复合酵母菌制剂对貉生长性能、粪便微生物菌群及血液生化指标的影响

张召兴，刘少杰，贾青辉，张艳英，史秋梅*，高桂生

（1.河北旅游职业学院畜牧兽医系，河北承德 067000；2.河北科技师范学院/河北省预防兽医学重点实验室，河北秦皇岛 066004）

乌苏里貉为食肉目犬科貉属的一种珍贵毛皮动物，主要分布于我国河北、山东、吉林、黑龙江等地区，我国每年乌苏里貉养殖量达4 000 万只，其中河北地区乌苏里貉养殖数量占全国的一半以上，是我国重要的经济动物之一[1-2]。在乌苏里貉的养殖过程中，一些抗生素及含有抗生素添加剂的使用导致乌苏里貉细菌性疾病耐药性增强、肠道菌群失调及免疫低下等[3]。相关研究表明益生菌可以具有调节肠道菌群平衡、提高免疫力、不易产生耐药性等优点，被广泛应用于畜禽养殖中[4]。

益生菌是一种活性微生物、培养物以及其他产物的统称，益生菌同通过多种途径调节胃肠道微生物菌群平衡、促进营养物质消化与吸收及动物生长，具有提高生长性能、增强机体的免疫力等多种优点，被广泛应用于畜禽的健康养殖中，是抗生素最佳替代品之一[5]。益生菌常用的菌种主要包括酵母菌类、乳酸菌类、肠球菌类、芽孢杆菌类等，其中酵母菌是一种兼性厌氧微生物，富含多种蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养物质，还富含多种消化酶类，可作为蛋白质补充料[6-7]。国内关于复合酵母菌制剂在乌苏里貉养殖过程中应用的报道较少。本试验旨在探讨复合酵母菌制剂对貉生长性能、粪便微生物菌群及血液生化指标的影响，为复合酵母菌制剂在临床中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 复合酵母菌为固体粉末，其酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌菌种分离健康动物肠道，经过筛选应用比例为4:2:1，活菌数均为9.0×109CFU/g，由本试验制备。

1.2 试验设计及日粮 选择体重相近、60 日龄断奶仔貉40 只，仔貉由昌黎县貉规模化养殖场提供，随机分成4个组，每个组10 个重复，每个重复1 只。对照组饲喂基础日粮，试验组分别在基础日粮添加0.5%、1.0%、1.5%复合酵母菌制剂。笼子为70 cm×60 cm×50 cm，食物在饲槽中饲喂，单笼饲养。试验貉的基础日粮设计参照李漠的试验[8]，饲粮组成及营养成分见表1。在试验期间不添加任何益生菌制剂与抗生素制剂。试验期60 d。

表1 饲粮组成及营养成分(干物质基础)

1.3 生产性能测定 在试验开始与结束，提前断料12 h，并对每个试验组中每个重复组逐个称重，记录试验开始与结束时的体重，每天定时给料，回称剩料，测定平均日增重、平均日采食量、耗料增重比。

1.4 粪便微生物菌群的测定 在试验结束时，断料12 h，用粪便采集管，随机采集每个组的新鲜粪便样品5 份，置于-20℃冰箱保存，分别接种于MRS 培养基、大肠杆菌杆菌显色培养基、LB 培养基上，参考何佳等[9]的方法检测粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的数量，每克粪便中所含乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌总数用对数（log10CFU/g）表示。

1.5 血清生化指标的测定 在试验结束后断料12 h，每个试验组随机抽取5 只试验貉，用采血针后肢外侧跗关节上方隐静脉采血液3 mL，3 000 r/min 离心 5 min，分离血清。按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）说明书测定血清中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血清中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、血尿素氮（BUN）。

1.6 统计分析 采用SPSS 19.0 软件进行单因素方差分析（One-Way ANOVA），采用Duncan's 法进行均值比较，P<0.05 表示差异显著。

2 结果

2.1 复合酵母菌制剂对貉生长性能的影响 由表2 可知，1.0%、1.5% 组的平均日增重显著高于对照组，耗料增重比显著低于对照组。0.5%、1.0%、1.5% 组间平均日增重、耗料增重比差异均不显著。

