可溶性MerTK在胸腔积液病因学中的诊断价值

赵海鹏 张珍珍 丁会

(1华北电力大学医院外科，北京 102206；2潍坊市人民医院；3吉林大学第一医院)

胸腔积液是多种原因引起的病变，病因不同，胸腔积液的性质亦不同，临床上可分为漏出液和渗出液。漏出液常见于低蛋白血症、心衰等，临床上比较容易诊断；然而渗出性的胸水常见于结核性胸膜炎及恶性肿瘤，但二者都是淋巴细胞性胸腔积液，鉴别困难，两者的预后截然不同，所以两者的鉴别诊断尤为重要。本文拟检测结核性胸腔积液(TPE)与恶性肿瘤性胸腔积液(MPE)中MerTK表达，以探究其对结核性与恶性胸水鉴别诊断的价值。

1 资料与方法

1.1研究对象 收集2018年6月至2019年6月吉林大学第一医院呼吸与危重症学科，经胸腔镜下胸膜活检且明确诊断的患者，共104例，其中TPE患者54 例为TPE组；MPE患者50例为MPE组，年龄18～73岁。两组性别、年龄无统计学差异，见表1。

1.2标本收集 ①用离心管收集患者的第一管胸水，使用离心机分离上清液。②上述分离出的上清再次进行离心，将此上清分装至9个EP管中，标记好保存于-80℃冰箱中。③将首次分离过的上清液分装好，用分离管底部沉积的细胞制作玻片标本，观察不同性质胸水中细胞的形态。

1.3主要试剂及仪器 MerTK试剂盒(Abcam，美国)，酶标仪(BioTek，ELx800)

1.4测定方法 (1)解冻上清液，按照酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒说明书步骤进行严格的操作来测定蛋白浓度，设定分光光度值为450 nm，用以测定样品的OD值，按说明绘制标准曲线，从而计算出各个样品的浓度值。(2)入组患者的胸水常规、生化等指标由医院检验科完成。

1.5统计学方法 应用SPSS17.0软件进行t检验，秩和检验，受试者工作特征(ROC)曲线分析和Pearson线性相关分析。

2 结 果

2.1两组胸腔积液中MerTK的含量 TPE组MerTK浓度〔(5 310.380±2 769.791)ng/L〕明显高于MPE组〔(904.290±561.547)ng/L，P<0.000 1〕。

2.2MerTK对胸腔积液病因(即结核与恶性肿瘤)鉴别诊断的价值 MerTK蛋白鉴别TPE组与MPE组的曲线下面积为0.961,敏感度88.9%，特异性98.0%，临界值为2 178.22 ng/L(P<0.01)。

2.3两组炎症因子表达水平比较 两组白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度差异显著(P<0.01)。见表1。

表1 两组一般资料及炎症因子表达水平

2.4MerTK表达与IL-1β、TNF-α水平的相关性 两组MerTK表达与IL-1β、TNF-α水平无相关性(P>0.05)。见图1。

图1 两组MerTK表达与IL-1β、TNF-α水平的相关性

3 讨 论

胸腔积液是呼吸科常见疾病，病因主要是结核与恶性肿瘤〔1〕，而两者均表现为渗出液，且胸水中有较多的淋巴细胞，临床上对两者的鉴别存在一定难度，且结核与肿瘤的预后是完全不一样的。结合临床及实验室研究，目前有很多方法用以鉴别两者，但大多都是敏感性与特异性不能同时兼顾。胸腔积液中的一些差异蛋白，对胸水病因的鉴别有较高的临床价值，MerTK蛋白对结核性胸水与恶性胸水的鉴别诊断可能具有较为显著的意义。

MerTK是受体酪氨酸激酶的一种蛋白，在人体中广泛存在，发挥许多的功能，生理或者病理发生的功能〔2〕。酪氨酸激酶通过一系列的通道、机制参加细胞信号转导，从而引起机体基因水平的变化，最后导致相关一系列的病理生理改变〔2〕。MerTK受体通常存在于M2巨噬细胞，可识别凋亡细胞的细胞膜配体，从而使巨噬细胞与凋亡细胞结合，进而使巨噬细胞吞噬凋亡细胞〔3〕。研究表明〔4〕，凋亡细胞可通过MerTK来诱导程序性死亡受体(PD)-L1的表达，可以说明当MerTK高水平表达时，便可促进肿瘤的发生及生长。文献中指出，MerTK与一些实体的恶性肿瘤，常见的如胃癌、肺腺癌、肺鳞癌等，与这些肿瘤的产生可能有关系，所以说可以把MerTK当成一个肿瘤靶点研究，可能会有比较有意义的收获〔5〕。免疫学研究指出，结核病的主要保护机制是细胞免疫，当人体感染有致病能力的结核杆菌后，首先是大量巨噬细胞作出免疫应答，其中肺泡的巨噬细胞会产生大量IL-1、IL-6和TNF-α等炎症因子，从而使结核杆菌感染的部位聚集淋巴细胞和单核细胞，渐渐形成肉芽肿，进而控制结核抗酸杆菌在体内扩散，并且杀灭结核菌。当人体受到结核杆菌的感染时，体内可以检测到与M2型巨噬细胞激活相关的因子表达，比如CD163、Mer(即MerTK)、CD206等，所以说MerTK蛋白也参与了以上结核杆菌感染时的细胞免疫机制〔6〕，相关实验发现，MerTK浓度的高低，可能与疾病的严重程度呈正相关〔7〕。

本研究中，MerTK在TPE组与MPE组中均有高表达，并且在TPE组的浓度要明显高于MPE组，考虑与M2巨噬细胞在活动性结核中的活性明显增强有关〔8〕。MerTK浓度的测定应用于结核性与恶性胸水的鉴别诊断时，具有较高的灵敏度与特异度，可用于鉴别胸水的病因〔9〕。

本研究存在一定的不足之处，样本量相对比较少，是单指标的试验研究，可以扩大样本量，联合检测多个指标等，使实验研究得出的数据更加严谨、有意义，并进一步探讨MerTK与结核性胸腔积液、恶性胸腔积液患者的预后有无相关性。