血清钙结合蛋白S100A12对肺炎支原体肺炎患儿严重程度的预测价值

周四芳，葛明盖，张琴，胡杨涛，雷大伟，蔡丽

肺炎支原体肺炎（MPP）是儿童常见的肺部感染性疾病之一。近年来，MPP 引起重症病例发生率逐渐增高［1］。重症MPP（SMPP）可遗留肺不张、支气管扩张、闭塞性支气管炎及闭塞性细支气管炎等，严重影响儿童的身体健康。SMPP常合并肺外感染，病情进展快速，如果能早期识别SMPP患儿，并给与相应治疗措施可明显改善患儿的临床症状和预后［2］。血清钙结合蛋白S100A12是噬中性粒细胞表达的一类小分子蛋白质，主要参与机体的炎症反应、免疫调节等［3-4］。目前有关S100A12 在预测MPP 严重程度的临床价值方面的研究少见报道。本研究通过探讨MPP 患儿S100A12 的临床意义，旨在为MPP 的严重程度评估提供有价值的生物学指标。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2018 年1 月—2019 年6 月南昌市第三医院儿科收治的100 例MPP 患儿，根据病情严重程度分为MPP组60例和SMPP组40例。MPP组男31例，女29例，年龄1～13岁，平均年龄（5.6±2.1）岁；SMPP组40例，男18例，女22例，年龄1～13 岁，平均年龄（6.1±2.3）岁；另选择同期于我院进行健康体检的儿童20例作为对照组，男10例，女10例，年龄1～13 岁，平均年龄（5.5±2.4）岁；3 组性别（χ2=0.433）、年龄（F=0.758）比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 诊断标准及排除标准 MPP 依据《诸福棠实用儿科学》第8 版的诊断标准［5］：患儿有体温升高、咳嗽、呼吸困难等呼吸道表现，血清学检查支原体IgM 抗体阳性（急性期滴度≥1∶160），β内酰胺类抗生素治疗无效，同时排除其他病原体感染。SMPP 诊断标准［6］：患者治疗期间病情加重或出现肺部以外症状。排除标准：（1）既往有支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病史。（2）合并神经系统感染、结缔组织病、恶性肿瘤者。（3）已接受激素治疗者。（4）临床资料不完整者。本研究所有入选患儿及家属对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.3 方法

1.3.1 血标本采集 MPP组和SMPP组患儿于入院后以及恢复期空腹时采外周血3 mL，对照组儿童于体检时采集外周血3 mL，所有血样本经3 000 r/min 离心15 min，留取血清保存于-80 ℃冰箱待测。

1.3.2 指标检测 采用全自动生化分析仪检测所有对象的白细胞计数（WBC）、中性粒细胞比例（N）、淋巴细胞比例（L）、C反应蛋白（CRP）水平。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清S100A12水平，试剂盒购自武汉博士德生物技术有限公司。依次在96 孔板中加入待测样本的标准品，37 ℃反应90 min 后加入生物素标记抗体，于37 ℃反应60 min；洗板后加入ABC 抗体，37 ℃反应30 min，TMB 终止反应后酶标仪测定各孔450 nm的光密度（OD）值，根据标准孔的OD值绘制标准曲线，计算各组的S100A12水平。

1.4 统计学方法 所有数据采用SPSS 19.0进行处理。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间均数比较采用单因素方差分析，组间多重比较采用Dunnett’T3检验；2 组间均数比较采用独立样本t检验，MPP 组和SMPP 组急性期和恢复期S100A12 水平比较采用配对t检验；计数资料以例表示，组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman 相关。受试者工作特征（ROC）曲线分析S100A12水平对重症MPP 的预测价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MPP组和SMPP组血常规指标比较 与MPP组相比，SMPP组WBC和CRP升高（P＜0.01），N和L比较差异无统计学意义，见表1。

Tab.1 Comparison of blood routine indexes between MPP group and SMPP group表1 MPP组和SMPP组间血常规指标比较 （±s）

Tab.1 Comparison of blood routine indexes between MPP group and SMPP group表1 MPP组和SMPP组间血常规指标比较 （±s）

＊＊P＜0.01

组别MPP组SMPP组t n N L 60 40 WBC（×109/L）8.38±1.88 11.06±3.32 5.134＊＊0.59±0.07 0.60±0.05 0.853 0.33±0.07 0.32±0.05 1.222 CRP（mg/L）22.53±10.05 33.85±16.19 9.841＊＊

