2017—2019年从江县山羊布鲁氏菌病血清学调查
2020-12-17杨通莲潘文章梁美英汪忠荣
杨通莲, 潘文章, 杨 鲁, 梁美英, 汪忠荣
(1. 贵州省从江县动物疫病预防控制中心,贵州 从江 557400; 2. 黔东南苗族侗族自治州动物疫病预防控制中心,贵州 凯里 556000)
布鲁氏菌病是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人畜共患传染病,我国农业农村部列为二类动物疫病,国家卫生健康委员会列为乙类传染病[1]。从江县是贵州省南大门,隶属黔东南苗族侗族自治州,与广西三江、融水、环江接壤,从江香猪是当地特色优质畜品种资源。近年来,因肉羊市场看好,政府加大对羊养殖行业的扶持力度,羊的饲养量日益增多,但盲目引种和无序流动也日渐频繁,周边县区相继监测发现羊布鲁氏菌病感染。2017—2019年动物疫控中心对全县所有羊群开展布鲁氏菌病监测,以便及时掌握疫情动态,防止和控制该病的发生和传播,保护人畜健康。现将监测情况报道如下。
1 材料与方法
1.1 样品2017—2019年对全县18个乡镇221个养殖户每户按羊存栏数的30%抽样采集血液,共2 769份血样,分离血清,冰箱 -20 ℃保存待检。
1.2 试剂布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验抗原(青岛易邦生物工程有限公司,批号:20170040601、201700406013),标准阴性、阳性血清(青岛易邦生物工程有限公司,批号:2071204、2071203),均由黔东南州动物疫病预防控制中心提供。
1.3 方法[2]
1.3.1 虎红平板凝集试验(1)将检测血清、标准血清(阴性、阳性)和抗原从冰箱取出平衡至室温。
(2)涡旋混匀血清和抗原,分别吸取血清和抗原25 μL 加于玻璃板4 cm2方格内的两侧。(3)用灭菌牙签快速混匀血清和抗原,涂成2 cm直径的圆形,混匀后4 min在自然光下观察。同时设标准阴性、阳性血清对照。结果为阳性者再用试管凝集试验进行复核校验。
1.3.2 试管凝集试验(1)每份血清用4个连续的U型孔,在反应板的第1孔加稀释液184 μL,第2~4孔各加入稀释液100 μL,用微量移液器取样品 16 μL 加入第1孔,混匀。从第1孔吸取混合液100 μL加入第2孔充分混匀,如此倍比稀释至第4孔,从第4孔弃去混合液100 μL。(2)按说明书取生理盐水1 mL稀释抗原,充分混匀。(3)取稀释抗原100 μL加入上述各孔稀释血清中,震荡混匀,用塑料薄膜封板,放置于37 ℃ 孵育18~24 h,取出观察并记录结果。
1.4 结果判定
1.4.1 虎红平板凝集试验(1)在标准阴性血清不出现凝集,标准阳性血清出现凝集时试验成立,方可对检测血清进行判定。(2)出现肉眼可见凝集现象者判定为阳性(+),无凝集现象且反应混合液呈均匀粉红色者判定为阴性(-)。
1.4.2 试管凝集试验(1)当阳性血清出现完全凝集(++++),而阴性血清无凝集(-),抗原对照无自凝(-)现象时试验成立。(2)检测血清出现“++”及以上的凝集现象判定为阳性;出现“+”凝集现象判定为可疑;出现“-”判定为阴性。(3)试验可疑羊经30 d采血重检,如果仍为可疑则判定为阳性。
2 结果
经检测,2017年218份血清样品和2019年1 454份血清样品均为阴性。2018年1 097份血清样品有7份为阳性,阳性率0.64%(7/1 097),见表1。
3 讨论
3.12018年以前从江县养殖业一直以从江香猪为主导产业,农户主要以养猪为主,牛羊饲养量较少,且大多为自繁自养,因此在2018年以前未检测出布鲁氏菌病阳性羊。自2018年以来,政府大力支持产业扶贫,牛羊饲养量大幅度增加,不少老百姓把养羊作为致富门路,但对《中华人民共和国动物防疫法》等相关法律法规缺乏了解,没有遵照《种畜禽调运检疫技术规范》,未经申报批准就盲目私自从外县或外省购买羊群,未进行相关疫病特别是布鲁氏菌病的检疫。2018年检测发现7例布鲁氏菌病抗体阳性羊来自2个养殖户,据调查了解畜主均未经畜牧兽医行政主管部门许可,私自从外地引进羊。在监测中还发现农户引种渠道混乱,从多个地方引种混群现象非常普遍,造成病源追溯困难。因此,今后要加强对家畜布鲁氏菌病防控知识的宣传,增强疫病风险防范意识,加强对动物引种的管理和流通环节的检疫,指导农户从非疫区引种。
3.2检出阳性羊的2个养殖户分别来自2个乡镇,说明一些乡镇或村级兽医防疫员对家畜布鲁氏菌病防控认识不足,个别人员没有如实汇报种用羊群来源和养殖信息,或对当地养殖信息掌握不准确等,疫病防治工作存在应付和被动现象。因此,应定期对基层兽医防疫员进行业务培训,提高防疫水平。
3.32018年检测发现阳性羊后,从江县政府将布鲁氏菌病防控工作纳入日常工作范围,对羊布鲁氏菌的防控措施层层落实,从上到下进行专人抓管,严格引种制度,定期检疫,对全县所有羊群全面普查,发现阳性羊全群扑杀,并无害化处理,严禁病畜流入市场,对环境进行全面消毒,2019年监测均为阴性,保证了全县养殖业的健康发展。