山楂对围产期奶牛肝功能和血脂的影响

（宁夏大学，银川 750021）

奶牛围产期是指产前3周至产后3周，其中前三周为围产初期，后三周为围产后期。围产期是奶牛泌乳周期中十分重要的时期，该时期由于奶牛干物质采食量急剧下降、胎儿营养需求大、泌乳启动及采食量上升速度低于泌乳量的上升速度，造成能量供应不能满足能量的输出，导致奶牛处于能量负平衡状态（negative energy balance,NEB）。围产期奶牛通过体脂动员缓解能量负平衡，脂肪组织分解生成大量游离脂肪酸(nonesterified fatty acids,NEFA)，游离脂肪酸进入肝脏进行代谢，但围产期奶牛对游离脂肪酸的代谢能力有限，使得大量游离脂肪酸在肝脏因不完全氧化而形成酮体，或酯化形成甘油三酯( triglyceride,TG)在肝脏积累，易导致酮病或脂肪肝的发生[1]。

大量的研究表明，在饲料中添加中草药能够明显提高奶牛的采食量、免疫力和生产效能。山楂是蔷薇科植物山里红的成熟干燥果实，味酸、甘，微温，归脾、胃、肝经。它是人类常用的健胃消食药，是中草药中可以药食两用的一种，价格便宜，易于获得。在饲料中适量地添加山楂可以提高奶牛产奶量，改善奶牛消化疾病和采食量低的情况[2]。山楂中含有大量的枸橼酸、酒石酸、苹果酸等有机酸和较多的维生素、微量元素、糖，由于营养丰富可以增强饲料的适口性[3]。同时，山楂中还含有具有降血压、调血脂、改善心肌供血供氧、增加冠脉流量等功能的黄酮类化合物以及对疲劳和肿瘤有一定抵抗力的活性多糖、甾体类化合物[4～6]。总体来说山楂是一种很有开发价值的中草药饲料添加剂，应用前景非常广阔。本研究将山楂粉末作为围产期奶牛饲料添加剂，通过测定奶牛血浆中各生化指标，以此来研究山楂对围产期奶牛肝功能和血脂的影响。

1 材料和方法

1.1 试验仪器

全自动生化分析仪（BS-180，深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；离心机(TGL-16，江苏中大仪器科技有限公司）。

1.2 试验试剂

兽用生化试剂包括碱性磷酸酶（ALP）试剂盒、谷草转氨酶（AST）试剂盒、谷氨酰转肽酶（GGT）试剂盒、谷丙转氨酶（ALT）试剂盒、甘油三酯（TG）试剂盒、总胆固醇（TC）试剂盒，均购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司。

1.3 试验分组与给药

选取宁夏某奶牛场胎次、泌乳量和体格相近的20头围产期荷斯坦牛，随机分为对照组和试验组，每组10头。对照组饲喂围产期TMR，试验组在围产期TMR的基础上添加100g/d山楂粉末。预饲期为1周，正常饲喂时间为42d（即产前21d至产后21d），每个处理组饲养条件一致，在每天早晨8:00TMR车添加完料后，迅速向日粮中加入山楂粉末，混合均匀。奶牛自由采食，自由饮水。

1.4 样品采集

各组奶牛分别在分娩前21d、分娩当天、分娩后21d尾根静脉采集静脉血10mL，肝素钠抗凝，以3 000r/min离心10min，检测血浆中ALT、AST、ALP、GGT、TC和TG的含量。

1.5 数据分析

使用SPSS 13.0进行统计学分析处理，试验结果均以平均值±标准差（Mean±SD）表示。数据经正态分布检验后，进行单因素方差分析，并用Duncan法进行多重比较。

2 结果与分析

由表1和图1可知，试验组AST、ALP、GGT、ALT、TC、TG的活性在产后21d均低于产前21d和分娩当天（P＜0.05），且分娩当天均低于产前21d（P＜0.05）。对照组这些指标的活性在产后21d均高于产前21d和分娩当天（P＞0.05）。在试验期，试验组这些指标的活性均呈持续下降趋势，对照组均呈持续上升趋势。试验组血浆中这些指标的活性在分娩当天时均低于对照组相应指标（P＜0.05），在产后21d时也低于对照组（P＜0.05）。

表1 山楂对奶牛血浆中ALP、AST、GGT、ALT、TC、TG活性的影响

图1 山楂对围产期奶牛肝功能和血脂相关指标的影响(a: AST, b:ALP, c: GGT, d: ALT, e: TC, f:TG)

3 讨论

3.1 山楂对奶牛肝功能的影响

近年，血液中谷氨酰转肽酶(GGT)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶（ALP）等的水平已被临床作为评估肝功能损伤程度的指标应用[7]。GGT在肝细胞线粒体中分泌，健康动物血液中表达水平较低，但是在研究中发现，当肝脏组织细胞出现异常时会导致这些组织细胞膜通透性增强，从而使得血液中GGT的表达升高[8]。ALT只存在于肝细胞胞质内，具有较高的特异性，如果肝细胞出现1%的损伤，那么血液中ALT水平就会升高1倍，因此，ALT被认为是检测肝功能损害的最敏感指标。肝脏中存在大量的AST、ALP，当肝细胞受到损伤，AST、ALP的水平通常是升高的[9]。本试验发现，在分娩前后21d内，AST、ALP、GGT、ALT这些肝功能损伤指标的检测结果均表明试验组优于对照组，且随分娩的时间的延长，试验组指标越来越好。这说明在日粮中添加山楂具有减少奶牛肝脏内脂质沉积的作用，能很好地保护肝脏组织的生理功能。这与叶希韵等的研究结果一致[10]。

3.2 山楂对奶牛血脂的影响

血液中胆固醇和甘油三酯水平检测对奶牛产后健康的诊断和监控有着重要意义。血脂的主要成分是胆固醇和甘油三酯，随着血液中胆固醇和甘油三酯含量过高奶牛的健康将会受到损伤。通过对血浆进行生化分析可以胆固醇和甘油三酯的指标变化来判断山楂对血脂的影响。7α-羟化酶（cholesterol 7α-hydroxylase，CYP7A1）是肝脏合成并促使胆固醇转化成胆汁酸的限速酶，在维持体内胆固醇代谢平衡上起关键作用。Kwok等研究发现，山楂主要作用机制是通过提高肝脏7α-羟化酶表达促使胆汁酸大量排出，抑制胆固醇的生物合成[11]。本试验结果显示，在分娩前后21d内，试验组的TG、TC水平优于对照组，且随分娩后时间的延长，试验组指标越来越好。这说明山楂作为日粮添加剂具有降低围产期奶牛血脂的作用。这一结果与胡慧明等的研究结果相符合[12]。

4 结论

通过对围产期奶牛血浆进行生化分析检测，结果显示试验组ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在分娩当天和产后21d时逐渐下降，且与对照组差异显著（P＜0.05）。且试验组血浆中ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在产后21d时均显著低于其余两个阶段（P＜0.05）。综上所述山楂能显著降低奶牛血脂和减轻肝损伤。