2.2 3 组血清S100A12 水平比较 MPP 组和SMPP组急性期患儿血清S100A12 水平显著高于对照组（P＜0.05）；且SMPP 组较MPP 组明显升高（P＜0.05）；MPP 和SMPP 组恢复期与对照组比较，血清S100A12 水平差异均无统计学意义（P＞0.05），见图1。

Fig.1 Comparison of S100A12 levels in acute and convalescent stages between the three groups图1 急性期和恢复期3组S100A12水平比较

2.3 血清S100A12 水平与MPP 患儿严重程度的相关性分析 相关性分析结果显示，S100A12 与MPP患儿严重程度呈正相关（rs=0.824，P＜0.01）。

2.4 血清S100A12 和CRP 预测MPP 患儿严重程度的临床价值 选取MPP组急性期和SMPP组急性期患儿的S100A12和CRP 进行ROC 曲线分析，结果显示，S100A12和CRP预测SMPP的曲线下面积分别为0.916（95%CI：0.843～0.962）和0.708（95%CI：0.608～0.794）。S100A12 的预测价值明显优于CRP，见图2、表2。

Fig.2 ROC curves of serum S100A12 and CRP in predicting the severity of MPP in children图2 血清S100A12和CRP预测MPP患儿严重程度的ROC曲线

Tab.2 The predictive value of serum S100A12 and CRP for the severity of SMPP in children表2 血清S100A12和CRP对SMPP患儿严重程度的预测价值

3 讨论

MPP是常见的社区获得性肺炎之一，好发于5～15岁儿童，该病一旦控制不佳，极易进展为SMPP和难治性MPP，引发肺外其他脏器的合并感染，加重病情。目前主流观点认为MPP向SMPP的进展可能涉及2种机制：（1）肺炎支原体（MP）感染机体后大量复制，引起机体分泌白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-8 等多种细胞因子，进而造成肺内和肺外器官的损伤［7］。（2）部分肺外器官（心、脑、肾等）组织含有MP相关抗原，感染后引发自身免疫反应，进而造成这些器官受累［8］。因此，如何早期识别SMPP 患儿，以便及时采取治疗措施，对于MPP患儿的病情转归和延缓肺外并发症的进展具有重要意义。S100A12是S100蛋白家族成员，由1q21.3编码，主要由中性粒细胞分泌和表达，其与晚期糖基化终产物受体（RAGE）结合后通过多个细胞通路参与炎症细胞活化，进而激活先天性免疫应答［9-10］。已有多项研究显示，S100A12与多种肺部疾病有密切的关系。Hou等［11］发现细菌性肺炎患者血清S100A12 表达水平升高，且其表达水平与WBC、CRP 等炎性指标呈明显正相关，可以作为预测细菌性肺炎的炎症标志物。Berrocal-Almanza 等［12］发现肺结核病患者血清S100A12 水平较健康对照组明显升高，可作为肺结核发生的独立预测因子，在全程督导化学治疗（DOTS）后，S100A12在4 个月后显著下降，提示S100A12 有评估肺泡浸润程度的潜力。国内张鹏等［13］发现S100A12与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）的严重程度相关，且血清S100A12与超敏C反应蛋白（hs-CRP）、Epworth 嗜睡量表评分（ESS）、睡眠呼吸暂停低通气指数（AHI）呈正相关。本研究结果显示，与健康对照组相比，MPP组和SMPP组急性期S100A12水平明显升高，且随着疾病的进展，S100A12 呈进行性升高，两者呈正相关，与上述报道基本一致。

本研究同时发现，MPP 患者的CRP 水平也出现明显升高，是机体感染状态下的常见炎性指标之一。多项研究均报道了其对于MPP的诊断价值，但最佳诊断值范围变化较大（5～35 mg/L）［14-16］。本研究结果显示，CRP 诊断MPP 的临界值为27.00 mg/L，与上述结果有一定差异。推测其原因，一方面是检测技术不同造成的影响；另一方面，纳入对象的年龄差异也可能会影响结果。有研究报道在肺炎败血症患者血清S100A12高达780 μg/L［17］，而本研究结果显示，SMPP急性期患者普遍维持在800 μg/L左右，与上述结果基本一致；而在诊断价值方面，S100A12 预测SMPP的敏感度和特异度均优于CRP，提示S100A12可作为预测MPP严重程度的一个新指标。

综上所述，检测血清中S100A12 有助于判断MPP病情、预后及指导治疗，但S100A12在MPP发病中的具体机制尚未明确，且目前相关的循证医学证据较少，仍有待于进一步深入研究。