值 74例男性高血压患者中，UCG阳性44例，其中Peguero-Lo Presti指数阳性34例，灵敏度为77.27%；UCG阴性30例，其中Peguero-Lo Presti指数阴性17例，特异度为56.67%。76例女性高血压患者中，UCG阳性33例，其中Peguero-Lo Presti指数阳性24例，灵敏度为72.73%；UCG阴性43例，其中Peguero-Lo Presti指数阴性19例，特异度为44.19%。

2.2 两组血浆miRNA-1表达比较 74例男性患者中，高血压合并LVH组患者血浆miRNA-1表达量高于单纯高血压组[(1.33±0.28)比(1.01±0.11),P均<0.05]，且血浆miRNA-1表达量诊断LVH的灵敏度为68.18%，特异度为86.67%。76例女性患者中，高血压合并LVH组患者血浆miRNA-1表达量高于单纯高血压组[(1.26±0.25)比(0.95±0.19),P均<0.05]，且血浆miRNA-1表达量诊断LVH的灵敏度为60.61%，特异度为90.70%。

2.3 Peguero-Lo Presti指数联合血浆miRNA-1对高血压合并LVH的诊断价值 Peguero-Lo Presti指数诊断高血压患者LVH的AUC男性为0.650，95%CI为0.52～0.78，P=0.030；女性AUC为0.674，95%CI为0.55～0.80，P=0.009。血浆miRNA-1表达量诊断LVH的AUC男性为0.867，95%CI为0.79～0.95，P<0.01；女性为0.849，95%CI为0.76～0.94，P<0.01。Peguero-Lo Presti指数联合血浆miRNA-1诊断高血压合并LVH的AUC男性为0.880，95%CI为0.81～0.95，P<0.01，灵敏度73.64%，特异度93.33%；女性为0.862，95%CI为0.78～0.94，P<0.01，灵敏度75.76%，特异度97.67%。

3 讨论

LVH是高血压患者常见的靶器官损害之一，是高血压患者的独立危险因素[1]。早诊断、早治疗能有效延缓心脏重塑，改善患者预后。ECG具有方便、快捷、经济和易操作等优点，已成为当今临床筛选和诊断LVH的首选辅助检查措施[6]。研究显示，LVH患者的心肌细胞增粗、增长，左心室面积增大，心肌细胞除极时产生的电偶数增多、电动力增大；同时，肥厚的左室与胸壁间的距离缩短。因此，投射在左心室导联上的QRS振幅增大[7]。

多年来，经过众多心脏病和心电图学家的共同努力，目前有关LVH的ECG诊断标准已超过30种。临床常用的Sokolow-Lyon指数和Cornell指数，二者的诊断特异度均可达到90%左右，但灵敏度普遍较低，对于轻度LVH的诊断灵敏度为7%～35%，中重度LVH的诊断灵敏度仅为10%～15%[8～10]。Peguero-Lo Presti 指数由美国学者Peguero教授通过一项回顾性研究在2017所提出的新型LVH心电图诊断标准，其诊断公式为SD+SV4，SD是心电图所有导联中最深的S 波振幅。该标准认为，进行12导联心电图检查时，当患者Peguero-Lo Presti 指数≥2.8 mV(男性)或2.3 mv(女性)时，可考虑LVH诊断[11]。我国学者研究发现，Peguero-Lo Presti 指数能提高ECG诊断LVH的灵敏度，但降低了特异度[3,12,13]。国外学者亦发现，Peguero-Lo Presti 指数对LVH的诊断价值优于Sokolow-Lyon指数和Cornell指数[14]。

本研究对150例高血压患者进行ECG检查，结果亦提示Peguero-Lo Presti指数诊断高血压合并LVH的灵敏度高(男性77.27%，女性66.67%)，但特异度低(男性63.33%，女性44.19%)。分析其原因主要是LVH患者的电压变化主要反映QRS后期的S波；而Peguero-Lo Presti指数采用最深的S 波振幅和胸前4导联的S波幅之和，能早期识别S波的变化，故其灵敏度较高。但由于患者年龄、性别、肥胖、心脏内血流量及传导性、心脏的位置等因数的影响，Peguero-Lo Presti指数诊断高血压合并LVH的特异度较低，易增加误诊率。

近年来，随着基因技术的发展，miRNA因其多样性及特异的生理功能，众多学者推测miRNA可作为诊断LVH新型生物标志物[15]。miRNA-1是一种特异性表达与心肌细胞的微小RNA，是由21～25个核苷酸序列组成的内源性非编码RNA分子，能通过调控miRNA基因表达，广泛参与心脏相关病理生理过程[16]。前期研究发现，检测血浆miRNA-1表达可作为早期诊断急性心肌梗死的生物学标志物。司煜安等研究发现，miRNA-1 表达与高血压LVH的发生发展密切相关，是特异性诊断高血压LVH的潜在标志物[4]，miRNA预测高血压LVH的AUC为0.937(95%CI：0.88～0.96)。本研究发现，高血压合并LVH患者的血浆miRNA-1高于单纯高血压患者，且miRNA-1诊断高血压合并LVH的AUC为：男性0.867(95%CI:0.79～0.95)，女性0.849(95%CI:0.76～0.94)；且特异度高，但敏感度偏低。分析其原因，主要考虑血浆中的miRNA-1含量较低，且miRNA-1表达易受蛋白质等杂质影响，稳定性差；导致机体中的miRNA 难以被准确测量。另一方面考虑二者均为小样本单中心研究，存在一定程度个体差异性。

多数学者认为miRNA-1对诊断LVH有一定价值，可与其他检查方法及生物标志物联合检测，有助于临床医师更准确诊断LVH。本研究首次证实，相较于单独检测，Peguero-Lo Presti指数联合miRNA-1能提高高血压合并LVH诊断的准确性(AUC男性为0.880，女性为0.862)、灵敏度(男性为73.64%，女性为75.76%)和特异度(男性为93.33%，女性为97.67%)。Peguero-Lo Presti指数联合miRNA-1对高血压合并LVH诊断有较高价值。