不同基质和营养液对金毛狗孢子萌发与幼苗生长的影响

郑 听 熊鹏飞 王 永 杨 帆 韩见宇 周 颖 董 燕

(贵州省植物园，贵州 贵阳 550000)

金毛狗Cibotiumbarometz(Linn. ) J. Sm.为蚌壳蕨科金毛狗属多年生大型树状蕨类植物，主要分布于四川、贵州、云南、广东、广西、福建、台湾等地，生于山麓沟边及林下阴处酸性土上[1]，在贵州，该种分布于赤水、金沙、兴义、贞丰、望谟、册亨、罗甸、独山、道真、绥阳、三都、荔波、榕江、从江、黎平、剑河等地；该种有较高的观赏价值[2-3]，在欧美地区广泛应用于庭院造景[4]，在中国，金毛狗主要用于药用，少数地区也有食用，有祛风湿、补肝肾、强腰膝等功效，主要用于治疗风湿痹痛、腰膝酸软、下肢无力等症[5]。金毛狗重要的用药价值和观赏价值导致其野生资源被过度采挖，资源遭到严重破坏[6]，野外种群数量急剧减少，已列入《濒危野生动植物种国际贸易公约(附录II)》[7]，并被列为国家Ⅱ级重点野生保护植物[8]。

为了保护金毛狗野生资源，促进可持续发展，人工种植成为解决资源枯竭的重要手段。目前已有很多关于蕨类植物孢子繁殖的报道，在金毛狗的孢子繁殖方面，有学者研究环境因子对金毛狗配子体性别分化的影响[9]、组织培养[10-11]、外源赤霉素对孢子萌发和配子体发育的影响[12]等，基质和营养液对孢子萌发和幼苗生长的研究尚未见报道。本试验主要对金毛狗孢子萌发和幼苗生长过程中的基质和营养液进行筛选，为金毛狗种苗繁育提供技术储备，为推广种植提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 基质

试验使用基质有田土(田泥)、锯木屑、泥炭、珍珠岩、兰花基质、培养土、烤烟基质等。

田土：采自贵州省施秉县双井镇龙塘村，去除土壤中的石头、植物残体等杂物，风干，碾细过1cm孔径的筛后备用；

兰花基质：江洋兰花培养料，由四川省崇州市江洋兰花营养土厂生产；

培养土：沃施园艺通用培养土，由上海沃施园艺股份有限公司生产；

烤烟基质：烤烟专用基质，由黔东南州新兴农业科技开发有限责任公司生产。

1.1.2 营养液

试验选择市场上流通的营养液产品7种并参照韩见宇[13]的方法选择传统营养液配方6种作为处理，详细情况见下表1。

表1 营养液来源及配方

1.2 试验方法

1.2.1 孢子的采集

金毛狗孢子于2018年7月采自广东省；参考余蓉培[9]等的方法，将带有孢子囊群的健康叶片剪下，除去没有生长孢子囊群的部分叶片，装入密封的硫酸纸袋中，置于阴凉通风处，待孢子全部开裂散落到纸袋里后，除去杂质放入4℃冰箱中备用。

1.2.2 孢子萌发试验

孢子萌发选择田土、锯木屑、泥炭、珍珠岩、兰花基质、培养土、烤烟基质等作为基质，将基质盛在耐高温高压的容器内再放入高压灭菌锅中灭菌，待基质冷却后装入培养杯内，浇透水，后将金毛狗的孢子均匀播在基质表面，盖上透明的塑料盖保湿，置于室内日光灯下培养；每个处理有5个重复，观察原叶体形成的时间、孢子体出现的时间，当原叶体和孢子体形成率达到10%时计数。

以珍珠岩为基质，将灭菌后的基质装入营养杯内，分别加入上述稀释100倍的7种商品营养液和6种传统营养液中，以清水作为对照(CK)，将孢子均匀播在基质表面，盖上透明的塑料盖保湿，置于室内日光灯下培养；观察原叶体形成和孢子体出现的时间，在原叶体和孢子体形成率达到10%时计数。

1.2.3 幼苗生长

选择田土、兰花基质、培养土、烤烟基质等作为基质，将孢子繁殖的金毛狗幼苗移栽到灭菌后的基质中，每个处理20株，置于温室内正常管理，培养一个月后记录长出的叶片数、叶长度、叶宽度，取平均值。

将孢子繁殖的金毛狗幼苗栽到装有灭菌珍珠岩的营养杯中，分别用上述营养液浇灌，每个处理20株，置于温室内正常管理，一个月后记录长出的叶片数、叶长度、叶宽度，取平均值。

