茶薪菇多糖对运动性肌肉疲劳功能恢复的影响*

刘其龙

（百色学院体育学院，广西 百色 533000）

茶薪菇（Agrocybe aegerita）又名杨树菇或茶树菇，民间将之视为“神菇”，属于新型野生食用菌，产于江西、福建两省。其外观诱人，味道脆嫩、鲜美，内含多种营养成分，蛋白质含量达19.53%，18种氨基酸中赖氨酸含量1.75%及含多种矿物质[1]。茶薪菇不仅可作为美食，而且其药用价值也受到人们的广泛认可。

据相关研究显示[2]，茶薪菇可以增强记忆力、提高人体免疫力、降低体内胆固醇水平、延缓衰老、防癌抗癌，同时还具有祛湿、健脾、止泻以及利尿等功效[3]。随着研究的深入，发现茶薪菇多糖还可以缓解运动性肌肉疲劳[4]。为证实这一研究成果，选择连续脉冲式电流对中华大蟾蜍离体排肠肌进行直接刺激建立疲劳模型，以期探讨茶薪菇多糖在缓解运动性肌肉疲劳方面的作用。

1 材料准备及试验方法

1.1 茶薪菇子实体多糖提取

将自然风干后的茶薪菇子实体放入60℃烘箱内烘干，后用粉碎机粉碎成粉末状过筛，添加12倍粉末重量的蒸馏水与其充分混匀，90℃恒温水浴4 h；水浴后于于转速为 8 000 r·min-1～30 000 r·min-1的离心机中离心2 h，过滤下层残渣保存备用，上清液加热浓缩为原体积1/4，后在浓缩液中加入4倍体积无水乙醇，沉淀24 h后抽滤混合液，取固体沉淀物于培养皿内，置于-75℃低温冰箱中30 min，后于冷冻干燥机中冷冻干燥至粉末状后即为茶薪菇水溶性粗多糖[5]。

茶薪菇子实体多糖得率（W，%）计算公式为：

式中：W为多糖得率（%）；m为多糖含量（g）；M为茶薪菇子实体干重（g）。

多糖含量的测定根据文献[6]制作蒽酮标准曲线来进行。茶薪菇子实体多糖得率为7.13%，多糖含量为9.61%（以纯糖含量计算）。试验前需通过任氏液分别配制3种不同茶薪菇多糖溶液，浓度分别为0.01 mg·mL-1、0.05 mg·mL-1以及 0.10 mg·mL-1。

1.2 分组方法及试验仪器

试验随机分为3组，即0.10 mg·mL-1的高浓度组、0.05 mg·mL-1的中浓度组以及 0.01 mg·mL-1的低浓度组。每组预备重量为60 g～90 g的中华大蟾蜍10只，来自吉林永发蟾蜍养殖场，雌雄兼用，每只蟾蜍1个排肠肌标本为对照组，给予任氏液试剂；另1个排肠肌为试验组。

试验仪器为二道生理记录仪，成都仪器厂LMS-2B型；一型双道电子刺激器，安微蚌埠实用技术研究所；肌肉张力换能器，高碑店市新航机电设备有限公司；上皿电子天平，上海精科天平FA2004.Ma×200 g。

1.3 试验方法

1.3.1 标本准备

蟾蜍双毁髓后对排肠肌进行分离，后将坐骨神经去除，放置在任氏液内浸泡10 min以待备用。

1.3.2 试验过程

将蟾蜍1个排肠肌标本放置于25 mL任氏液肌槽中浸泡20 min～25 min，另一个排肠肌标本放置于25 mL茶薪菇多糖肌槽中浸泡同样时间；连接肌肉与坐骨神经端，通过细线将其固定于肌槽上，经由细线让肌肉另一端与肌肉张力换能器连接，对肌肉进行调节，让其保持恒定的张力，并以基线描记。通过银电极对肌肉表面进行轻触并给予频率为1 Hz、波宽为0.3 ms以及直流电20 V的连续方波刺激，同时于二道生理记录仪上对肌肉收缩曲线进行描记。当收缩幅度分别为最大收缩幅度的90%、50%、10%时做好相应的时间记录。

1.4 统计学处理

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据的处理，使用（均数±标准差）表示，采用t检验，差异显著水平为 P＜0.05。

2 结果

2.1 茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度的影响

茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度下降到最大收缩幅度10%时时间的影响如表1所示。

表1 茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度下降到最大收缩幅度10%时的时间影响Tab.1 Time effect of Agrocybe aegerita polysaccharide on the reduction of contraction amplitude to the maximum contraction amplitude of 10%