表2 复合酵母菌制剂对貉生长性能的影响

2.2 复合酵母菌制剂对貉粪便微生物菌群的影响 由表3 可知，1.0%、1.5%组粪便中的双歧杆菌和乳酸杆菌含量显著高于对照组，与0.5%组无显著差异。1.0%、1.5%组粪便中的大肠杆菌含量显著低于对照组，与0.5%组无显著差异。

表3 复合酵母菌制剂对貉粪便微生物菌群的影响 log10CFU/g

2.3 复合酵母菌制剂对貉血液生化指标的检测结果 由表4 可知，1.0%、1.5%组血清中TP 含量显著高于对照组，与0.5%组差异不显著。10.0%、1.5%组血清中GPT 和BUN 含量显著低于对照组，与0.5% 组无显著差异。4个处理组的ALB、GOT 均无显著差异。

表4 复合酵母菌制剂对貉血液生化指标的影响

3 讨 论

3.1 复合酵母菌制剂对貉生长性能的的影响 酵母菌等益生菌制剂具有提高动物生长性能、生产性能及免疫机能[4-7]。如酵母菌等复合培养物可以提高肉鸡生长性能[10]、复合益生菌制剂可以显著提高仔猪生长性能[11]。本试验结果表明，在断奶仔貉基础日量中添加1.0%、1.5%复合酵母菌制剂可以显著提高断奶仔貉的平均日增重，显著降低耗料增重比，试验组平均采食量均高于对照组，说明1.0%、1.5%复合酵母菌制剂均可以提高断奶仔貉的生长性能，以1.0%添加为适宜。酵母菌等益生菌制剂中富含多种活性物质，肠道内多种消化酶的分泌，可以促进饲料中营养物质在体内的消化与吸收，提高饲料的利用率，降低其耗料增重比，提高其日增重[9]。

3.2 复合酵母菌制剂对貉粪便微生物菌群的影响 大肠杆菌是存在动物肠道中的正常菌群，当外界条件改变时，该菌可以转化为致病菌，引起动物的肠炎、腹泻及败血症等，严重者可导致死亡[12]。相关研究表明外来酵母菌、芽孢杆菌、乳酸菌等多种厌氧菌在肠道中增殖，通过占位作用，与大肠杆菌、沙门菌等病原菌竞争宿主结合位点，促进肠道蠕动及肠液冲刷，有利于排除病原菌，调整菌群平衡[10-11]。本试验结果表明，在断奶仔貉基础日量中添加1.0%、1.5%复合酵母菌制剂能够显著降低断奶仔貉粪便中大肠杆菌含量，提高双歧杆菌和乳酸杆菌含量。可能由于复合酵母菌制剂促进了肠道有益菌生长繁殖，降低有害菌在肠道内定植，从而让益生菌在肠道起到一个“占位”效果，因而抑制了有害菌生长与繁殖。何佳等[9]报道在断奶仔猪基础日粮中添加益生菌可显著降低粪便大肠杆菌含量，提高双歧杆菌和乳酸杆菌含量。酵母菌制剂调节肠道微生物菌群平衡机制尚未明确，有待进一步研究。

3.3 复合酵母菌制剂对貉血液生化指标的影响 血液生化指标的动态变化可以反映机体物质代谢情况及健康状态。血清中的TP 和ALB 含量变化可以反映机体蛋白的代谢水平和物肝脏蛋白质合成能力的强弱重要指标之一，GPT 和GOT 主要参与肝脏的物质代谢，当肝脏受到损伤时GPT 和GOT 活性增强，是评价肝功能重要指标之一，血清中BUN 是饲料中蛋白质最终的代谢产物，是评价肾功能重要的指标之一[13-14]。本试验结果表明，在断奶仔貉基础日粮中添加1.0%、1.5%复合酵母菌制剂可以显著提高血清中TP 含量，降低血清中GPT和BUN 含量；0.5%、1.0%、1.5% 组血清中ALB 含量高于对照组，0.5%、1.0%、1.5%组血清中GOT 含量均低于对于组，但均差异性不显著，与王杰等[11]、王传龙等[15]报道一致。可能由于复合酵母菌制剂中富含多种活性物质，可以促进体内的物质代谢，因而降低肝、肾损伤，提高肝、肾代谢功能。

4 结 论

本试验条件下，添加1.0%、1.5%复合酵母菌制剂均可以提高貉生长性能，改善肠道菌群结构，降低肝肾损伤，以1.0%添加较适宜。