含银离子宠物香波的抑菌实验探讨

陈榆

（福建晶华生物科技有限公司，福建 福州 350105）

1 前言

随着宠物进入千家万户，宠物香波的用量也日益增加，宠物由于自身的厚实毛发及生活习惯很容易滋生各种细菌，有时还会携带病毒，这些细菌和病毒不仅会危害宠物的健康生长，甚至还会引起人畜疾病交叉传播和感染。为了达到消毒的目的，传统的做法是采用宠物杀虫剂对宠物的毛皮进行喷晒或清理，但这样去除效果不佳而且还会损伤宠物的皮毛。基于宠物毛皮细菌的特点，新型功能型的宠物香波在传统洗浴清洁作用的基础上，把抑菌剂融入浴液之中，达到抑菌与洗涤的双重效果。本文依据银离子的抑菌作用，就加入银离子抑菌剂宠物香波的抑菌效果进行了实验探讨。

2 实验

2.1 实验材料

宠物香波（福建省轻工业研究所研制，福建晶华生物科技有限公司生产）；

银离子抑菌剂：浅黄色液体，银离子含量1 g/kg，生产用量0.2%（质量分数），广东迪美生物技术有限公司提供。

2.2 实验设备

超净工作台、恒温培养箱、恒温水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液枪、试管等。

2.3 试剂和菌种

2.3.1 试剂

0.03 mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）；营养琼脂培养基；沙氏琼脂培养基。

2.3.2 菌种

大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538、白色念珠菌ATCC10231：厦门大学生命与科学学院环境与应用微生物研究所提供。

2.4 实验步骤

2.4.1 用PBS液将大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌各标准菌分别做适当稀释作为实验菌，要求浓度：0.1 mL滴于5 mL对照样液（PBS）内，回收菌数在1×104～9×104CFU/mL。

2.4.2 将宠物香波取出5 mL 12支分别编号放入灭菌试管中(20±1)℃恒温5 min；

2.4.3 吸取各实验菌种0.1 mL加入到5 mL样品的已编号试管中，迅速混匀，分别按5、10、15、20 min时间作用，并立即计时，时间到各取实验菌种与样品的混合液0.5 mL加入到4.5 mL经灭菌的PBS试管中，充分混匀。

2.4.4 放置10 min后，分别吸取液1 mL置于灭菌平皿内，每个样液接种2个皿，分别用恒温40～45 ℃的营养琼脂（大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌）、沙氏琼脂培养基（白色念珠菌）15 mL做培养基，转动平皿使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平皿，在(35±2)℃培养48 h（大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌）和72 h(白色念珠菌)，做活菌菌落计数。

2.4.5 每组以PBS代替实验样品，按以上步骤操作作为空白对照。

2.4.6 实验重复3次，求其平均值算出抑菌率(%)。

2.4.7 计算公式

其中：

Ⅰ——对照组平均菌落数，CFU／mL

Ⅱ——实验组平均菌落数，CFU／mL

3 结果分析与讨论

3.1 结果分析

抑菌效果评价：抑菌率≥50%有抑菌作用；抑菌率≥90%有较强抑菌作用。

3.1.1 宠物香波对大肠埃希氏菌在不同时间的抑菌率见表1。

表1 银离子对大肠埃希氏菌的抑菌实验效果

3.1.2 宠物香波对金黄色葡萄球菌在不同时间的抑菌率见表2。

表2 银离子对金黄色葡萄球菌的抑菌实验效果

3.1.3 宠物香波对白色念珠菌在不同时间的抑菌率见表3。

表3 银离子对白色念珠菌的抑菌实验效果

3.1.4 该宠物香波与大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌在混合作用5 min后都显示出一定的抑菌效果，20 min后对3种实验菌抑菌率均＞99%，其中不同时间抑菌率各不相同，抑菌率,随着时间的延长而提高，趋势图如图1曲线所示，作用时间（min）与抑菌率（%）成正相关，可以看出对大肠埃希氏菌（1线）的抑菌过程比金黄色葡萄球菌(3线)和白色念珠菌(2线)较快起作用。

图1 各实验菌的抑菌率与时间的关系

3.2 讨论

采用含银离子抑菌剂的宠物香波对革兰氏阴性代表菌——大肠埃希氏菌、革兰氏阳性代表菌——金黄色葡萄球菌以及白色念珠菌进行了抑菌实验，结果表明该宠物香波在不同时间对这3种实验菌均有较强的抑菌作用，并且抑菌作用在20 min时抑菌率均达99%以上，说明该宠物香波成分中银离子具有良好的抑菌能力。

抑菌主要因为Ag＋带着活性极强的正电荷阳离子，而细菌的细胞壁和细胞膜由磷脂质双分子膜组成，带负电荷，依靠库仑引力二者产生电吸附作用而牢固结合，导致银离子穿透细胞膜进入细胞内。由于Ag＋与蛋白质有较强的亲和性，能与细菌蛋白质上的硫氨基（-SH）发生化学反应，造成蛋白质凝固形成不可逆的硫银化合物，使细菌合成酶的活性遭到破坏，从而干扰细菌DNA、RNA的合成以及DNA模板转录mRNA等，使细菌丧失分裂增殖能力而死亡。另外Ag＋未饱和的配位能力与菌体表面的N或O作用，凝固核酸，使DNA分子上的化学键断裂，破坏菌体表面活性结构，从而使菌体因生理变化或活动受阻死亡。正是银离子具有非常高的生物活性，一定浓度的银离子就能对病菌、真菌等均有良好的抑制作用。

4 结论

银离子的抑菌能力很强，但对人畜无任何伤害，是一种广谱抑菌剂，有研究表明银离子能消灭多种敏感细菌，并且少量的银离子就有很好的抑菌效果，是目前广泛使用的抑菌材料，具有广谱杀菌、无毒无味、无刺激、无污染、无任何交叉药物感染、不产生耐药性的特点。在宠物香波中加入银离子抑菌剂不但能够高效去污、柔软皮毛，而且能起抑制细菌的作用，达到抑菌与洗涤清洁的二合一，在市场上具有广阔的应用前景。