复发性流产患者抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白Ι抗体、抗核抗体表达及意义

何媛

（江西省九江学院附属医院检验科，九江 332000）

复发性流产是妇产科常见的一种疾病,按照我国2016年最新诊断标准定义为妇女与同一伴侣妊娠后3次或以上妊娠28周前胎儿丢失[1]。由于其预后较差,严重影响患者心理健康和加重家庭负担。复发性流产的病因包括免疫、遗传疾病、内分泌、感染、子宫解剖及男性配偶、血栓前状态等因素，其中最主要影响因素是免疫方面[2]。患者免疫异常常伴随一些自身抗体的检出，如ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA等。本研究通过检测复发性流产患者体内 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 表达水平，探讨三者与复发性流产的关系，为临床提供指导。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选择2015年1月-2019年10月在我院妇科、产科门诊及住院的复发性流产患者146例，年龄 22-39 岁，平均年龄（29±3.2）岁，均符合2016年我国《复发性流产诊治的专家共识》中定义标准[1]，且排除生殖解剖异常、生殖道感染、内分泌激素异常和遗传因素引起的流产，夫妇外周血染色体正常。健康对照组为我院同期正常孕妇，年龄20-37 岁，平均年龄（28±2.9）岁，检查排除心、肾、肺、肝等器质性疾病和糖尿病、高血压病、各种肿瘤、炎症和自身免疫性疾病等。各组年龄、性别等一般资料差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 所有待测者清晨空腹抽静脉血5ml，血液凝固后以转速3000r/min离心5min，分离出血清。

1.2.2 检测方法 采用酶联免疫吸附法检测IgGACA、β2-GPΙ-Ab，试剂使用德国human公司生产，严格按照操作说明书操作，并绘制标准曲线，计算出浓度。其中IgG-ACA>48 U/ml为阳性，β2-GP Ι-Ab>5 U/ml为阳性。采用间接免疫荧光法检测ANA，使用德国欧蒙公司生产的试剂，严格按照操作说明书进行操作。 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA第一次检测结果为阳性者，2周后再次采样复检，仍为阳性者则确诊 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA为阳性。

1.3 统计学处理 采用SPSS18.0软件对数据进行分析，计数资料以[n（%）]表示，组间比较采用卡方检验；计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组中 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 阳性表达 复发性流产组ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA阳性率分别为33.6%、26.0%、39.0%，均高于健康对照组，且差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 各组中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA阳性数(阳性率)n(%)

2.2 不同流产次数患者中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA阳性表达 复发性流产患者中，流产数＞3次组患者 IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab血清含量水平均比流产3次组患者要高，差异均具有统计学意义（P<0.05）。但两组患者ANA阳性率相比，差异不具有统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2 不同流产次数患者与IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA阳性表达

3 讨论

复发性流产为临床上育龄妇女常见的妊娠并发症之一，在我国，其发生率约为3%[3]。在其众多发病病因中，主要是免疫因素，而免疫因素包括自身免疫因素和同种免疫因素，其中以自身免疫因素更为常见[4]。亦有学者认为，自身免疫异常与生殖失败密切相关，推测复发性流产患者体内可能存在某些潜在因素，导致自身免疫失调，称为“亚临床自身免疫疾病”或“生殖关联自身免疫异常综合症”[5]。自身抗体包括抗磷脂抗体、抗核抗体等。抗磷脂抗体是抗磷脂综合征标志性抗体，它和血栓形成、反复流产等相关，主要包括ACA、β2-GPΙ-Ab、狼疮抗凝物。其中在复发性流产中研究最多的是ACA，其次为β2-GPΙ-Ab。本研究主要分析ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA 三种自身抗体与复发性流产的关系。

ACA是一种具有抗原性的磷脂，其主要靶抗原有β2-GPΙ、凝血酶原、蛋白C、膜联蛋白V及高分子量激肽原等。除了报道表明ACA与女性不孕症密切相关外[6]，近年来研究表明ACA是引起反复流产、死胎等不良妊娠结局最主要的自身抗体。ACA包括IgA、IgG、IgM型或该三型免疫球蛋白的混合物。其中IgG型ACA半衰期长，免疫调理作用强，在免疫应答中发挥主要作用，故本研究中主要是检测IgG型ACA。本研究中，复发性流产组ACA阳性率为33.6%，显著高于健康对照组阳性率，差异具有统计学意义（P<0.05）。陈玉阁[7]报道在发复自然流产患者中ACA阳性率为37.97%，而对照组阳性率为3.84%。而王筱[8]检测复发性流产患者ACA阳性率为12.5%，和对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。可见ACA阳性率在复发性流产患者中有一定差异。此外，本研究还发现复发性流产患者流产次数>3次组ACA水平含量高于流产三次组，这和何全利[9]等报道相符。故推测ACA与复发性流产相关。关于ACA导致流产的机制，可能为ACA可诱导血小板聚集和粘附，形成微血栓和血管收缩，引起胎盘血流量减少和胎儿缺氧，最终导致流产；还可能为ACA作用于滋养层表面的磷脂依赖抗原，导致合体滋养层细胞形成不足，从而使子宫难于接受胚胎，减少维持妊娠的胎盘激素如人绒毛膜促性腺激素、胎盘生乳素分泌。

β2-GPΙ-Ab是一种糖蛋白，由细胞产生。其作为抗心磷脂抗体和磷脂结合的辅助因子在抗磷脂综合征中起重要作用[10]。有研究认为，β2-GPΙ-Ab比ACA更具有特异性，是抗磷脂综合征患者复发性流产的独立危险因素[11]。Betts NA[12]等实验证明β2-GPΙ-Ab能抑制内源性凝集通路和血小板凝血酶原酶活性，导致血栓，引发流产。还有研究认为β2-GPΙ-Ab可通过损伤滋养细胞，形成血栓，干扰受精卵着床，导致流产[13]。陈华干[14]等研究发现复发性流产人群β2-GPΙ-Ab阳性率高于正常人群。本研究亦发现复发性流产组β2-GPΙ-Ab阳性率为26.0%，高于健康对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。同时，本研究中复发性流产患者流产次数>3次组β2-GPΙ-Ab水平含量高于流产三次组差异具有统计学意义（P<0.05）。进一步说明β2-GPΙ-Ab可帮助预测复发性流产事件发生。

ANA广义定义是一组以真核细胞的细胞内所有成分（包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等）为靶抗原所检测的自身抗体的总称。是临床自身抗体疾病最常见的筛查指标。本研究中复发性流产组ANA阳性率为39.0%，高于健康对照组的2.7%，差异具有统计学意义（P<0.05）。但发现其阳性率与复发性流产患者的流产次数不相关，这两研究结果和王筱[8]的结果相符。亦有研究报道ANA的出现与下次妊娠中妊娠丢失风险相关[15]。关于ANA导致复发性流产机制，目前认为因复发性流产女性自身免疫功能失调，导致自身抗体的抗原抗体复合物增多，但尚未能诊断为自身免疫性疾病。ANA阳性提示可能发生自身免疫激活，促进免疫复合物沉着于蜕膜血管表面，损伤蜕膜血管，导致早期胎盘发育障碍，引发流产[16]。

综上所述，抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白Ι抗体、抗核抗体与对于复发性流产密切相关。复发性流产患者流产次数越多，抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白Ι抗体含量越高。临床工作中可联合检测抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白Ι抗体和抗核抗体对复发性流产患者进行筛查，帮助医生及早进行干预治疗，提高患者妊娠成功率。