Survivin和Aurora-b表达对喉癌诊断及病情评估的临床意义

熊雅红 王 翠 李 彬 徐 刚

据相关资料显示，喉癌的发病率在我国呈不断增长的趋势，占全身恶性肿瘤的6%左右，在呼吸系统恶性肿瘤中排第2位[1]，具有较高的颈淋巴结转移倾向和局部侵袭性。已有研究证实，喉癌的发生、发展都与众多细胞因子及基因存在一定的相关性[2]。Survivin是一种与多种肿瘤的发生具有密切关系的已知的功能最为强大的凋亡抑制因子[3]，Aurora-b是一种在多种肿瘤组织中高表达的，与细胞有丝分裂密切相关的丝氨酸/苏氨酸激酶[4]。目前，Survivin和Aurora-b表达与喉癌发生、发展关系的研究报道较少。本文旨在探究Survivin和Aurora-b表达对喉癌诊断及病情评估的意义，具体内容报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2011年1月至2014年6月期间于我院经病理学确诊为喉癌，采用手术治疗(术前均未接受过任何化疗、放疗及生物治疗)，且临床资料完整的喉癌石蜡包埋标本78例，其中男性73例，女性5例，平均年龄为(58.1±4.9)岁；在2012年3月至2015年8月期间于我院确诊为喉室息肉或声带息肉的患者中，取20例正常喉增殖期组织石蜡包埋标本。

1.2 试剂与方法

兔抗人Survivivin、Aurora-b多克隆抗体均由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。检测步骤按说明书进行，材料进行取材、固定、包埋及脱水脱蜡等操作；使用3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶；使用PBS冲洗样品后滴加封闭液孵育15 min，加一抗，分别为兔抗人Survivin、Aurora-b多克隆抗体，4 ℃过夜；使用PBS冲洗样品后滴加二抗，37 ℃孵育30 min；使用PBS冲洗样品后滴加DAB显色液，避光孵育5 min，纯化水冲洗5 min，苏木精复染10 min，纯化水冲洗并经PBS蓝化，脱水干燥，再中性树胶封片，用PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性组织切片作为阳性对照。对喉癌患者进行电话或门诊复诊随访，随访截止时间为2019年6月。

1.3 结果判定

Survivin和Aurora-b表达水平均分为阳性(肿瘤细胞数≥15%)和阴性(阳性肿瘤细胞数<15%)。

1.4 统计学分析

采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计数资料(n/%)通过卡方检验，以P<0.05代表差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 Survivin，Aurora-b在喉癌和正常组织中的表达

经检测，Survivin和Aurora-b在喉癌组织中表达的阳性率分别为75.6%、60.3%，显著高于在正常组织中的阳性表达率(10.0%、5.0%)，P<0.01。见表1。

表1 Survivin，Aurora-b在喉癌和正常组织中的表达(例，%)

2.2 不同临床病理参数下喉癌患者Survivin、Aurora-b的表达

经检测，Survivin、Aurora-b在临床分期Ⅳ、Ⅲ期的喉癌中阳性率显著高于Ⅱ、Ⅰ(P<0.05)；Survivin、Aurora-b在高分化的阳性率低于低分化的阳性率(P<0.05)；Survivin和Aurora-b在淋巴结转移患者组的阳性率高于非淋巴结转移患者组的阳性率(P<0.05)；声门下型的Survivin和Aurora-b阳性率显著高于声门上型和跨声门型(P<0.05)。见表2。

2.3 喉癌组织Survivin、Aurora-b表达与患者的预后情况分析

经检测，Survivin、Aurora-b低表达者术后5年总生存率、术后生存时间均显著高(长)于高表达者(P<0.01)。见表3。

3 讨论

迄今为止喉癌的病因尚未完全阐明，目前认为除基因因素外，长期吸烟、饮酒、感染HPV等也是其重要引发因素[5]。据相关资料显示，喉癌的发生和发展是一个多基因参与、多阶段相互作用的过程[6]，因此，喉癌的基因研究也成为其病因学研究和病情评估的重中之重。

Survivin是一种位于染色体17q25 的凋亡抑制基因，除了胚胎组织外几乎不表达于任何正常分化的组织，但在肺癌、宫颈癌、肝癌等多个肿瘤组织中高表达，且与该肿瘤化疗抗性、肿瘤侵袭性、患者的预后密切相关[7]。Aurora-b在头颈部鳞状细胞癌、卵巢癌等肿瘤组织中过量表达，且与肿瘤恶性程度有关[8-9]。本文研究结果显示，经检测，Survivin和Aurora-b在喉癌组织中表达的阳性率分别为75.6%、60.3%；在正常组织中的阳性表达率分别为10.0%、5.0%；表明Survivin和Aurora-b在喉癌组织中的表达水平高于正常组织中，可将其作为恶性肿瘤的早期诊断指标。同时，本文研究结果还显示，Survivin和Aurora-b在喉癌组织中表达的阳性率明显高于正常组织；经检测，Survivin、Aurora-b在临床分期Ⅳ、Ⅲ期的喉癌中阳性率显著高于Ⅱ、Ⅰ；Survivin、Aurora-b在高分化的阳性率低于低分化的阳性率；Survivin和Aurora-b在淋巴结转移患者组的阳性率高于非淋巴结转移患者组的阳性率；声门下型的Survivin和Aurora-b阳性率显著高于声门上型和跨声门型；Survivin和Aurora-b低表达者术后5年总生存率、术后生存时间均显著高(长)于高表达者。表明，检测Survivin和Aurora-b的表达水平可用来判断肿瘤的分期、分化程度、预后等，对评估患者病情及制定临床治疗方案意义重大，与刘春玲等的研究结果相似[10]。

表2 不同临床病理参数下喉癌患者Survivin、Aurora-b的表达(例，%)

表3 喉癌组织Survivin、Aurora-b表达与患者的预后情况分析(n=78)

综上所述，检测Survivin和Aurora-b表达可判断喉癌的临床分期、分化情况等，且对评价患者预后意义重大。