1.3 数据分析

数据分析使用SPSS21.0，作图采用origin8.0。

2 结果与分析

2.1 不同基质和营养液对金毛狗孢子萌发的影响

通过试验，使用培养土时金毛狗原叶体形成时间最短，培养土、兰花基质、泥炭土三种基质原叶体出现时间差距不大，都在38-39d，使用烤烟基质和田土时原叶体出现时间为42和43d，使用珍珠岩时为48d，而使用锯木屑时最晚为56d。使用培养土作基质时金毛狗孢子体出现时间最短为89d，兰花基质培养时为95d，使用锯木屑和烤烟基质时出现时间差距较小，都在99d左右，使用田土时为101d左右，使用泥炭土时为112d左右，而使用珍珠岩时没有长出孢子体，见表2。

表2 不同基质对金毛狗孢子萌发的影响

不同营养液对金毛狗原叶体出现时间影响不大，都在34-36d之间，但均优于清水对照的处理；对孢子体出现时间影响也不显著，都在88-90d，清水处理的金毛狗未出现孢子体，见表3。

表3 不同营养液处理对金毛狗孢子萌发的影响

2.2 不同基质和营养液对金毛狗幼苗生长的影响

使用田土、兰花基质、培养土和烤烟基质种植金毛狗幼苗时，兰花基质新叶数最多，平均为5.6片，培养土种植与兰花基质种植新叶数没有显著差异，两者都显著高于田土和烤烟基质；田土种植时新叶数显著高于烤烟基质，烤烟基质种植时金毛狗幼苗新叶数最少平均为3.7片；兰花基质种植时金毛狗平均叶长最大，为8.2cm，田土、培养土和兰花基质种植叶长没有显著差异，烤烟基质种植时显著低于其他处理。使用兰花基质、培养土、田土种植时金毛狗幼苗平均叶宽差异不显著，而使用烤烟基质时则显著低于其他处理，见图1。

图1 不同基质对金毛狗幼苗生长的影响

图2 不同营养液对金毛狗幼苗生产的影响

使用花卉植物营养液(A1)、景美通用家庭园艺营养液(A2)、通用营养液(A3)以及云大中天植物营养液(A4)对金毛狗幼苗新叶数、平均叶长、叶宽等影响差异不显著，但均显著高于对照处理，见图2。

3 结论与讨论

孢子繁殖是蕨类植物繁殖的重要环节，通过对金毛狗的孢子播种在不同基质上的实验发现：原叶体在所选基质上都能形成，其中以沃施园艺通用培养土作为基质时原叶体形成时间最短，各基质间原叶体出现时间长短的先后顺序为：培养土<兰花基质=泥炭土<烤烟基质<田土<珍珠岩<锯木屑。孢子体出现时间最短的是沃施园艺通用培养土，各基质间原叶体出现时间长短的顺序为：培养土<兰花基质<锯木屑=烤烟基质<田土<泥炭土，珍珠岩作为基质时金毛狗未出现孢子体。试验发现金毛狗用沃施园艺通用培养土作为基质时有利于原叶体和孢子体的形成，萌发时间较短，说明该基质能够促进金毛狗配子体的生长，明显缩短原叶体的形成时间，加快金毛狗幼孢子体的生长。配子体含有原叶体形成所需的营养，所以在珍珠岩上原叶体能正常生长，而所含营养不足以支持孢子体的形成，所以用珍珠岩为基质时能观察到原叶体形成而观察不到孢子体形成。使用珍珠岩为基质加不同营养液培养金毛狗孢子时，各营养液之间金毛狗原叶体和孢子体出现时间差异较小，但都优于清水对照处理，且对照无孢子体产生。

使用兰花基质种植金毛狗幼苗时金毛狗幼苗新叶数最多、平均叶长和叶宽也都最大； 使用兰花基质和沃施园艺通用培养土种植时金毛狗的叶数、叶长和叶宽都没有显著差异，说明两种基质都比较适于金毛狗幼苗的种植，而使用田土和烤烟基质种植时金毛狗长势较差。以珍珠岩为基质种植金毛狗幼苗，喷施不同营养液时，各营养液间叶数、叶长和叶宽均没有显著性差异，长势较好，显著优于对照，说明花卉植物营养液(A1)、景美通用家庭园艺营养液(A2)、通用营养液(A3)以及云大中天植物营养液(A4)对金毛狗幼苗生长有较好的促进作用。提示今后在金毛狗孢子繁殖过程中，选择合适的基质和营养液能够促进孢子的萌发和幼苗的生长，缩短育苗的时间，生产优质种苗。