幽门螺旋杆菌感染与胃癌患者血清IL-1β、IL-8、IL-32的关系

郭辉，程广坤，张晓雪，季洁如

上海健康医学院附属浦东新区人民医院检验科1、消化内科2，上海 201299

胃癌是临床上常见的恶性肿瘤，具有较高的致死率，近年来随着人们生活节奏的加快和不良饮食习惯的增加，我国胃癌发病率呈逐年上升趋势，最新报道显示，目前我国胃癌的发病率位于所有恶性肿瘤的第二位，死亡率位于第三位，且发病呈年轻化趋势[1]。胃癌的病因和发病机制复杂，幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染被认为是胃癌发生的重要危险因素[2]。相关研究表明，Hp 可以引起胃黏膜炎症反应和癌前病变，最终发展为胃癌[3]。白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、白细胞介素-8(interleukin-8，IL-8)和白细胞介素-32(interleukin-32，IL-32)均是与肿瘤发生密切相关的细胞因子。有报道显示，IL-1β广泛参与机体组织破坏和慢性炎症，被认为是驱动癌症炎症的细胞因子[4]。IL-8 是趋化因子家族的重要成员，在胃癌的发生中起到重要作用[5]。而IL-32 主要由胃黏膜组织分泌，在胃癌的发生和发展中扮演重要的角色[6]。本研究通过探讨Hp 感染与胃癌患者血清IL-1β、IL-8、IL-32 的关系，旨在为胃癌的诊断和早期治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月至2019年10月浦东新区人民医院收治的胃癌患者100 例作为研究组。纳入标准：(1)所有患者均经胃镜诊断为胃癌；(2)均接受碳14 尿素呼气试验；(3)无碳14 尿素呼气试验禁忌。排除标准：(1)合并其他器官恶性肿瘤者；(2)试验前经手术、放疗或化疗者；(3)合并免疫系统疾病及感染者；(4)妊娠哺乳期女性。根据是否存在Hp感染将患者分为Hp阳性胃癌组66例，Hp阴性胃癌组34例。Hp阳性胃癌组中男性40例，女性26例；年龄45～78岁，平均(61.23±7.37)岁。Hp 阴性胃癌组中男性19 例，女性15 例；年龄43～79 岁，平均(60.53±6.41)岁。另选取同期于我院体检时行胃镜检查的非胃癌者100例作为对照组。纳入标准：(1)受检者均经胃镜检查无胃癌及胃炎；(2)受检者均接受碳14尿素呼气试验；(3)无碳14尿素呼气试验禁忌。排除标准：(1)合并其他器官恶性肿瘤者；(2)试验前经手术、放疗或化疗者；(3)合并免疫系统疾病及感染者；(4)妊娠哺乳期女性。根据是否存在Hp感染分为Hp阳性非胃癌组31例，Hp阴性非胃癌组69 例。Hp 阳性非胃癌组中男性17 例，女性14 例；年龄42～78岁，平均(61.88±6.12)岁。Hp阴性非胃癌组中男性42 例，女性27 例；年龄44～79 岁，平均(62.11±7.67)岁。各组受检者的一般资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，所有受检者均对研究知情同意。

1.2 检查方法

1.2.1 胃镜检查 所有受检者均在胃镜下钳取胃黏膜组织，将所取胃黏膜组织，经10%甲醛溶液固定、石蜡包埋制成连续切片，应用Giemsa法进行染色，并在1 000 倍显微镜下观察，如切片组织染成紫红色则为Hp阳性。

1.2.2 碳14尿素呼气试验 所有受检者空腹状态下进行碳14尿素呼气试验，用水吞服尿素(碳14)胶囊1粒(厂家：深圳市中核海得威生物科技有限公司；批准文号：国药准字H20068129；规格：40粒)，休息15 min后取出呼气卡，受检者向呼吸卡吹气3 min，直至呼吸卡由白色变为橘黄色，然后将呼吸卡插入Hp检测仪，5 min后打印结果，若碳14 尿素呼气试验Hp 感染U 值超过100 dpm可判定为阳性[7]。

