高血压合并心绞痛患者颈动脉内膜中膜厚度与脂蛋白相关磷脂酶A2、炎性因子、T淋巴细胞及血管内皮功能的关系研究

张国瑞，张静，王立君，江平，杜超，张军惠

高血压是临床较为常见的一种心血管疾病，也是多种心血管疾病的危险因素和重要诱因，对重要脏器的功能和结构具有重要影响，亦是动脉粥样硬化形成的重要危险因素［1］。心绞痛是在患者冠状动脉严重狭窄的基础上，因心肌负荷增加引发其心肌出现暂时的、急剧的缺氧与缺血的一种临床综合征。当高血压、心绞痛同时发生时，会对心脏产生更为严重的损伤，患者预后较差［2］。研究显示，颈动脉内膜增厚与冠状动脉硬化存在一定相关性［3］。机体炎症状态在动脉粥样硬化的发生、发展等过程中起重要作用。高血压患者多存在一定的氧化应激增强，同时伴随辅助性T淋巴细胞（Th）1/Th2的功能紊乱。脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）是一种由炎性细胞产生的磷脂酶，具有较强的促炎作用，可作为冠心病发生的预测指标［4］。血管内皮是血管血流与平滑肌之间的一种天然屏障，具有调节平滑肌细胞增殖、维持抗凝及凝血系统平衡、调节局部和全身血管功能以及维持血管收缩/舒张功能等多种作用［5］。高血压对患者血管、心脏损伤相对较大，合并心绞痛者心血管损伤更为严重，而颈动脉内膜中膜厚度（CIMT）、Lp-PLA2、炎性因子、血管内皮功能均可以用于心血管靶器官损伤的评价，但其之间的关联性目前不是很明确［6］。故本文探讨高血压合并心绞痛患者CIMT与Lp-PLA2、炎性因子、T淋巴细胞及血管内皮功能的关系，以期为其临床诊治提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择石家庄市第三医院2017年5月—2019年5月收治的高血压合并心绞痛患者60例为病例组，另选取同期于本院体检健康者60例为对照组。病例组中男34例，女26例；年龄28～72岁，平均年龄（46.4±5.3）岁；平均体质指数（BMI）（23.3±1.1）kg/m2。对照组中男36例，女24例；年龄30～74岁，平均年龄（47.3±5.6）岁；平均BMI（23.4±1.2）kg/m2。两组性别、年龄、BMI比较，差异无 统 计 学 意 义（χ2=0.137，P=0.711；t年龄=0.904，P=0.184；tBMI=0.476，P=0.318）。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：（1）符合2010年修订的《中国高血压防治指南（2009年基层版）》［7］中的高血压相关诊断标准；（2）符合《我国慢性稳定型心绞痛诊断与治疗指南》中的心绞痛相关诊断标准［8］；（3）接受β-受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂等常规降压药物治疗者；（4）患者及其家属同意进行本研究并签署知情协议书。排除标准：（1）合并严重的心律失常、心脏瓣膜病、继发性高血压、心力衰竭以及肝肾功能障碍者；（2）合并免疫系统疾病、肿瘤以及急/慢性感染性疾病者；（3）有严重酒精依赖以及吸烟史者；（4）发病前曾服用影响Lp-PLA2活性的药物者；（5）妊娠期或哺乳期者；（6）合并恶性贫血、甲状腺功能不全者。

1.3 研究方法

1.3.1 CIMT测定 采用彩色多普勒超声诊断仪（型号：ACUSON S2000 ABVS，西门子），由专人进行CIMT测定：所有受试者检查前至少休息15 min，诊室安静且温度恒定；受试者取仰卧位，头转向对侧，头颈部尽量仰伸；将探头置于受试者的胸锁乳突肌后缘或者前缘，由双锁骨上窝颈动脉起始，并逐渐沿着血管向上部移动，对其腹部或颈动脉分叉部、与颈动脉分叉部1 cm以内的颈总动脉主干段之间两点的内膜中膜厚度（IMT）进行测定，左右两侧共有4个点，取平均值。当CIMT＞0.9 mm时为颈动脉内膜增厚，CIMT≤0.9 mm时为颈动脉内膜正常。

1.3.2 血清制备 于对照组体检当日、病例组入院后第2天清晨8：00分别抽取受试者空腹静脉血5 ml，通过离心机（ID-Centrifuge 12 S II）在3 000 r/min条件下离心10 min（离心半径10 cm），分离得到血清，并置于-75 ℃条件下保存备用。

1.3.3 Lp-PLA2测定 采用酶联免疫吸附试验检测受试者血清Lp-PLA2，试剂盒购于上海江莱生物科技有限公司。具体操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3.4 炎性因子测定 采用酶联免疫吸附试验检测受试者血清单核细胞趋化蛋白1（MCP-1），试剂盒购于上海劲马生物科技有限公司；采用免疫比浊法检测C反应蛋白（CRP），试剂盒购于上海酶联生物科技有限公司；采用放射免疫法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6），试剂盒购于上海康朗生物科技有限公司。严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3.5 T淋巴细胞测定 采用流式细胞仪（FACSLyric™Flow Cytometer，美国BD公司）检测受试者血清Th17、Th1、Th2。

