HPLC法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量

张 浩

（辽宁盘锦检验检测中心，辽宁 盘锦 124010）

甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药等功效，其用途广泛，有着“国老”别名[1-2]。神农本草经甘草是上品常用中药，在中国甘草应用于临床的时间已有4000多年。甘草中的主要活性成分甘草酸具有抗炎、解热消毒、抗肿瘤、抗过敏和保肝等作用[3]。本文选取了不同产地的甘草，采用高效液相色谱法对甘草苷和甘草酸含量进行了测定，为以后的科研、医院购药、百姓用药提供了指导。

1 材料与仪器

1.1 仪器与试剂

Agilent1100型高效液相色谱仪，PRO-DI-T超纯水机（德国Sartorius公司），BP211D电子天平（德国Sartorius公司），700VDE型数控超声波清洗器（合肥金龙克机械制造有限公司），HL-100 型高速多功能粉碎机（上海塞耐机械有限公司），202-OAB型电热恒温干燥箱（天津市泰斯特仪器有限公司），甘草苷对照品（批号：111610-201908，含量为95.0%）购于中国食品药品检定研究院，甘草酸铵对照品购于中国食品药品检定研究院，乙腈为色谱纯，磷酸为优级纯（国药集团化学试剂有限公司）。

1.2 材料

本实验中所使用的甘草中药饮片均购自辽宁盘锦地区的不同药品经营单位（6个产地，分别是新疆、内蒙古、宁夏、甘肃、黑龙江、山西），经辽宁盘锦检验检测中心主任中药师张国友鉴定均为正品。

2 方法与结果

2.1 甘草酸测定方法

2.1.1 色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为0.05%磷酸溶，检测波长237 nm；按下表中规定进行梯度洗脱。

表1 色谱条件

2.1.2 对照品溶液制备

甘草苷和甘草酸铵对照品精密称定后加70%乙醇制成每l.0 ml含甘草苷20µg和甘草酸铵0.2 mg的溶液，用0.45µm微孔滤膜滤过，供测试使用(甘草酸重量=甘草酸铵重量/1.0207)。

2.1.3 供试品溶液的制备

取全部供试样品，分别粉碎，粉碎后过三号筛，精密称定上述6个供试样品粉末约0.2g，加入100ml70%乙醇溶液，超声处理30min，室温放冷后称定重量，补足超声前后减少的重量，加入乙醇后摇匀，进行过滤，取续滤液，即得供试品溶液。

2.1.4 甘草苷和甘草酸含量测定

吸取对照品和供试品溶液各10.0µL，注入高效液相色谱仪，通过峰面积计算进而得到甘草苷和甘草酸的含量。

2.2 结果

《中国药典》2015年版一部中对甘草中甘草苷和甘草酸含量进行了规定：按干燥品计算，含甘草苷不得少于0.45%，甘草酸不得少于1.8%。本文选取的6个产地的甘草均符合要求，其数值见表2。

表2 6个产地的甘草中甘草苷和甘草酸含量

3 讨 论

本文选取了6个不同产地的甘草，采用高效液相色谱法分别测定了甘草中甘草苷和甘草酸的含量。高效液相色谱法，操作简单，灵敏度高，结果准确可靠。经过测定得出：内蒙古出产的甘草中甘草苷和甘草酸含量最高，进一步体现了药材地道性的重要性。