1.2.3 血清学检查 所有受检者均采集清晨空腹外周静脉血5 mL，经3 500 r/min 离心10 min，离心半径12 cm分离血清，保存于-80℃冰箱中待测。应用酶联免疫吸附法测定血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平，试剂盒购自北京万泰德瑞诊断技术有限公司，严格按照相关试剂盒说明书进行操作。

1.3 结果判定 结合组织Giemsa染色和碳14尿素呼气试验两项结果，如两者均为阳性则判定为Hp感染。

1.4 统计学方法 应用SPSS26.0 统计学软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，组间比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，应用Pearson相关性分析Hp感染与受检者血清IL-1β、IL-8、IL-32的相关性，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组和对照组受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值比较 研究组患者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 研究组和对照组受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp感染U值比较(±s)

表1 研究组和对照组受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp感染U值比较(±s)

组别研究组对照组t值P值例数100 100 IL-1β(ng/L)136.12±29.45 29.17±8.59 34.863＜0.05 IL-8(ng/L)206.05±38.35 46.74±12.36 39.538＜0.05 IL-32(ng/L)129.39±26.54 58.43±10.75 24.781＜0.05 Hp感染U值228.38±56.86 89.71±28.78 21.759＜0.05

2.2 Hp 阳性或阴性受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值比较 Hp 阳性胃癌组患者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值明显高于Hp阴性组、Hp阳性非胃癌组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；Hp阳性非胃癌组受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32水平及Hp感染U值明显高于Hp阴性非胃癌组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；Hp 阴性胃癌组患者的血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平明显高于Hp 阴性非胃癌组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，但Hp 感染U 值比较差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。

表2 Hp阳性或阴性受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32水平及Hp感染U值比较(±s)

表2 Hp阳性或阴性受检者的血清IL-1β、IL-8、IL-32水平及Hp感染U值比较(±s)

注：与Hp阳性非胃癌组比较，aP＜0.05；与Hp阴性非胃癌组比较，bP＜0.05。

组别Hp阳性胃癌组Hp阴性胃癌组t值P值Hp阳性非胃癌组Hp阴性非胃癌组t值P值IL-1β(ng/L)175.84±26.89a 18.97±4.32b 33.712＜0.05 64.18±14.36 9.21±2.19 31.187＜0.05 IL-8(ng/L)268.28±22.56a 24.65±5.31b 61.949＜0.05 107.79±18.92 12.54±2.55 41.242＜0.05 IL-32(ng/L)158.28±19.81a 35.27±7.27b 34.943＜0.05 124.03±19.42 20.49±3.17 43.280＜0.05例数66 34 31 69 Hp感染U值285.54±35.27a 50.26±10.61 37.940＜0.05 152.75±23.92 48.38±8.92 31.804＜0.05

2.3 Hp 感染与受检者血清IL-1β、IL-8、IL-32 的相关性 经Pearson相关性分析，Hp阳性者血清IL-1β、IL-8、IL-32与Hp感染U值均呈正相关(P＜0.05)，Hp阴性者血清IL-1β、IL-8、IL-32 与Hp 感染U 值均无相关性(P＞0.05)，见表3。

表3 Hp感染与受检者血清IL-1β、IL-8、IL-32的相关性分析

3 讨论

胃癌发病早期缺乏特异性临床表现，大部分患者确诊时已经处于中晚期，丧失了手术根治的最佳时机，导致胃癌死亡率居高不下。近年来，随着胃镜检查技术的普及，使部分胃癌患者可在早期即确诊，在一定程度上提高了胃癌早期诊断率。但由于胃镜需要在麻醉状态下插管，操作有一定难度，且可能引起受检者恐惧和不适，使部分人不愿意接受胃镜检查[8]。研究胃癌早期诊断具有重要的临床价值。研究表明，胃癌的发生、发展是一个多因素、多阶段的漫长复杂过程，其发病与遗传因素、环境、Hp感染、饮食不规律、吸烟、酗酒等不良生活习惯有密切关系[9-10]，其中Hp 感染被认为是导致胃癌发生的重要因素，Hp已被世界卫生组织确认为Ⅰ类致癌原。研究表明，Hp 可以引起胃黏膜组织萎缩和化生，导致胃黏膜恶性病变[11]。由于Hp 是一种微生物，当机体感染Hp 后可以引起机体免疫应答，因此通过检测相关细胞因子可以为胃癌诊断提供依据。

