消毒剂中乙醇含量的测定

李 蕊，张金鹏，王东兴，周 杨

(1.天津市工业微生物研究所有限公司 天津300462；2.天津实发中科百奥工业生物技术有限公司 天津300462；3.天津市工业微生物工程技术中心 天津300462；4.天津市工业微生物企业重点实验室 天津300462；5.天津量信检验认证技术有限公司 天津300462)

乙醇作为常用消毒剂被广泛使用，75%乙醇可以有效杀灭病毒，特别是新型冠状病毒肺炎疫情期间，乙醇消毒剂成了大家抢购的目标。但必须指出，最适于消灭病毒的是 75%的医用酒精，浓度过高或过低都无法有效杀灭病毒。因此，评价消毒剂是否有效的一个重要指标就是乙醇的含量。

为测定乙醇消毒剂有效成分含量，本试验采用气相色谱仪通过内标法建立消毒产品中乙醇含量测定方法。由于内标法具有消除基质效应，弥补进样量波动影响等特点，可提高测定方法的灵敏度和准确性，较之《消毒技术规范》2002版中的外标法更为灵敏、准确、重复性好。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器

Thermo TRACE1300气相色谱仪，具有氢火焰离子化检测器(FID)。

1.1.2 试剂

乙醇标准物质，浓度 99.9%，购自北京曼哈格生物科技有限公司。

正丁醇标准物质，浓度 99.9%，购自北京曼哈格生物科技有限公司。

1.2 色谱条件

色谱柱型号规格：TR-FFAP 30m×0.32mm×0.25μm。

进样口温度 190℃，分流比 50∶1。柱流速1.5mL/min；柱温 50℃保持 7min，10℃/min升温至110℃，保持2min。

检测器(FID)温度220℃，进样量0.5μL。

1.3 试验方法

1.3.1 标准溶液配制

乙醇系列标准工作液：分别吸取 0.25、0.5、0.75、1.25、2.5、5.0mL乙醇标准溶液，置于 6个 25mL容量瓶中，用纯水定容至刻度，依次配制成乙醇浓度(V/V)为 0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、1.0%、2.0%系列标准溶液，现配现用。

1.3.2 标准曲线的制作

分别吸取10.0mL乙醇系列标准工作液置于5个试管中，然后加入 50μL正丁醇标准溶液并混匀，测定乙醇和内标正丁醇色谱峰面积，以乙醇系列标准工作液的浓度为横坐标，以乙醇和正丁醇色谱峰面积的比值为纵坐标，绘制标准曲线。乙醇及内标正丁醇的气相色谱图见图1。

图1 色谱图Fig.1 Chromatogram

1.3.3 试样前处理

以乙醇为主要消毒成分的消毒剂，经适当稀释后混匀。吸取稀释后试样 10.0mL于试管中，加入50μL正丁醇标准溶液，混匀，备用。

1.3.4 试样溶液的测定

将制备的试样溶液注入气相色谱仪中，以保留时间定性，同时记录乙醇和正丁醇色谱峰面积的比值，根据标准曲线得到待测液中乙醇的浓度。

1.3.5 计算结果

样品中乙醇浓度(%，V/V)＝待测液中乙醇浓度×稀释倍数(1，50或100)。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件

经测定显示，乙醇和内标正丁醇可达到基线分离，其分离度满足试验要求。

2.2 标准曲线线性范围及相关系数

本方法标准曲线的线性范围是 0.1%～2.0%，标准曲线线性关系良好，其决定系数 R2＝0.9998，具体数据见表1。

表1 乙醇含量测定标准曲线Tab.1 Standard curve for determination of ethanol content

2.3 检出限

本方法乙醇检出限为 0.1%。满足《消毒技术规范》2002版中的检测要求。当进样浓度为 0.1%时，基线信噪比(S/N)＞3。

2.4 回收率试验

取1份已测出乙醇浓度的样品，加入3个浓度的标准溶液，每个浓度重复测定 2次，计算样品加标回收率，结果见表 2。本方法 3种浓度的回收率在97.4%～103.7%范围内。

表2 回收率的测定Tab.2 Determination of recovery rate

2.5 精密度试验

取同一含乙醇消毒剂样品，分别用内标法和外标法重复测定 6次，用相对标准偏差(RSD)表示，结果见表3。结果表明，本方法(内标法)的RSD小于国标法(外标法)的 RSD。本方法具有较好的精密度，可满足实际的样品测定。

表3 精密度的测定Tab.3 Determination of precision

3 结 论

本方法采用气相色谱仪通过内标法测定消毒剂中乙醇含量，内标与待测物质具有很好的分离度，操作简便，检出限 0.1%，回收率 97.4%～103.7%，相对标准偏差＜2%。其结果稳定准确且灵敏度高，适用于消毒剂中乙醇含量的测定。