血清ChE、PTX-3和IL-27检测对脓毒症的诊断价值*

王书涛，金 海△,丁 箭

(1.南京医科大学附属江宁医院/江苏省南京市江宁医院急诊科,江苏南京 211100;2.河北省邯郸市第一医院急诊内科，河北邯郸 056000)

脓毒症是由全身感染引起，伴器官衰竭，最终引起患者死亡的临床综合征[1]。报道称,脓毒症患者的病死率为25%～30%[2]。脓毒症可使炎性细胞因子调节机体免疫反应，继而对组织或器官造成损害。胆碱酯酶(ChE)作为一种水解乙酰胆碱酶，其活性的改变与机体新出现的炎性反应相关[3]。研究表明，血清ChE水平在机体感染、肿瘤患者中降低[4]。穿透素-3(PTX-3)是五聚蛋白超家族的成员，PTX-3水平可在各种感染中迅速增加，并通过激活经典补体途径促进巨噬细胞、树突状细胞识别，在炎症早期发挥重要作用[5]。白细胞介素(IL)-27是由抗原呈递细胞产生，其可刺激单核细胞产生多种促炎细胞因子，如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[6]。有报道称，IL-27参与许多人类炎症性疾病的发病机制，如结肠炎[7]。因此，本文旨在分析血清ChE、PTX-3、IL-27联合检测对脓毒症的诊断和预后评估价值，为其在临床中的应用提供实验基础。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取南京市江宁医院急诊科2015年1月至2017年12月收治的脓毒症患者70例作为脓毒症组。按照患者病情的严重程度又分为非严重脓毒症组(30例)、严重脓毒症组(20例)、脓毒性休克组(20例)；其中男42例，女28例；年龄25～73岁，平均(56.85±8.69)岁。纳入标准：(1)符合2012年国际脓毒症会议发布的脓毒症诊断标准[8]；(2)入院前未服用任何药物；(3)无疾病终末期导致的多器官功能障碍综合征。排除标准：(1)各种恶性肿瘤；(2)肝、肾等重要器官功能不全；(3)造血及免疫系统等疾病；(4)精神及神经系统疾病；(5)处于妊娠及哺乳期。另选健康体检者50例作为对照组，其中男30例，女20例；年龄28～71岁，平均(53.42±5.62)岁。各组受试者的年龄、性别比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本次研究已获得南京市江宁医院医学伦理委员会的批准，所有研究对象均签署了知情同意书。

1.2方法

1.2.1血清ChE、PTX-3和IL-27检测 所有脓毒症患者均在入院时抽取静脉血5 mL，置于抗凝管中，3 000 r/min离心10 min，分离血浆。应用全自动生化分析仪，采用速率比色法检测ChE，ChE试剂盒购自北京利德曼生化技术有限公司；血清PTX-3和IL-27检测采用酶联免疫吸附试验(ELlSA)法检测，PTX-3试剂盒购自美国R&D公司，IL-27试剂盒购自南京建成生物科技有限公司。所有操作均参照试剂盒说明书完成。对照组的方法同上，同时检测两组受试者C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。

1.2.2脓毒症患者短期生存预后观察 于入院后2周统计脓毒症(严重脓毒症+脓毒性休克)患者的生存情况，并根据患者的存活状况分为死亡组、存活组，对其血清ChE、PTX-3和IL-27水平进行相应的分析。

2 结 果

2.1脓毒症组与对照组血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较 脓毒症组血清ChE水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；脓毒症组血清PTX-3、IL-27水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 脓毒症组与对照组血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较

2.2脓毒症各亚组血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较 脓毒性休克组血清ChE水平低于严重脓毒症组和非严重脓毒症组，差异有统计学意义(P<0.05)；脓毒性休克组血清PTX-3、IL-27水平高于严重脓毒症组和非严重脓毒症组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 脓毒症各亚组血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较

2.3脓毒症死亡组和存活组血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较 脓毒症(严重脓毒症+脓毒性休克)40例患者中死亡18例，存活22例。死亡组血清ChE水平低于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)；死亡组PTX-3、IL-27水平高于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 脓毒症死亡组和存活组患者血清ChE、PTX-3、IL-27水平比较

2.4影响脓毒症发生的多因素Logistic回归分析 多因素Logistic回归分析结果显示，血清CRP、PCT、PTX-3、IL-27水平升高和血清ChE水平降低是脓毒症发生的独立危险因素，见表4。

表4 影响脓毒症发生的多因素Logistic回归分析

2.5血清ChE、PTX-3、IL-27对脓毒症的诊断价值 血清ChE诊断脓毒症的曲线下面积为0.801，灵敏度和特异度分别为77.1%和62.5%；血清PTX-3曲线下面积为0.805，灵敏度和特异度分别为74.3%和75.0%；血清IL-27曲线下面积为0.745，灵敏度和特异度分别为65.7%和76.2%；血清ChE、PTX-3、IL-27联合检测曲线下面积为0.910，灵敏度和特异度分别为85.7%和81.2%，见图1、表5。

