本草健净对调节猪非特异性免疫防控病毒性疫病效果的案例探讨

2020-11-20董延江陈稼韩庆军韩业东吴倩佟玉红

饲料博览 2020年10期

董延江，陈稼，韩庆军，韩业东，吴倩，佟玉红

（1.辽宁省农业发展服务中心，沈阳110003；2.四川本草兴农生物科技有限公司，成都611430）

现代兽医学研究表明，伪狂犬病、蓝耳病、口蹄疫、流行性腹泻、圆环病毒等病毒在猪群中广泛存在，“有猪的地方就有猪瘟”，表明猪瘟在中国猪群广泛存在，因而就有了大量的混合感染，就有了猪病防控领域内“亚健康”“亚临床”的新名词，猪群“健康状况处于脆弱平衡”的平衡理论[1]。显而易见，越来越多的疫病在威胁着猪群健康，越来越多的混合感染使得疫病对养猪业的危害程度日趋严重。病毒无细胞结构，只有核酸这一特殊物质，对抗生素不敏感，变异速度快，只有通过抗病毒类药物控制。但自2005年起，抗病毒西药，如金刚烷胺、金刚乙胺、利巴韦林、阿昔洛韦、吗啉胍等医用抗病毒药物禁止用于食用动物。目前疫苗的接种和中药防治对此类传染病却有着较好的防控和治疗作用[2-3]。中药之所以能保护易感动物，是因为它可以调节猪群的非特异性免疫力。这种免疫力相对于使用疫苗等途径产生的特异性免疫力而言，其作用更具有广泛性，而且对提高猪群疾病感染阈值也有积极意义[4]。

按照传统中医药理论，可认为非洲猪瘟病毒是中医病因中的“疠气”，疠气为害颇似火热之邪致病，具有一派热盛之象，其毒热较火热为甚，而且常夹有湿毒等秽浊之气，防控“治未病”宜采取清热解毒、补中益气、芳香化湿等法来实现[5]。2019年年底爆发的新型冠状肺炎是以免疫系统功能紊乱及炎性反应引起的深部气道和肺泡损伤为特征性病理表现，属于中医肺络病变范畴[6]，是疫疠之气，为疠气感染所致暴发疫病，中医早期即可参与治疗，特别是中药可通过多靶点调节机体免疫系统，避免系统性炎症即“细胞因子风暴”的发生，在改善新冠的重症发生率，降低病死率等方面已凸显出极大的价值[7]。现有临床研究也证实连花清瘟可明显改善患者发热、咳嗽、咳痰、气促等症状，可用于治疗COVID-19[6]，经典方剂组合的清肺排毒汤对新冠肺炎患者的临床症状改善明显[8]。

因此，传统中医药在防治瘟疫中积累了大量临床经验及有效组方，兽医临床上通过使用中药对易感动物的保护也逐渐得到行业和猪场的重视。本试验受试药物为纯中药制剂，由传统名方增减而来，具有“扶正祛邪，解毒逐瘟”的功效，具有强大免疫促进功能，对流行疫症的预防具有很好的作用。现将使用本草健净的典型案例报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验药物

本草健净为纯中药制剂，主要由人参叶、白术、黄芪、地骨皮、升麻、茜草、甘草等几味中药组成。中药组方研究为南京农业大学中药材研究所，四川本草兴农生物科技有限公司生产提供。

1.2 试验试剂与设备

1.2.1 试验试剂

猪干扰素γ（IFN-γ）ELISA试剂盒，购于江苏科晶生物科技有限公司；

白介素-6（IL-6）ELISA试剂盒，购于江苏科晶生物科技有限公司；

猪肿瘤肿坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒，购于江苏科晶生物科技有限公司；

猪超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒，购于江苏科晶生物科技有限公司。

1.2.2 试验仪器

离心机（赛默飞世尔科技中国有限公司，型号：Sorvall ST 16R）；电热恒温培养箱（成都特斯特仪器有限公司，型号：TSTP4008）；多功能酶标仪（赛默飞世尔科技公司，型号：Thermo Varioskan Flash）；采血针、采血管等耗材均购于万科化学试剂公司。

1.3 试验动物与给药方式

1.3.1 案例一

辽宁省境内某猪场，规模10 000头以上。某日外抓45头约50 kg后备母猪，进场约20 d部分发烧，死亡6头，对死亡猪进行剖检发现：脾脏肿大，内脏器官出血。

将猪场所有发病动物平均分为两组，1组为治疗组，纯中药制剂本草健净35 g·d-1·头-1拌料给药，连续给药3周，另1组为对照组，不进行任何治疗，正产采食饮水。给药期间各组试验动物在饲料中添加维生素C，并加强圈舍消毒。

1.3.2 案例二

辽宁省境内某猪场，规模10 000头以上。其中3栏600头75 kg商品猪，发病初期，2号栏中15头猪出现发烧、采食量下降、部分病猪出现死亡；随后1、3号栏中部分猪只出现发烧、采食量下降等症状。

