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荧光RAA检测方法快速诊断一起猪附红细胞体病

2020-09-02郑秀红乔启波李丽婧杜秋明

吉林畜牧兽医 2020年7期
关键词:体病猪只猪瘟

郑秀红,袁 莉,乔启波,李丽婧,杜秋明*

1.吉林省龙井市德新乡畜牧兽医站,吉林龙井 133400;2.吉林省龙井市老头沟镇畜牧兽医站,吉林龙井 133400;3.吉林省延边州动物疫病预防控制中心,吉林延吉 133000;4.吉林省龙井市动物疫病预防控制中心,吉林龙井 133400

1 概述

附红细胞体可寄生在多种动物的红细胞表面、血浆、骨髓等部位,使感染动物发生附红细胞体病[1~3],该病也可以感染人,是一种人兽共患传染病[4~7]。猪附红细胞体病可在不同日龄的猪群发生,仔猪的发病率和死亡率都相对较高,母猪感染情况也较为严重。本病的传染源主要是患病猪和隐性感染的猪只。本病可通过虱子、蚊子、蜱虫、疥螨等媒介昆虫传播,也可通过猪只咬尾、舔舐伤口等方式传播,不更换注射器,使用同一支注射器对多个猪只进行免疫或注射也可造成该病的传播。发病猪临床多表现为体温升高、精神沉郁、眼结膜苍白或黄染、贫血、生长缓慢、甚至死亡。黄疸、皮下组织水肿、心包积液、肝脾肾肿大、淋巴结水肿是该病的主要病理变化。该病的临床症状和病理变化均无特异表征,是导致该病临床诊断困难的主要原因。

2 常规实验室检测方法

因通过临床症状和病理变化无法对该病进行准确的诊断,为提高诊断的准确性和检出率,血液镜检、血片染色、ELISA等血清学检测方法相继应用到该病,但上述方法在敏感性、特异性上都存在不足,致使该病的检出率和诊断准确性未能得到大幅度提高。PCR方法的应用让检测该病的敏感性和特异性都得到了提高,但PCR检测对仪器、检测环境、人员技术水平、都有特定要求,操作复杂、耗时较长不适合临床快速诊断。

3 荧光RAA检测方法

荧光RAA检测方法是利用重组酶介导的等温扩增技术在37~42 ℃恒温条件下完成靶模板链的扩增,并利用荧光探针方法检测荧光信号[8]。重组酶介导的等温扩增技术的应用提高了检测方法的敏感性,荧光探针方法保证了检测的特异性。整个过程不像PCR方法需要频繁的升降温度,对仪器要求不高,检测用时短,在20 min内均可完成。该方法敏感、特异、耗时短、操作简便的特点适合临床快速检测。

4 检测诊断

2020年3月,一生猪养殖户猪只出现发热、贫血、消瘦、毛色暗淡等症状,对出现症状的猪只随机挑选3头,每头采集血液样本1份,对采集的样本分别进行猪瘟、高致病性蓝耳病、非洲猪瘟PCR检测和猪附红细胞体荧光RAA检测。结果猪瘟、高致病性蓝耳病、非洲猪瘟PCR检测均为阴性,3份样本猪附红细胞体荧光RAA检测均为阳性(图1),根据检测结果并结合临床症状确诊发病猪群患有猪附红细胞体病,并根据诊断结果指导养殖户对该病进行防治,经7 d的治疗,该猪群临床症状逐渐消失。

5 讨论

防治猪附红细胞体病应加强饲养管理减少因混群等原因导致的咬伤、舔舐伤口等方式传播,合理补充微量元素减少咬尾事件发生,在治疗注射和免疫注射时做到“一畜一针”,避免因注射交叉使用造成的该病传播,做好防虫工作减少媒介昆虫传播。

近年动物疫情形势复杂,疫病种类不断增加,猪附红细胞体病也常常呈现继发感染和混合感染的情况,在诊断该病时要注意与其它疫病的鉴别诊断,在选择诊断方法时尽可能的选择敏感性高和特异性强的检测方法,以确保检出率和诊断的准确性。

图1 猪附红细胞体荧光RAA检测结果

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