由表1可知，不管是低浓度组、中浓度组还是高浓度组的茶薪菇多糖均对离体蟾蜍排肠肌收缩幅度下降到最大收缩幅度10%的时间有一定的延长作用，其中高浓度组延长效果非常显著（P＜0.01），而另外2个浓度组延长效果较为显著（P＜0.05）。茶薪菇多糖对收缩幅度下降到最大收缩幅度50%时时间的影响见表2。

由表2可知，不管是高浓度组、中浓度组的茶薪菇多糖，均对离体蟾蜍排肠肌收缩幅度下降到最大收缩幅度50%的时间有一定的延长作用，两者相比差异显著（P＜0.01）。茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度下降到最大收缩幅度90%时的时间影响，见表3。

表2 茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度下降到最大收缩幅度50%时的时间的影响Tab.2 Effect of Agrocybe aegerita polysaccharide on the time when the contraction amplitude decreases to 50% of the maximum

表3 茶薪菇多糖对蟾蜍收缩幅度下降到最大收缩幅度90%时的时间影响Tab.3 Time effect of Agrocybe aegerita polysaccharide on the reduction of contraction range to 90% of the maximum

由表3可以看出，不管是低浓度组、中浓度组还是高浓度组的茶薪菇多糖，均对离体蟾蜍排肠肌收缩幅度下降到最大收缩幅度90%的时间有一定的延长作用，其中高浓度、中浓度组和对照组相比差异显著（P＜0.05）。

3 讨论与结论

由于部分试验过程不能进行人体试验，只能通过动物去研究生命的起源及遗传的奥秘，以攻克疾病的堡垒，探索其发生的原因以及衰老机理。因此，试验动物学的最终目的是借助对动物生命的研究，进而发现人类的奥秘，战胜疾病，延缓衰老，延长寿命。通过蟾蜍试验开展了茶薪菇多糖对运动性肌肉疲劳功能恢复的研究，希望将此研究结果应用于人体抗运动疲劳作用中。

机体在运动过程中肌糖原无氧酵解生成乳酸，如果乳酸量过多且蓄积在血液以及肌肉中，会使pH降低，进而削弱肌钙蛋白以及Ca2+之间的结合能力，降低肌动蛋白反应量，减弱肌肉收缩力[5]。与此同时，pH的降低还会抑制磷酸果糖激酶活性，进而阻止无氧供给能量途径，减少肌内收缩能量来源，进而引起疲劳。据相关研究显示，云芝多糖可以显著减少电刺激离体排肠肌疲劳模型中的肌乳酸量，并由此实现肌细胞内环境的改善，进而达到抗疲劳作用[6]。

自由基损伤是导致肌肉疲劳的关键性原因，机体运动会增强骨骼肌组织脂质过氧化反应，进而生成大量自由基。自由基可损伤生物膜，如线粒体或肌纤维膜等，破坏其完整性，进而导致系列细胞代谢紊乱，损伤大量细胞，使其出现病理变化，削弱肌肉正常功能，最终引起疲劳[7]。本研究中对蟾蜍离体排肠肌进行持续电刺激后，会使其剧烈收缩，诱发活性氧产生，进而造成肌肉疲劳；但抗氧化剂能极大的改善肌肉疲劳，目前已发现不少食用真菌多糖可作为抗氧化剂使用，且效果显著。试验结果显示，茶薪菇多糖在高浓度、中浓度及低浓度时，对电刺激环境下离体蟾蛛排肠肌标本出现的收缩疲劳均有显著的改善作用，这意味着其可能是通过抗氧化损伤而改善肌肉疲劳。

内环境紊乱通常包括肌肉组织脱水和pH降低2个方面，这两方面紊乱会引起渗透压和电解质浓度发生变化，最终引起疲劳[8]。据相关文献报道可知，枸杞多糖在浓度较高时（6.4 mg·mL-1～25.6 mg·mL-1）时，在改善蟾蜍离体排肠肌疲劳方面具有显著的效果[9]。其原因可能是试验过程中的多糖改变了培养液的渗透压，进而造成骨骼肌组织脱水，使得细胞外液内各离子浓度变化，肌细胞内环境失去了平衡和稳态；或是粗多糖内其他成分对肌细胞功能产生了影响，进而改善了肌肉疲劳[10]。试验中3种不同浓度的茶薪菇多糖均比文献报道的其他活性多糖的浓度低，因此从很大程度上降低了各种不良影响产生，充分体现了其抗疲劳效果[10]。由此可以看出，茶薪菇多糖在浓度分别为 0.01 mg·mL-1、0.05 mg·mL-1以及 0.10 mg·mL-1时具有显著的改善运动性肌肉疲劳的效果。因此可知，茶薪菇多糖对运动性肌肉疲劳功能的恢复具有积极影响，值得在临床上大力推广研究。