桉油精气相色谱分析方法研究

2020-12-16黄朝万夏丽娟杨细蓉夏洪兵

四川农业科技 2020年10期

黄蕙，黄朝万，夏丽娟，杨细蓉，夏洪兵

(1.成都彩虹电器(集团)股份有限公司，四川成都 610045；2.四川省农药检定所，四川成都 610041)

1 前言

白纹伊蚊AedesalbopictusSkuse是我国一种重要的医学媒介昆虫，是登革热和基孔肯雅病的主要传播媒介，感染实验表明还能传播乙脑病毒等多种虫媒病毒病[1]。使用驱避剂是个人户外防蚊的主要措施之一。目前市场上的驱避剂主流成分皆为化学农药,主要成分有避蚊胺(DEET)，驱蚊酯，羟哌酯等成分，产品形式多为驱蚊液或驱蚊花露水。近年来也有关于DEET被报道对人体有副作用、对环境有害[2]。法国Corbel等[3]最新研究成果表明，DEET对昆虫和哺乳动物中枢神经系统酶的活性有抑制作用，且DEET与氨基甲酸盐类杀虫剂混用时，毒性增强。驱蚊酯和羟哌酯虽然还未见负面报道，但是随着国家农药绿色发展的趋势，从植物中寻找驱蚊活性物质受到了人们的重视。我国植物种类丰富，为寻找植物源蚊虫驱避剂提供了丰富资源。

桉树(Eucalyptusrobusta Smith)又称尤加利树，是桃金娘科、桉属植物的统称，它是全球拥有最多品种的树种之一，有945个种和变种[4]。桉树的树根、花及叶都可供药用且具有独特的药理活性。从药学角度来说，桉树叶性平，味微辛且苦，可以用于治疗流感、流脑以及各种炎症，同时还可用于伤口杀菌、治疗皮肤瘙痒、廯、红肿等疾病[5-10]。桉油精广泛存在于蓝桉、油樟、迷迭香鼠尾草等植物挥发油中，是经一定工艺提取的桉树活性物质。桉油精通过与光化学产生的羟基自由基(SRC)反应，在空气中气相电晕可降解。在空气中这种反应的半衰期估计为1.4d，其在25℃的反应速率常数为1.11×10-11 cu cm/molecule-sec。这说明桉油精是一个在空气中易降解的化学物质，对环境的影响很小。桉油精又称桉树脑、桉叶素、桉树精、桉叶油，其化学名称为1,3,3-三甲基-2-氧双环[2,2,2]辛烷。桉油精是一种重要的精细化工产品，桉油精主要用于医药、日用品工业、食品添加剂等方面。1,8-桉叶素被用作食品，糖果，咳嗽滴剂，个人护理产品和药物中的香料和调味剂。它也被用作烟草中的风味剂。它存在于许多消费品中，例如漱口水，皮革用蜡，地板，空气清新剂和松油基清洁剂。桉油精具有清凉香气，对人无毒，作为食品舔加剂使用时最多见于口香糖的配方。

经过研究，桉油精因其自然挥发的气味能让蚊虫感到不适，从而逃离，因此能起到驱蚊的效果,可以应用于植物精油驱蚊产品上。本文即是对植物精油驱蚊产品里所含的桉油精进行气相色谱检测，建立检测方法进行分离和定量分析。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液

丙酮(分析纯)由成都市科隆化学品有限公司提供；桉油精标准品(已知质量分数≥99.0%)由上海阿拉丁生化科技股份有限公司提供；氯苯 (内标，分析纯)由武汉富鑫远科技有限公司提供。

2.2 仪器

7890B气相色谱仪：具有FID检测器(Aglient)；色谱柱：30m×0.32mm×0.25μm INNOWAX毛细管色谱柱(Aglient)；微量注射器：10ul(Aglient)。

2.3 气相色谱操作条件

柱温：柱温50℃保持5min，然后以10℃/min升温至250℃，进样器250℃，检测器 260℃；

气体流量：载气(氮气)：1.0mL/min；氢气：30mL/min；空气：300mL/min；

进样量：1.0ul。

桉油精标样和样品中桉油精的气相色谱图见图1和图2。

2.4 测定步骤

2.4.1 内标溶液配制准确称取内标氯苯0.1g至50mL容量瓶中，用丙酮稀释后定容，待用。

2.4.2 标准品溶液的配制准确称取标准品桉油精约0.09g(精确至0.0002g)于25mL容量瓶中，用丙酮溶解并定容，作为桉油精标准溶液，待用；移取5mL上述配制好的内标溶液、桉油精标准溶液25mL容量瓶中，以丙酮溶解并定容，作为标样溶液，备用。

2.4.3 试样溶液的配制在一个洁净的磨口三角瓶中，使用镊子夹取一片样品，准确称取样品质量(精确至0.0002g)，再准确移取上述内标溶液5mL，加入丙酮约20mL，盖住橡胶塞浸泡1h后，摇匀，作为样品溶液。取上层清液进行色谱分析。

2.4.4 测定在上述色谱条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针桉油精与内标物氯苯的峰面积比的相对变化小于1.5%后，按标样溶液、样品溶液、样品溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.4.5 计算将测得的两针样品溶液及样品前后两针标准溶液中桉油精与内标物氯苯峰面积之比，分别进行平均。产品中桉油精质量分数x(%)按式(1)进行计算：

式中：

X-产品中桉油精质量分数，%

R1—标准品与内标物氯苯峰面积的比值;

R2—样品与内标物氯苯峰面积的比值；

m1—标准溶液中桉油精标准品的质量，mg；

m2—驱蚊贴样品的质量，mg；

P—标准品中桉油精的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 分析方法的线性相关性试验

称取不同量桉油精标准品于25mL容量瓶中，准确加入氯苯内标溶液5mL配制成桉油精与内标质量比(Mr/Mi)分别为5个不同浓度的标准溶液，按上述操作条件分别测定，以桉油精与内标物氯苯质量比为横坐标，以桉油精与内标物氯苯峰面积比为纵坐标，得工作曲线。。

桉油精线性关系数据见表1，线性关系图见图3桉油精标样的添加浓度(x)与平均峰面积比(y)之间满足线性关系y=1.192x-0.029，线性相关系数R2=0.998。

3.2 分析方法的精密度试验

对同一试验样品中的桉油精质量分数进行5次平行测定，并对其进行标准偏差及变异系数的统计运算。同时运用修改的Horwits公式作为精密度是否合格的判定依据，结果见表1。

由表2可知，本分析方法的变异系数为0.17%，远小于Horwits公式计算值，精密度合格，能对桉油精进行精确地分析。

表1 桉油精方法精密度实验数据

3.3 分析方法的准确度试验

取经分析已知桉油精准确含量的样品，加入桉油精标准品溶液9.7mg/5mL于25mL容量瓶中，准确加入内标溶液5.0mL，用丙酮定容，按上述方法测定桉油精的回收率，其结果如表2。桉油精的添加回收率在98.97%～100.31%之间，平均回收率99.69%，RSD为0.49%，因此本方法可以满足对产品中桉油精的分离测定。