1.3.6 血管内皮功能指标测定 采用分光光度计间接比色法检测受试者血清一氧化氮（NO），采用放射免疫吸附测定法检测受试者血清内皮素1（ET-1）。试剂盒均购于上海晶抗生物工程有限公司，操作方法严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.00统计学软件进行数据整理、分析。计量资料以（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验；计数资料以相对数表示，组间比较采用χ2检验；两变量间的相关性分析采用Pearson相关分析；高血压合并心绞痛患者CIMT影响因素分析采用多元线性回归分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CIMT、Lp-PLA2比较 病例组CIMT大于对照组，Lp-PLA2高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表1）。

表1 两组CIMT、Lp-PLA2比较（±s）Table 1 Comparison of CIMT and Lp-PLA2 between the two groups

表1 两组CIMT、Lp-PLA2比较（±s）Table 1 Comparison of CIMT and Lp-PLA2 between the two groups

注：CIMT=颈动脉内膜中膜厚度，Lp-PLA2=脂蛋白相关磷脂酶A2

组别 例数 CIMT（mm） Lp-PLA2（μg/L）对照组 60 142.4±14.5 0.6±0.1病例组 120 213.0±24.7 1.5±0.2 t值 20.471 30.066 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.2 两组炎性因子比较 病例组MCP-1、CRP、TNF-α、IL-6高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表2）。

2.3 两组T淋巴细胞比较 病例组Th17、Th1高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组Th2比较，差异无统计学意义（P＞0.05，见表3）。

表2 两组炎性因子比较（±s）Table 2 Comparison of inflammatory factors between the two groups

表2 两组炎性因子比较（±s）Table 2 Comparison of inflammatory factors between the two groups

注：MCP-1=单核细胞趋化蛋白1，CRP=C反应蛋白，TNF-α=肿瘤坏死因子α，IL-6=白介素6

组别 例数 MCP-1（ng/L）CRP（mg/L）TNF-α（μg/L）IL-6（μg/L）对照组 60 2 514.3±325.4 2.1±0.6 1.2±0.6 118.0±39.7病例组 120 2 987.5±415.1 4.8±1.0 3.3±0.8 192.4±46.5 t值 7.720 18.981 19.655 10.594 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

表3 两组T淋巴细胞比较（±s）Table 3 Comparison of T lymphocytes between the two groups

表3 两组T淋巴细胞比较（±s）Table 3 Comparison of T lymphocytes between the two groups

注：Th=辅助性T淋巴细胞

组别 例数 Th17 Th1 Th2对照组 60 0.91±0.12 10.3±2.1 1.8±0.4病例组 120 1.85±0.36 19.8±3.2 2.0±0.6 t值 19.663 21.044 1.576 P 值 ＜0.001 ＜0.001 0.058

2.4 两组血管内皮功能指标比较 病例组NO低于对照组，ET-1高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05，见表4）。

表4 两组血管内皮功能指标比较（±s）Table 4 Comparison of vascular endothelial function indexes between the two groups

表4 两组血管内皮功能指标比较（±s）Table 4 Comparison of vascular endothelial function indexes between the two groups

注：NO=一氧化氮，ET-1=内皮素1

组别 例数 NO（nmol/L） ET-1（ng/L）对照组 60 90.62±7.67 45.62±4.39病例组 120 62.38±5.21 66.87±5.98 t值 29.109 24.418 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.5 高血压合并心绞痛患者CIMT与Lp-PLA2、炎性因子、T淋巴细胞及血管内皮功能指标的相关性分析 Pearson相关分析结果显示，高血压合并心绞痛患者CIMT与Lp-PLA2、MCP-1、CRP、TNF-α、IL-6、Th17、Th1、ET-1呈正相关，与NO呈负相关（P＜0.05）；高血压合并心绞痛患者CIMT与Th2无直线相关关系（P＞0.05，见表5）。

表5 高血压合并心绞痛患者CIMT与Lp-PLA2、炎性因子、T淋巴细胞及血管内皮功能指标的相关性Table 5 Correlation of CIMT and Lp-PLA2，inflammatory factors，T lymphocytes and vascular endothelial function indexes in patients with hypertension complicated with angina pectoris

2.6 高血压合并心绞痛患者CIMT影响因素的多元线性回归分析 以高血压合并心绞痛患者CIMT为因变量，Lp-PLA2、MCP-1、CRP、TNF-α、IL-6、Th17、Th1、Th2、NO、ET-1为自变量（均为连续变量），进行多元线性回归分析，结果显示，Lp-PLA2、CRP、TNF-α、IL-6、ET-1是高血压合并心绞痛患者CIMT的影响因素（P＜0.05，见表6）。