图1 血清ChE、PTX-3、IL-27诊断脓毒症的ROC曲线

表5 血清ChE、PTX-3、IL-27对脓毒症的预测价值分析

3 讨 论

脓毒症是一种由病毒、真菌、细菌、寄生虫等病原体感染或可疑的感染灶所引发的全身炎症反应综合征，其常伴随着机体免疫、内分泌、代谢反应的失调和凝血功能障碍。有研究称，脓毒症不仅是一种炎症性疾病，也是一种凝血障碍性疾病，机体的慢性炎症及凝血功能障碍互相影响、互相促进，最终导致脓毒症不断发展[9]。有研究报道，脓毒症、严重脓毒症和脓毒症休克性患者的病死率分别为27%、32%和54%[10]。因此，及时有效地对脓毒症患者进行早期诊断和治疗，对提高患者的生存质量和改善预后有重要意义。

ChE由肝细胞合成，其在血清中的半衰期为11 d。机体感染、营养不良、慢性肝损伤及危重症时体内分解代谢明显增加，血清ChE分解明显增多，导致患者血清ChE水平降低。乙酰胆碱对巨噬细胞和免疫系统的其他细胞发挥免疫抑制作用，因为这些细胞表达α7-烟碱型乙酰胆碱受体，从而介导免疫抑制[11-12]。血清丁酰胆碱酯酶(BuChE)和乙酰胆碱酯酶(A-ChE)水平降低可促进未水解的乙酰胆碱介导的免疫抑制[13]。而血清ChE水平下降与机体炎性疾病的恶化程度有关。研究证实血清ChE水平变化是判断脓毒症患者的病情严重程度与生存预后的重要指标[14]。血清IL-27是一种异源二聚体细胞因子，可促进幼稚T细胞向Th1细胞分化进而发生炎性反应，是诊断炎性反应性疾病重要的标志物之一[15]。IL-27能够调节T细胞的活化与分化，具有促炎反应和抗炎反应双重作用，并且在抗感染免疫、抗肿瘤免疫等方面也具有重要作用[16]。同时，有报道称，遗传缺失或可溶性诱饵受体消除IL-27活性后，患有脓毒症的小鼠生存率升高[17]。BOSMANN等[18]研究指出，IL-27在危重症脓毒症患者中具有较高的诊断价值。徐俊兰等[19]也报道称，IL-27水平升高不仅有助于脓毒症诊断，而且是判断脓毒症患者生存预后的有效指标之一。血清PTX-3作为长五聚环亚家族的急性期蛋白，由细胞因子诱导，产生如IL-1、TNF-α和Toll样受体激动剂[20]。PTX-3在炎症过程中，可在各种细胞(如树突细胞、单核细胞、内皮细胞或嗜中性粒细胞)中表达[20]。PTX-3水平变化与机体炎性反应的严重程度呈正相关。HU等[21]研究称，PTX-3水平升高与脓毒症、脓毒性休克患者的生存预后有关。

本研究结果显示，脓毒症组血清ChE水平低于对照组，血清PTX-3、IL-27水平分别高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)；脓毒性休克组血清ChE水平低于严重脓毒症组、非严重脓毒症组，血清PTX-3、IL-27水平分别高于严重脓毒症组、非严重脓毒症组，差异均有统计学意义(P<0.05)；脓毒症死亡组血清ChE水平低于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)；死亡组血清PTX-3、IL-27水平分别高于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)。这说明血清ChE、PTX-3、IL-27水平随着脓毒症患者病情变化而降低或升高，表明血清ChE、PTX-3、IL-27水平对脓毒症患者的诊断、病情进展及预后判断具有一定的价值，与刘亚楠等[22]报道相一致。有研究报道，血清ChE变化可对脓毒症、全身炎症反应综合征等疾病的严重程度及生存预后进行有效评价，患者病情越严重，血清ChE水平下降得越明显[14,23]。多因素Logistic回归分析结果显示，血清PTX-3、IL-27水平升高和血清ChE水平降低是脓毒症发生的独立危险因素。ROC曲线分析显示，血清ChE、PTX-3、IL-27的曲线下面积大于0.5，说明血清ChE、PTX-3、IL-27均对脓毒症患者具有诊断价值；三者联合检测的灵敏度和特异度均高于单独检测，说明血清ChE、PTX-3、IL-27联合检测对脓毒症患者诊断效能更高，与以往报道相一致[10,19]。

综上所述，血清ChE、PTX-3、IL-27水平变化与脓毒症病情的发生、发展有关，三者联合检测对脓毒症的诊断及生存预后评估具有一定价值。