NSE、LEP、β-OHB联合检测对儿童糖尿病酮症酸中毒的诊断价值

王世光

(山东省青岛市黄岛区妇幼保健院检验科，山东青岛 266400)

糖尿病酮症酸中毒是1型糖尿病最常见的急性代谢性并发症，常发生在15岁以下儿童[1]，是1型糖尿病患儿死亡的主要原因[2]。β-羟基丁酸(β-OHB)是在肝脏中产生的酮体，主要来自脂肪酸的氧化，其被输出到外周组织作为能量来源[3]。DANNE等[4]发现，糖尿病酮症酸中毒患儿血清β-OHB的水平急剧升高。瘦素(LEP)参与免疫调节和炎性反应，并在造血、血管生成、骨形成和伤口愈合过程中发挥作用[5]。LI等[6]发现，糖尿病酮症酸中毒患者血清LEP水平较低，且血清LEP水平在治疗后显著升高，推测LEP水平与氧化应激有关。神经元特异性烯醇化酶(NSE)在神经元细胞表面作为纤溶酶原的受体和激活剂，也可以在血管内和细胞周围的纤维蛋白溶解系统中发挥作用[7]。HAMED等[8]发现，血清NSE水平在糖尿病酮症酸中毒患者中升高，并与血糖水平、酮症酸中毒的严重程度相关。基于此，本研究探讨了血清NSE、LEP、β-OHB联合检测对儿童糖尿病酮症酸中毒的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2010年5月至2018年5月本院收治的糖尿病酮症酸中毒患儿70例为酮症酸中毒组，其中男32例，女38例；年龄5～13岁，平均(9.1±4.2)岁。纳入糖尿病患儿(均排除酮症酸中毒)70例为糖尿病组，其中男34例，女36例；年龄6～14岁，平均(9.7±3.9)岁。糖尿病酮症酸中毒根据高血糖、酸中毒和酮症进行诊断：(1)血糖大于11 mmol/L(200 mg/dL)；(2)静脉血pH值小于7.3或碳酸氢盐小于15 mmol/L；(3)血钾超过31 mg/dL(>0.3 mmol/L)或血丙酮超过80 mg/dL。排除标准：(1)严重心、肝、肾功能损害者；(2)长期使用类固醇激素及免疫抑制剂者；(3)患有精神疾病者。纳入同期本院健康体检儿童70例为对照组，其中男35例，女35例；年龄5～14岁，平均(9.3±3.5)岁。各组一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有研究对象的家属均签署知情同意书。

1.2方法 采集3组研究对象的肘前静脉血6 mL进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。NSE ELISA试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司[货号：JK-(a)-1746]。LEP ELISA试剂盒购自上海群己生物科技有限公司(货号：KA3080)。β-OHB ELISA试剂盒购自上海机纯实业有限公司(货号：JC-A5851)。根据相应操作说明检测3组研究对象血清NSE、LEP、β-OHB水平。

2 结 果

2.13组研究对象血清NSE、LEP、β-OHB水平比较 糖尿病酮症酸中毒患儿血清NSE、β-OHB水平高于糖尿病患儿和健康体检儿童(P<0.05)，血清LEP水平低于糖尿病患儿和健康体检儿童(P<0.05)。糖尿病患儿血清NSE、β-OHB水平高于健康体检儿童(P<0.05)，血清LEP水平低于健康体检儿童(P<0.05)。见表1。

表1 3组研究对象血清NSE、LEP、β-OHB水平比较

2.23项指标在糖尿病酮症酸中毒患儿和糖尿病患儿中的诊断效能 为了评估血清NSE、LEP、β-OHB在糖尿病酮症酸中毒患儿和糖尿病患儿中的诊断价值，本研究绘制了ROC曲线。见图1和表2。

