牛羊布鲁氏杆菌病的综合诊断与防治

张莉，吴妍妍，李益涛，王标，齐亚银*

（1.省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室 新疆石河子 832000；2.石河子大学动物科技学院 新疆石河子 832000；3.新疆天山军垦牧业有限责任公司 新疆石河子 832000）

布鲁氏杆菌病是一种人畜共患病，布鲁氏杆菌为革兰氏阴性菌，对外界环境抵抗力很强，可以在水、土壤及动物组织中存活几个月，布鲁氏杆菌有很强的侵袭能力，可以通过直接接触而经皮肤和黏膜侵入机体，造成感染[1]。当前，布鲁氏杆菌在牛羊中感染在部分地区已经十分普遍，可以通过临床症状进行初步诊断，确诊需要通过实验室检测方法。

1 临床表现

牛羊感染布鲁氏杆菌后通常呈现慢性发病经过，病畜及带菌动物是主要传染源，牛羊感染后一般潜伏期为2 周到6 个月，患病母畜出现流产和胎衣停滞，伴有乳腺炎、子宫炎和阴道炎。患病公畜出现生殖系统疾病，如睾丸发炎，阴囊肿大。剖检死亡病畜可见母畜的胎衣呈黄色胶冻样浸润，胎衣表面覆盖纤维蛋白絮片及脓液，胎衣增厚并有出血点，淋巴结、脾脏和肝脏有肿大和坏死，公畜的精囊有出血点，睾丸和附睾有炎症坏死灶。

2 实验室检测方法

布鲁氏杆菌最常用的实验室检测方法包括虎红平板凝集试验和细菌学检查方法。可以采集患病牛羊的血液，通过虎红平板凝集试验确诊是否有布鲁氏杆菌抗原，细菌学检查方法是取发病羊的组织病料，通过涂片染色镜检并分离培养，看是否符合布鲁氏杆菌特征。此外，PCR 方法也可以用于布鲁氏杆菌的检测。杜琳等[2]建立了布鲁氏杆菌多重PCR 检测方法，可以用于生鲜乳中布鲁氏杆菌的检测，该方法根据布鲁氏杆菌保守抗原Omp31、Omp25 序列设计特异性检测引物，预期扩增片段大小分别为472bp、140bp，该检测方法的灵敏度可达1× 105CFU/mL，可以用于生鲜乳中布鲁氏杆菌的快速检测。李秀梅等[3]通过环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测布鲁氏杆菌，根据布鲁氏杆菌OMP25 基因设计4 条特异性引物和1 条异硫氰酸荧光素（FITC）标记的探针，生物素标记LAMP 扩增产物能够特异性地与FITC 标记的探针杂交，优化后的扩增温度为63℃，时间为50min，LAMP-LFD 方法可特异性地检出布鲁氏杆菌，最低检测下限为5.4× 102CFU/mL，结果判定较直观，适合于基层实验室、应急检测或现场布鲁氏杆菌监测。

3 防控措施

牛羊布鲁氏杆菌病需要采取综合防控措施，首先，应该加强对牛羊布鲁氏杆菌病的监测，可以通过采血进行布鲁氏杆菌病检测，发现阳性带菌的动物要及时淘汰，在采样过程中注意人员防护并防止交叉感染。加强对牛羊引种时的监测，不引进带有布鲁氏杆菌病的牛羊，最好是坚持自繁自养[4]。加强布鲁氏杆菌病的宣传教育，让基层养殖人员了解布鲁氏杆菌病的危害，提高饲养人员防病意识。定期对养殖环境进行消毒，地面要彻底消毒，及时清理牛羊粪便，空气要经常通风换气，保持空气清新。预防牛羊布鲁氏杆菌病要选择合适的疫苗进行免疫接种，选择疫苗免疫的合适时机并注意疫苗的有效保护期。对发病死亡的病畜要深埋并经过无害化处理，防止布鲁氏杆菌病蔓延构成牛羊饲养的潜在威胁。牛羊布鲁氏杆菌病感染后治愈率较低，而且治疗困难，一旦感染后会终生携带病菌，给养殖场带来很大威胁，有条件的饲养场可以采取布鲁氏杆菌病的净化措施，净化区域环境是控制布鲁氏杆菌病的有效措施，发现布鲁氏杆菌病阳性患畜要及时扑杀，减少疫病传播的风险。在实施净化过程中可以根据养殖场的实际情况采用合适的净化方案[5]。在牛羊等养殖场禁止养犬，犬可能是布鲁氏杆菌的携带者，会造成布鲁氏杆菌的扩散传播。同时做好灭蚊灭蜱工作，消灭一切传播媒介。在牛羊的饲养过程中一定要加强人员防护，由于布鲁氏杆菌病的传染性很强，饲养人员进入生产区必须穿工作服，戴口罩和手套，在采血取样和注射疫苗时防止皮肤扎伤，工作后要及时洗手消毒。

4 结语

布鲁氏杆菌病的防控形势十分严峻，每年患病动物数量都呈上升趋势，布鲁氏杆菌病的流行监测与防控需要长期坚持下去不能松懈，只有积极开展牛羊布鲁氏杆菌病的诊断与防治，才能为布鲁氏杆菌病的净化奠定基础，保障养牛业、养羊业的健康发展。