河南商丘地区猪伪狂犬病野毒感染和免疫情况调查

乔 波

（商丘市动物疫病预防控制中心，河南商丘 476000）

伪狂犬是由伪狂犬病毒（Psudorabies Virus，PRV）引起的一种急性、多种动物共患的、高度接触性传染病[1]。猪是PRV的传染源和自然宿主，猪感染PRV后引起发热、母猪流产、仔猪神经症状、高死亡率，中大猪呼吸道症状等临床表现[2]。我国将猪伪狂犬病列为二类动物传染病，该病在我国广泛存在，给我国养猪业造成了巨大经济损失[3]。我国广泛使用的Bartha株基因缺失疫苗为gE基因缺失，对经典的PRV免疫保护效果较好，但随着2011年后PRV强毒株出现，免疫保护效果明显下降[4]。根据病毒基因遗传进化分析，PRV野毒株属于基因Ⅱ型，而Bartha株属于基因I型，所以如果疫苗中病毒效价没有足够高，就会因免疫交叉保护不足而失去保护效果[5]。

为了解河南商丘地区PRV野毒株感染情况和免疫情况，采集养殖场、屠宰企业和无害化处理厂样品，检测PRV野毒感染情况和免疫抗体水平，为本地区猪伪狂犬病的防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 血清和组织样品

样品来自商丘地区部分规模养猪场、生猪屠宰企业和无害化处理厂，共23家养猪场，17家生猪屠宰企业和3家无害化处理厂。样品分为两部分：第一部分为养猪场生猪和生猪屠宰企业调运的待宰生猪血液样品，分离得到血清1518份。第二部分为生猪屠宰企业生猪和无害化处理厂病死猪组织样品：采集肺脏、扁桃体、淋巴结、脾脏和肝脏等内脏组织冷冻保存，研磨后取上清，共520份。采样时间为2020年上半年，具体采样情况见表1。

表1 样品采集情况

1.2 血清学检测方法

PRV野毒株抗体检测使用gE 抗体鉴别诊断ELISA试剂盒，免疫抗体检测使用gB-ELISA检测试剂盒，试剂盒购自洛阳莱普生信息科技有限公司，具体操作按照试剂盒说明书。

1.3 病原学检测方法

组织样品检测使用PRV（gE基因）实时荧光PCR检测试剂盒，购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。

2 检测结果与分析

2.1 PRV gE抗体检测结果

共检测血清样品1518份，其中9个种猪场和17个规模免疫猪场均免疫Bartha株疫苗。结果显示：9个种猪场中有3个PRVgE抗体阳性，场点阳性率33.33%；17个免疫猪场中7个gE抗体阳性，场点阳性率41.18%；9个未免疫猪场中有5个gE抗体阳性，场点阳性率55.56%；17个生猪屠宰企业的17个批次待宰生猪中11批次gE抗体阳性，阳性率64.71%。种猪场的237份样品中有77个gE抗体阳性，阳性率32.49%；免疫猪场的505份样品中有112个gE抗体阳性，阳性率22.18%；未免疫场的266份样品中有61个gE抗体阳性，阳性率22.93%；调运的待宰生猪510头有183个gE抗体阳性，阳性率35.88%。本地生猪1008份血清中gE抗体阳性250份，总体阳性率24.80%，结果见表2。

表2 PRV gE-ELISA检测结果

2.2 免疫场PRV gB-ELISA检测结果

17个免疫猪场的505份血清使用gB-ELISA和gE-ELISA检测。结果，在17个免疫场中gB抗体阳性17个，场点阳性率100%，其中328份血清阳性，免疫抗体阳性率66.93%。与gE抗体检测对比结果如表3。

表3 免疫猪场gE-EILISA和gB-ELISA检测结果

2.3 组织样品检测结果

组织样品520份，采用荧光PCR方法检测，结果3份PRVgE基因阳性，分别为2份屠宰企业样品和1份无害化处理厂样品。结果如图1。

图1 组织样品荧光PCR检测扩增曲线

3 讨论

通过此次调查商丘地区当前部分规模养猪场的PRV-gE抗体场点阳性率42.86%，低于屠宰企业调运生猪的66.67%。猪伪狂犬病在本地规模养猪场中已经得到高度重视，规模场普遍接种了疫苗，但免疫猪场个体免疫合格率不高，分析原因可能是隐性带毒猪免疫效果不佳，或者猪场感染变异株影响免疫效果，也可能是免疫程序不合理。荧光PCR检测结果显示，周边地区和本地猪群中已存在野毒株感染，阳性率较低可能是由于隐性感染和取样部位病毒含量较低。

防控猪伪狂犬病最根本的措施是实施病源净化，即“淘汰清群”方案，有条件的猪场可采用。对于大多数阳性猪场，可通过强化免疫，淘汰阳性种猪，培育或引进阴性后备母猪群，逐步实现净化。从检测结果看，商丘地区仍需要采取积极地防控措施，有针对性的制定免疫程序，逐步实现场点净化和区域净化。