对本场3栏600头猪全部使用本品进行治疗，治疗方式为10 kg·t-1拌料给药，连续给药15 d，同时加强消毒。

1.4 饲养管理

按照猪场日常管理进行，所有仔猪自由采食和饮水。试验期间保持猪舍通风、清洁，圈舍内温度控制稳定，每日做圈舍清扫，试验期间消毒和免疫按照常规进行。

1.5 指标测定

1.5.1 临床症状

试验期间，每周观察受试药物对受试动物尿液、皮毛、精神、泪斑和痂皮的影响，并记录死亡数量。

1.5.2 非特异性免疫指标测定

试验结束后，治疗组及对照组各选择6头猪进行颈静脉血采集，分离血清，检测受试动物血清SOD酶、干扰素-γ含量，抗炎因子TNF-α、IL-6等非特异性免疫细胞因子。

通过血清SOD酶检测试剂盒说明书检测各组试验猪血清中SOD酶；猪干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）酶联免疫吸附定量测定试剂盒各试剂在室温环境下（25℃）复苏。然后取出酶标板，按照说明书操作步骤在波长450 nm的酶标仪上测量各孔的OD值。根据标准品浓度和相应的OD值作出标准曲线，然后按照对应的所测得的样品OD值，在标准曲线上查找样品相对应的所含IFN-γ、IL-6、TNF-α的浓度值。

1.6 数据处理与统计分析

采用SPSS16.0单因子方差分析对试验结果进行显著性检验。

2 结果与分析

2.1 临床症状

2.1.1 案例一

给药1周后，本草健净组试验猪尿液清澈度明显改善；连续给药2周，治疗组皮毛和精神状态明显提升；再给药1周后观察发现，治疗组泪斑和痂皮逐渐消失；对照组临床症状无明显改善。

连续给药14 d，只有2头猪发生死亡，再给药7 d，发现剩余猪只均恢复正常，猪场情况稳定，存活率达到82%。

2.1.2 案例二

通过连续给药治疗15 d，本草健净组试验猪尿液清澈度明显改善，皮毛和精神状态明显提升，泪斑和痂皮逐渐消失。仅用药前出现症状的死亡淘汰猪50头外，其余猪只无典型症状，均饲养至约200 kg顺利出栏，成活率达到91.6%。

2.2 非特异性免疫指标测定结果

各试验血清SOD酶检测结果见表1、表2，由表可见通过本草健净治疗后，给药组的SDO酶、IFN-γ含量明显高于对照组，具有显著差异（P＜0.05）。给药组的IL-6、TNF-α含量明显低于对照组，具有显著差异（P＜0.05）。

表1案例一非特异性免疫检测结果

表2案例二非特异性免疫检测结果

3 讨论

猪病毒性传染病一直以来都是全球猪群疫病防控的重点和难点，给养殖业带来了巨大经济损失。病毒的种属及血清型复杂，且易突变，有的病毒还会导致免疫抑制，这给疫苗研发及应用带来困难。而抗病毒西药种类很少，且毒副作用较大，易发生耐药性，临床疗效十分有限[9]。中草药有清热解毒、养胃健脾、除湿化痰、补气养血、活血化瘀、固本培元、扶正祛邪、平衡阴阳等多种功效，能根据病因病机进行针对性治疗，综合运用可发挥全面的调整和治疗作用[10]。中药治病是从整体出发，通过调整正邪关系，使机体各项功能恢复到平衡状态。中药在病毒性疫病的防治上具有疗效好、毒副作用低、抗病毒范围广等优点，部分中药在治病的同时还能提高畜禽免疫力，促进生长。

本草健净为纯中药制剂，主要由人参叶、白术、黄芪、地骨皮、升麻、茜草、甘草等几味中药组成。其中人参叶能够补气，益肺，祛暑，生津；升麻：味辛甘性凉，清热解毒，发表透疹，升阳举陷；地骨皮、茜草味甘苦性寒，具有凉血止血等功效；甘草：味甘性平，补气解毒，能够调和诸药，通十二经。中医认为，“正气存内，邪不可干”，体内阴阳失衡，才容易为时疫所伤。本方以君臣佐使的合理调配，重点通过提升正气，透发邪气，凉血解毒、净化血液，从而改善猪对传染病的抵抗力及显著提高感染后的排毒自愈能力，具有“扶正祛邪、解毒逐瘟”的功效，对于集约化养殖生产中，周边出现疫情或感染初期，使用效果尤其明显。方中黄芪、白术主要功效为提高机体非特异性免疫功能，其中黄芪、白术的主要成分黄芪多糖和白术多糖具有明显提高免疫功能的效果，有利于促进机体中巨噬细胞和某些中性粒细胞的吞噬和杀菌功能的提高[11-12]。

猪血清中SOD酶含量表示猪抗氧化能力，而动物抗氧化能力的提高，对动物保持机体的健康具有非常重要的意义[13]，纯中药制剂本草健净可以提高患病猪血清SOD酶含量，增加机体非特异性免疫作用[14]，从而达到抵抗病毒的作用。机体适度的免疫应答对于抵御病毒入侵是有利的，但有些病毒性疾病引起的免疫应答过于强烈，导致猪群产生Ⅲ型超敏反应，引起广泛的血管炎性反应，因此需要调节猪群对病毒的免疫应答水平，避免免疫应答过度（免疫亢奋）和免疫应答不足（免疫抑制和免疫麻痹）。机体的适应性免疫应答主要通过IFNγ（Ⅱ型干扰素）来调控，因此评价中药对非特异性免疫力第二道免疫防线是否增强主要通过对IFN-γ含量的变化进行评价[10]。重要的白细胞介素（如IL-1、IL-6）、TNF-α在病毒入侵之后含量会增加，其会导致内皮细胞受损[15]，引起凝血，同时导致血小板减少和骨髓造血机能障碍。IL-6释放增多会导致心肌损伤，影响心脏的供血和供氧，因此猪群会出现全身多处发紫、呼吸困难、母猪流产（也是供氧不足导致的结果）、休克、猝死等情况。