五子衍宗丸对比格公犬繁殖的影响
2020-12-07姜川
姜川
摘要:本文主要探究五子衍宗丸对比格公犬繁殖的影响。采用随机法将比格犬分为对照组和五子衍宗丸组,对照组喂食全价饲料,五子衍宗丸组饲喂五子衍宗丸拌料全价饲料30天。观察爬跨性行为,睾丸、附睾系数以及精子品质测定。结果显示,五子衍宗丸可明显提高比格公犬的爬跨性行为次数,增加单次射精精子量、精子密度,提高精子活力和精子活率,精子畸形率明显下降,显著提高精液品质。睾丸、附睾系数初步表明五子衍宗丸未对生殖系统造成毒理影响。五子衍宗丸可增强比格公犬的繁殖能力。
关键词:五子衍宗丸;比格公犬;繁殖
比格犬又称“米格鲁”,属狩猎犬,是世界名犬之一,具有体型小发育快、性情温顺、嗅觉敏锐、运动能力佳等特点,受到养狗人士的推崇,曾被列为台湾受欢迎的十大犬种之一。此外,比格犬也是近年来发现的较为理想的实验动物模型,具有实验可重复性、一致性、可比性等优点,已普遍应用于新药临床前毒理实验,基础医学研究、放射病治疗及实验外科等研究领域。
由于比格犬的炙手可热,其大量繁育成为制约其发展的重要因素。比格犬单次发情,且乏情期长达6~12个月;虽然外源激素可以诱导乏情期母犬发情,但发情的同步控制、超数排卵困难,确切的排卵和受精时间难以掌握。五子衍宗丸是中医补肾益精的经典名方,由枸杞子、菟丝子、五味子、覆盆子、车前子等中药组成,其在改善和提高精子密度、治疗不孕不育方面具有较好的疗效,本实验主要探究了五子衍宗丸组方对公犬生殖能力的影响。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品
细胞计数仪[BioTech (IC1000)],兽用血细胞分析仪(MEK-6450K)。五子衍宗丸(由枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子组成)由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产。
1.2 实验动物
比格犬(Beagle犬)由北京希诺谷生物科技有限公司提供,选取16只性欲旺盛的2~3岁的比格公犬,平均体质量12.36公斤。
1.3 实验动物分组及处理
比格公犬常规饲养5天后,随机数表法将其分为对照组8只和五子衍宗丸组8只。对照组每天喂食全价饲料,自由采食;五子衍宗丸组用蒸馏水将成药配制为混悬液,在全价饲料中拌料,根据人和犬的药物等效剂量系数换算,五子衍宗丸组比格公犬饲喂药30粒/只,每天2次,连续饲喂30天。母犬4只,诱导公犬爬跨。
1.4 观察指标及检测方法
1.4.1 爬跨性行为 统计有爬跨性行为的比格公犬只数。
1.4.2 睾丸、附睾系数 比格公犬处死后,取出双侧睾丸和附睾称重。并计算睾丸重量/体质量为睾丸系数,附睾重量/体质量为附睾系数。
1.4.3 精子品质测定 给药30天后采用按摩法采精,记录采精量。取20微升精子悬液滴于载玻片上,倒置显微镜下镜检100个精子(5个视野),计数精子总数,向前快速运动、向前慢速运动、非向前运动和不运动精子数,计算精子密度、活力、活率和畸形率。
2 结果
2.1 比格公犬爬跨情况
两组有爬跨性行为的比格公犬数量比较见表1。五子衍宗丸组有爬跨性行为的比格公犬数量为6.20±1.69,显著高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。
2.2 睾丸、附睾系数
两组比格公犬的睾丸、附睾系数比较见表2。结果显示,五子衍宗丸组的睾丸、附睾系数与对照组相比,无明显差异(P>0.05)。
2.3 精子品质测定
两组比格公犬的精子品质检测情况见表3。结果显示,五子衍宗丸组的采精量、精子密度、精子活力、精子活率与对照组相比都有显著增高,精子畸形率明显下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
3.1 比格犬繁殖体系现状
现阶段,我国宠物犬繁殖业仍处于较为初级的阶段,犬繁殖作为宠物犬行业的上游产业,其对于整个宠物犬产业链具有十分重要的意义。比格犬作为最受欢迎的十大宠物犬犬种之一,其繁殖将直接影响我国宠物犬行业的发展。然而目前,比格犬繁殖行业人员鱼龙混杂,饲养管理水平参差不齐,舍本逐利、不遵守科学繁殖、胡亂杂交的现象较为普遍。由于盲目迎合市场要求,常发生配种频繁、营养不科学、引入他系犬等情况,造成后代脱离原有品种及种公犬繁殖能力严重下降。另外,养殖户普遍文化水平普遍偏低,学习能力较差,没有科学的配种时间及方法,且比格犬的生活条件有限,其繁殖能力不能得到保障。
3.2 中药组方五子衍宗丸
中药五子衍宗丸最早源于唐代,《悬解录》《新唐书·艺文志》等书中均有记载,被誉为古今第一种子方。方由枸杞子、菟丝子、五味子、覆盆子、车前子5种中药组成,具有添精补髓、疏利肾气、种嗣衍宗之功,主治肾虚精亏所致的肾气不足、阳痿早衰、遗精早泄、尿后余沥等症。现代医学研究表明,五子衍宗丸在生殖系统、神经系统、肿瘤化疗、抗衰老、提高免疫力、记忆力等方面均发挥重要作用。在生殖系统方面作用尤为明显,可抑制睾丸细胞通路介导的细胞调亡过程,以及线粒体膜电位水平,从而提高睾丸细胞活率,增强精子活力,达到促进生殖功能的作用。目前,五子衍宗丸多用在人和大小鼠上,偶有兔子,还未见在犬类上使用。韩亮等对五子衍宗丸治疗肾精亏型男性不育进行临床观察,发现五子衍宗丸可提高精液量、精子密度、精子活动率,总有效率达81.7%,且对提高T、LH水平也有一定的作用;李培培等对五子衍宗丸影响夏季公兔生殖能力进行研究,通过切片可明显发现曲精小管排列紧密,管腔规则,附睾中精子面积增大,表明五子衍宗丸可以改善夏季公兔生殖能力低下的情况。
3.3 犬精液品质检查
母犬受胎率直接取决于公犬精液质量,即公犬精液质量的提高直接影响犬繁殖产业的发展。精液受孕能力可通过客观评价精子功能、观察形态学指标进行评估。比格犬单次发情,且乏情期长达6~12个月,故精液品质的提高可有效提高受胎率,降低繁殖成本。精液品质检查主要包含对犬精液量、精子密度、精子活力和精子形态学这几个方面的检测。本实验表明,五子衍宗丸能明显提高比格公犬的爬跨性行为次数,增加单次射精精子量、精子密度,提高精子活力和精子活率,精子畸形率明显下降,显著提高精液品质。此外,睾丸、附睾系数一直是动物毒理实验中常用的药物安全评价指标,睾丸、附睾系数增大表示发生充血、水肿或增生肥大等,表明药物对生殖系统存在一定的毒理作用。本实验初步验证五子衍宗丸未对睾丸、附睾系数造成一定影响,其药物安全性仍需其他药理毒理实验进一步验证。