表2 3项指标在糖尿病酮症酸中毒患儿和糖尿病患儿中的诊断效能

图1 糖尿病酮症酸中毒患儿和糖尿病患儿血清NSE、LEP、β-OHB的ROC曲线

2.33项指标在糖尿病酮症酸中毒患儿和健康体检儿童中的诊断效能 见图2和表3。

表3 3项指标在糖尿病酮症酸中毒患儿和健康体检儿童中的诊断效能

图2 糖尿病酮症酸中毒患儿和健康体检儿童血清NSE、LEP、β-OHB的ROC曲线

2.43项指标联合检测诊断糖尿病酮症酸中毒的价值 将患有糖尿病酮症酸中毒列为真阳性，未患糖尿病酮症酸中毒列为真阴性。以NSE的临界值(14.000 μg/L)、LEP的临界值(4.264 μg/L)、β-OHB的临界值(1.790 mmol/L)为诊断界值，全满足时诊断为阳性，进行联合诊断。血清NSE、LEP联合检测诊断儿童糖尿病酮症酸中毒的灵敏度为92.34%，特异度为92.18%。血清LEP、β-OHB联合检测的灵敏度为91.85%，特异度为92.01%。血清NSE、β-OHB联合检测的灵敏度为91.29%，特异度为89.42%。3项指标联合检测的灵敏度为92.85%，特异度为93.57%。见图3及表4。

图3 3项指标联合检测的ROC曲线

表4 联合检测的诊断效能

3 讨 论

糖尿病酮症酸中毒是在高血糖情况下发生的代谢失衡，其特征是存在代谢性酸中毒和血中酮体堆积[9-10]。糖尿病酮症酸中毒也是一种威胁生命的疾病[11]。因此，早诊断、早治疗尤为重要。本研究发现，血清NSE、LEP、β-OHB联合检测诊断儿童糖尿病酮症酸中毒的灵敏度为92.85%，特异度为93.57%，高于任意两项指标联合检测的灵敏度与特异度。

检测血液和脑脊髓液中的NSE水平，可以评估脑损伤[12]。NSE存在于神经元和神经内分泌组织中，并且在这些细胞死亡后其水平在血液循环中升高[13]。本研究中发现，糖尿病酮症酸中毒患儿血清NSE水平高于糖尿病患儿和健康体检儿童(P<0.05)。一项研究表明，NSE的过度表达反映了大脑存在创伤性损伤、缺氧缺血性损伤[14]。脑水肿是1型糖尿病酮症酸中毒患儿最常见的并发症和死亡的主要原因。血清NSE水平升高可能是预测糖尿病酮症酸中毒并发脑水肿的潜在标志。血清NSE鉴别诊断儿童糖尿病酮症酸中毒和儿童糖尿病，以及儿童糖尿病酮症酸中毒和健康儿童的灵敏度分别为93.00%、93.00%，特异度分别为81.00%、93.00%。

本研究发现，糖尿病酮症酸中毒患儿血清β-OHB水平高于糖尿病患儿和健康体检儿童(P<0.05)。糖尿病酮症酸中毒患儿的葡萄糖利用受损，导致肝脏和肾脏产生的葡萄糖增加，因局部胰岛素缺乏引起高血糖[15]。胰高血糖素、儿茶酚胺、皮质醇和生长激素的增加导致脂肪和蛋白质的分解代谢加速[16]。脂肪分解作用导致酮体，尤其是β-OHB的产生增加[17]。血清β-OHB鉴别诊断儿童糖尿病酮症酸中毒和儿童糖尿病，以及儿童糖尿病酮症酸中毒和健康儿童的灵敏度分别为90.00%、93.00%，特异度分别为93.00%、93.00%，显示了较好的诊断效能。

在糖尿病酮症酸中毒条件下，LEP水平降低导致促肾上腺皮质激素释放因子/促肾上腺皮质激素和皮质酮水平增加，促进糖原、酮体生成，这也加重了糖尿病酮症酸中毒的代谢异常[18]。本研究发现，糖尿病酮症酸中毒患儿血清中LEP水平低于糖尿病患儿和健康体检儿童(P<0.05)。尽管目前对糖尿病酮症酸中毒患儿LEP的研究较少，但是胰岛素明显缺乏的老年糖尿病酮症酸中毒患者经过胰岛素治疗后，糖尿病酮症酸中毒症状缓解，血清LEP水平显著增加[6]。这提示胰岛素可通过刺激基因的转录活性，增加基因表达来调节LEP水平。血清LEP鉴别诊断儿童糖尿病酮症酸中毒和儿童糖尿病，以及儿童糖尿病酮症酸中毒和健康儿童的灵敏度分别为91.00%、93.00%，特异度分别为91.00%、84.00%。

4 结 论

综上所述，血清NSE、LEP、β-OHB联合检测可用于儿童糖尿病酮症酸中毒的诊断。