另有研究表明，慢性炎症在胃癌的发生及患者预后有密切关系[12]。IL-1β是白介素1的亚型，主要由内皮细胞、单核细胞和成纤维细胞生成[13]。研究表明，IL-1β可以促进B淋巴细胞增殖和分化，进而促进免疫球蛋白的分泌[14]。IL-1β能够刺激集落刺激因子、血小板生长因子的产生，激活T淋巴细胞，在机体免疫应答和组织修复中发挥重要作用[15]。魏茜等[16]报道，胃癌组织中存在IL-1β异常高表达，并且IL-1β发挥抗Hp感染的作用。IL-8主要由单核细胞、内皮细胞和成纤维细胞合成分泌，具有趋化T 淋巴细胞和嗜碱性粒细胞的作用[17]。IL-8可以增强机体非特异性炎症反应程度，与慢性胃炎、胃癌的发生有密切关系[18]。IL-32 是近年来新发现的细胞因子，主要由NK 细胞和T 淋巴细胞分泌[19]。而IL-32 可以激活NF-κB、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)等多个信号通路，引起IL-1β、IL-8和肿瘤坏死因子等炎症因子释放[20]。本研究通过对胃癌患者和非胃癌者血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值检测发现，胃癌患者血清IL-1β、IL-8、IL-32水平及Hp感染U值均高于非胃癌者，提示IL-1β、IL-8、IL-32、Hp 感染与胃癌的发生有密切关系。究其原因，大部分胃癌患者存在Hp 感染，导致血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp感染U 值升高[21]。进一步分析显示，无论是否患有胃癌，Hp 阳性者血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U值均高于Hp阴性者，证实IL-1β、IL-8、IL-32、Hp感染与胃癌的发生有密切关系。WU等[22]报道Hp的Cag可以活化NF-κB 和MAPK 信号通路，引起炎症反应。而IL-32也可以激活NF-κB和MAPK信号通路，引起IL-1β、IL-8释放。笔者分析，Hp感染后可能通过活化NF-κB 和MAPK 信号通路，引起血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平升高[23]。本研究结果还显示，Hp 阳性胃癌组血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平及Hp 感染U 值均高于Hp 阳性非胃癌组；Hp 阴性胃癌组血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平均高于Hp 阴性非胃癌组。表明除与Hp 有关外，胃癌患者血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平均高于非胃癌者。分析胃癌患者存在细胞免疫活化，T 淋巴细胞和NK 细胞发挥抗癌作用，导致血清IL-1β、IL-8、IL-32水平升高[24]。

另外，本研究发现Hp 阳性者血清IL-1β、IL-8、IL-32 与Hp 感染U 值均呈正相关，其主要原因可能在于：Hp 感染可通过调控相关的信号通路，引起血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平升高[25]。而对于Hp 阴性者，如未发生胃癌，血清IL-1β、IL-8、IL-32 可能处于较低水平，如发生胃癌，由于存在细胞免疫活化，血清IL-1β、IL-8、IL-32水平升高，因此其水平与Hp感染U值并无相关性[26]。

综上所述，Hp 感染是胃癌发生的重要病因之一，Hp 感染与胃癌患者血清IL-1β、IL-8、IL-32 水平异常升高存在密切联系，在Hp 感染后胃癌的发病过程中IL-1β、IL-8、IL-32 发挥重要作用。临床工作中可能通过联合检测IL-1β、IL-8、IL-32 与碳14 尿素呼气试验，达到早期有效诊断因Hp感染导致的胃癌的目的。