HPLC法测定二甲氨基氯乙烷盐酸的有关物质

孟秀娟,董海霞,张曼红,甄爱华,刘建洋

( 山东绅联药业有限公司济南分公司，山东 济南 250101)

二甲氨基氯乙烷盐酸是一种重要的精细化学品，用途极为广泛，用于有机合成、医药中间体。作为医药中间体，可用于合成促胃肠动力药盐酸伊托必利[1-2]，二甲氨基氯乙烷盐酸与4-羟基二苯甲酮反应生产抗乳腺癌药枸橼酸托瑞米芬[3]，2-吡啶基苯基甲基甲醇与二甲氨基氯乙烷盐酸反应生产琥珀酸多西拉敏[4]，等等。国家药审中心审评五部凌霄曾报道[5]，起始原料、关键原料的合理控制，可以最大限度地降低可能引入的杂质，质量研究存在问题最突出的是有关物质。医药中间体的有关物质检查是一项非常重要的质量控制指标，而二甲氨基氯乙烷盐酸的有关物质研究目前鲜有报道，本文对二甲氨基氯乙烷盐酸的有关物质检查方法进行系统的方法学验证，证明了所用的有关物质检测方法确实有效地检出二甲氨基氯乙烷盐酸的有关物质。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

电子天平 Quintix 125D-1CN(赛多利斯)，Waters e2695高效液相色谱仪(配二极管阵列、紫外检测器)。

1.2 试剂

二甲氨基氯乙烷盐酸(济南健丰化工有限公司，批号：20190715)；乙腈(ASTOON，色谱纯，批号：A19T1008，A19T1115)；乙酸铵(默克，分析纯，批号：A0963116636)。

2 方法与结果

2.1 方法

2.1.1 色谱条件

用亲水硅胶为填充剂(Waters XBridge HILIC 4.6mm×250mm，5μm)；流动相为10mM乙酸铵-乙腈(15∶85)；流速为每分钟0.8mL；柱温30℃；检测波长为205nm。

2.1.2 溶液配制

溶剂配制量取0.01mol/L乙酸铵(称取乙酸铵0.77g，加入1000mL水，溶解)150mL和乙腈850mL，混合均匀。

供试品溶液：取二甲氨基氯乙烷盐酸约50mg，精密称定，置25mL量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，制成每1mL中约含二甲氨基氯乙烷2.0mg的溶液，临用现制。

对照溶液：精密量取供试品溶液1mL，置100mL量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，制成每1mL中约含二甲氨基氯乙烷盐酸0.02mg的溶液。

2.2 结果

2.2.1 专属性

2.2.1.1 空白干扰试验

精密量取空白溶剂、对照溶液和供试品溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，空白溶剂不干扰本品有关物质的检查。

2.2.1.2 强制降解试验

按照“2.1.2”项下供试品溶液的配置浓度，分别按要求配置酸破坏供试品溶液、碱破坏供试品溶液、氧化破坏供试品溶液、高温破坏供试品溶液、光照破坏溶液，进行测定，结果见表1。

表1 强制降解试验结果

试验结果表明，本品在氧化条件下杂质个数及杂质含量增加明显，说明本品在氧化条件下有明显的降解，其他降解条件下均较稳定；在DAD作检测的条件下，本品经酸、碱、氧化、高温、光照降解试验，主峰的纯度角均小于纯度阈值，表明主峰内不包含降解产物峰，各个降解条件下峰纯度符合要求，主峰与降解产物峰的分离度以及各降解杂质峰间的分离度均符合要求，表明本品有关物质检查方法专属性良好。

2.2.1.3 检测限与定量限

精密称取二甲氨基氯乙烷盐酸适量，加溶剂溶解并稀释至信噪比约为10∶1，作为定量限溶液，连续进样6针；精密称取二甲氨基氯乙烷盐酸适量，加溶剂溶解并稀释至信噪比约为3∶1，作为检测限溶液，连续进样3针，分别精密量取各20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表2。

表2 定量限与检测限试验结果

由试验结果可知，定量限溶液连续进样6次，信噪比平均值为10，表明在本色谱条件下二甲氨基氯乙烷盐酸的定量限为0.03μg。检测限溶液连续进样3次，信噪比平均值为3，表明该在本色谱条件下二甲氨基氯乙烷盐酸的检测限为0.02μg。

2.2.1.4 线性与范围

按照“2.1”项下分析方法进行测定，记录色谱图。以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归。结果见表3。

表3 线性关系试验结果

结果表明，二甲氨基氯乙烷盐酸在8.00μg/mL～28.00μg/mL，其浓度与峰面积成良好的线性关系，相关系数为0.997。

2.2.1.5 系统精密度试验

精密量取对照溶液20μL，注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图，结果见表4。

表4 系统精密度试验结果

结果表明，连续进样6针，二甲氨基氯乙烷盐酸保留时间的RSD为0.05%，主峰峰面积的RSD为2.30%，表明本品有关物质检查方法的系统精密度良好。

2.2.1.6 中间精密度试验

由不同人员在不同时间、不同仪器，分别进行重复性试验，按自身对照法进行计算，不同人员在不同时间、不同仪器上检出的杂质个数一致。

2.2.1.7 耐用性试验

为考察本方法对条件发生微小变化的耐受程度，分别调节流速为0.7与0.9 mL·min-1、柱温25℃与35℃、波长204与206nm、乙酸铵浓度0.0095与0.0105 mol·L-1、流动相比例乙酸铵-乙腈(14-86)与(16-84)进行考察，分别精密量取对照溶液、供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。试验结果表明杂质个数和杂质含量基本一致，本方法耐用性良好。

2.2.1.8 本品有关物质测定

取本品3批，按照“2.1.2”项下供试品配制方法，按照“2.1.1”项下进行测定，结果见表5。

表5 二甲氨基氯乙烷盐酸有关物质测定结果

结果表明，3批二甲氨基氯乙烷盐酸有关物质检测结果均符合要求。

3 讨论

目前文献鲜有报道二甲氨基氯乙烷盐酸的有关物质检测，本文从医药中间体质量控制的实际需求出发，建立了高效液相色谱法测定二甲氨基氯乙烷盐酸有关物质的方法，通过方法学试验，验证表明该方法可用于二甲氨基氯乙烷盐酸有关物质检查，为本品质量控制奠定了基础。