3 讨论

高血压是心血管事件发生的重要危险因素，其主要损伤的靶器官是心脏和大动脉，进而造成患者出现心绞痛等并发症［9］。而高血压合并心绞痛患者更加容易出现动脉粥样硬化、动脉壁损伤等，并伴有不同程度的炎性反应［10］。其中CRP是重要的炎性因子，可以有效反映患者动脉粥样硬化情况，较为精准地反映炎性反应和细胞活化的程度［11］。正常情况下，机体血清CRP水平相对较低，而患者在创伤、类风湿关节炎以及炎症急性期等状态下，会产生更多的TNF-α、IL-6，进而改变血管通透性，致使细胞中的CRP通过细胞膜进入血液中［12］。本研究结果显示，高血压合并心绞痛患者CIMT与炎性因子（MCP-1、CRP、TNF-α、IL-6）呈正相关，这主要是由于高血压合并心绞痛患者存在一定程度的动脉粥样硬化，这是一个慢性炎性反应过程。血管炎性反应会损伤其血管内皮功能，致使患者血管内皮沉积大量的脂质，引起其产生早期病变和颈动脉内膜增厚［13］。而颈动脉内膜增厚会诱导血管出现斑块，同时体内的CRP、TNF-α、IL-6等炎性因子又会进一步诱导动脉粥样硬化的发生和发展［14］。MCP-1对单核细胞向巨噬细胞转化具有一定的诱导作用，可将脂质逐渐转变为泡沫细胞［15］。而研究显示，动脉粥样硬化的病理基础是泡沫细胞的形成［16］，故由高血压引发的心绞痛患者其动脉粥样硬化相对较为严重。

表6 高血压合并心绞痛患者CIMT影响因素的多元线性回归分析Table 6 Multiple linear regression analysis of influencing factors on CIMT in patients with hypertension complicated with angina pectoris

早期研究显示，高血压患者在出现肾功能损伤时会伴有T淋巴细胞浸润［17］。随着研究的不断深入，AOYAMA等［18］发现，高血压合并心绞痛患者也伴有T淋巴细胞浸润，外周血中存在淋巴细胞功能性失调。Th17、Th1是一种促炎因子，本研究结果显示，高血压合并心绞痛患者CIMT与Th17、Th1呈正相关，这是由于颈动脉内膜增厚提示患者出现了一定程度的动脉粥样硬化，可表现为血管内皮功能损伤、炎性反应加剧，从而增加Th17、Th1等促炎因子的产生［19］。因此，抑制高血压合并心绞痛患者的血管炎症，可减轻炎性反应对机体冠状动脉的损伤。NO和ET-1是临床评价血管内皮功能的重要指标，其中ET-1升高可进一步刺激血管收缩［20］；NO主要由血管内皮细胞释放和合成，主要起到促进血管舒张的作用，当患者血管内皮受到损伤时，会减少NO的释放［21］。高血压患者血压升高会在一定程度上增加动脉壁压力负荷，增厚管壁，降低动脉顺应性，增加血管阻力。祝艳秋等［22］研究显示，与非颈动脉内膜增厚的高血压患者相比，颈动脉内膜增厚的高血压患者血管内皮功能和颈动脉损伤较为严重。Lp-PLA2是一种新型炎性标志物，本研究结果显示，其与高血压合并心绞痛患者CIMT呈正相关。这可能是由于Lp-PLA2可通过产生IL、血小板源生长因子等介质，促进炎性因子的生成［23］。另外，Lp-PLA2可通过氧化作用生成氧化游离脂肪酸以及溶血性卵磷脂等产物，引起动脉粥样斑块形成，促进颈动脉内膜增厚［24］。再者，由于高血压合并心绞痛患者内皮功能结构会出现一定程度的损伤，从而刺激提升Lp-PLA2的氧化压力，造成血管破裂和受损，久而久之，会增加血管内皮细胞膜的厚度和稳定性，进而导致颈动脉内膜增厚［25］。

本研究尚存在一定局限性，如本研究虽然采用了多元线性回归分析高血压合并心绞痛患者CIMT的影响因素，但仍可能存在某些因素难以控制，且每例患者的生化指标检测结果可受年龄、日常活动以及相关药物的影响，另外，所有检验样本送到同一实验室进行检测，无法做到专人操作，受上述诸多因素的影响，可能会对本研究结论造成一定的影响，后期仍需大样本量以及更加严谨的试验进行深入研究。

综上所述，Lp-PLA2、炎性因子（CRP、TNF-α、IL-6）、血管内皮功能（ET-1）是高血压合并心绞痛患者CIMT的影响因素，但尚未发现T淋巴细胞是高血压合并心绞痛患者CIMT的影响因素，这可为高血压合并心绞痛患者的临床诊治提供参考，具有一定的临床应用价值。

作者贡献：张国瑞、张静进行文章的构思与设计，撰写论文，对文章整体负责、监督管理；张国瑞、张静、王立君进行研究的实施与可行性分析；张国瑞、张静、杜超、张军惠进行数据收集、结果的分析与解释、英文的修订；张国瑞、张静、张军惠进行数据整理；张国瑞、杜超进行统计学处理；张国瑞、张静、王立君、江平进行论文的修订；王立君、江平、杜超、张军惠负责文章的质量控制及审校。

本文无利益冲突。