猪精液保存的一些方法

李和进，冯佩平

（1.安徽省休宁县兽医站，安徽 黄山 242700；2.齐鲁动物保健品有限公司，山东 济南 250100）

猪精液的保存对精液的质量维持至关重要，目前猪液态精液的保存还是主流，但在国际贸易中冻精是较受欢迎的，而近些年猪冻精发展迅速，其中的保存方法也有了一些新的尝试。

1 冻精的保存

猪精子对低温比较敏感，单次用量大，而常温保存也能满足用量需求，随着牛等冻精的发展，对优良品种的需求、跨国运输的成本以及生物安全的内在要求，使得猪冻精得到一定发展。目前，精液冷冻保存的方法有液氮保存、干冰保存。陈明明（2016）等介绍-80 ℃超低温冰箱中冷冻保存猪精，通过添加甘氨酸7.5 mg/mL，柠檬酸含量1.3%，甘油浓度3%为基础液进行冻存，在61 ℃解冻，存活率达到61%。在精液的解冻与冷冻过程中，都会使精子质膜受到损伤，因此，需要在解冻过程中快速越过-60 ℃的和-15 ℃的的两个临界温度区。如果解冻的温度达到69 ℃，解冻后的精子存活率会下降。

2 液态精液的保存

我国规模化猪场95%以上使用液态保存精液，少部分使用冷冻精液。在猪商品化生产中，精液液态保存的条件、保存后的使用效果是确保人工授精成功的关键技术，相对而言越新鲜的精液受胎率越高，保存2 d 的精液受胎率一般为60%～70%，到第5 d 时，分娩率降至50%（孙梦等，2019）。研究发现，精子内钙离子浓度升高，使精子获能，进而使其老化死亡，加入螯合剂后可降低精子内钙离子浓度，减少精子的死亡，乙二胺四乙酸（EDTA）与乙二醇双（2-氨基乙基醚）四乙酸（EGTA）都可使钙离子浓度降低，孙梦等认为EGTA 更有优势，添加3 mmol/L 则对精液保存有促进作用，进而可提高精子的受精率及胚胎发育能力。李琦等认为，在17 ℃恒温箱保存时，筛选正常大气压、-0.02 MPa、-0.04 MPa、-0.08 Mpa，研究发现，-0.04 MPa 条件可降低超氧阴离子自由基（O2-）、H2O2、羟自由基（OH-），对提高猪精子活率、减少精子的呼吸代谢和降低氧化有帮助，可延长保存时间。

高效稳定的稀释粉配方是该领域的研究方向，谢东淇等认为天然物质的添加对精液液态保存有帮助，如TPP，它主要由儿茶素、黄酮类、酚酸类和花色素类等物质组成，其中儿茶素类在抗氧化活性中起重要作用，试验发现在添加0.04 g/L 的TPP 时，保存5 d 的精子活率大多在60%以上。王双慧等（2019）认为，可利用诱导细胞休眠的方式来延长猪精液的保存时间，使用冬眠合剂（氯丙嗪和异丙嗪），在8 ℃低温稀释液中，添加冬眠合剂保存9 d 后，精子活率可以达到60%。胡传活等（2015）发现，黄芪多糖对猪精液低温保存有帮助，黄芪多糖具有抗衰老、抗氧化、抗病毒、抗细胞凋亡、抗应激等作用，效果最好的添加浓度为0.3 g/L，但对于黄芪多糖保护猪精子的机制目前并不清楚，但是该方法开拓了思路。

随着物流运输的便利性，个性化需求，尤其是近些年引种风险增加，出于生物安全的考虑，对冻精及精液液态运输带来新的契机，可操作性强，效果稳定的技术将是规模场、家庭农场、散养户的追求。

3 非洲猪瘟后的猪精发展

非洲猪瘟疫情发生以来，一些地方，经历了恐慌性抛售，导致清栏。国家为了满足市场猪肉的需求，陆续推出宽松政策鼓励养猪，减少养猪成本，目前种猪的需求量持续旺盛，连续3 个月环比增长，一猪难求，种猪更难求，猪精市场更是持续火爆，从非洲猪瘟暴发前的数十元到目前的数百元。猪精液以安全性高，方便性强成为市场新宠，大多以新鲜精液为主，目前市场比较大的公司有广西扬翔，通过各地经销商输送到养殖场，也有一些本省的龙头企业发展猪精优势明显。目前主要是解决母猪安全繁殖的问题，市场上三元母猪的繁殖性能低，仔猪成活率低，更需要优质猪精。

下一步将是针对不同的品种开发具有针对性的猪精品种或基因改良，来引领市场的发展。公猪站的发展将会越来越成熟，与母猪的距离越来越短，安全、优质、方便将是各型养殖场的追求。