2015～2019年广西北海地区淋球菌耐药结果分析

陈 镇，钟永军，朱邦勇，廖家顺，韦海鹏，苏腾良，林小芳

（1.北海市人民医院，广西 北海 536000；2．广西壮族自治区皮肤病防治研究所，广西 南宁 530007）

淋病是性传播疾病之一，近年来，由于临床上抗生素的滥用和不规则治疗，淋球菌对抗生素的耐药率逐年上升，日趋严重。为了了解本地区淋球菌耐药情况以及淋病治疗方案的有效性，本研究对（2015～2019）年广西北海地区STD门诊患者分离的91株淋球菌进行耐药检测分析，为合理选择抗生素提供依据，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本采集 研究对象为2015年1月至2019年12月北海地区性病门诊患者，有尿频、尿急、尿痛或宫颈炎症等临床症状，泌尿生殖道分泌物培养阳性患者共91例，男83例，女8例，年龄（15～70）岁，平均年龄34.4岁。经鉴定（革兰染色、氧化酶和糖发酵阳性）为奈瑟氏，传代1次，送广西壮族自治区皮肤病防治研究所进行耐药检测。

1.2 抗菌药物与培养基 大观霉素（美国Upjohn公司）、阿奇霉素（中国Sinopharm公司）、头孢曲松（瑞士Roche公司）、头孢克肟（中国Sinopharm公司）、环丙沙星（德国Bayer Lever kussen公司）、青霉素（美国Simith Kline Beecham公司）和四环素（美国Sigma公司）。各种药物的浓度范围：大观霉素（4～64）mg/L，阿奇霉素（0.03～4）mg/L，头孢曲松（0.008～0.5）mg/L，头孢克肟（0.008～0.5）mg/L，环丙沙星（0.015～8）mg/L，青霉素（0.015～4）mg/L，四环素仅测1个浓度为8mg/L，以检测质粒介导的高度耐四环素淋球菌（TRNG）。培养基为GC基础培养基（Oxoid公司）加入10%脱纤维新鲜羊血。

1.3 方法 β内酰胺酶阳性菌株（PPNG）采用纸片酸度定量法测定，让滤纸吸足青霉素溶液（pH值为8.0的0.05mol/L磷酸缓冲液100ml，加0.2g溴甲酚紫和5.0g结晶青霉素）后放于空平皿中，用接种环取（10～20）个淋球菌菌落在滤纸上涂成一小点（直径约为5mm），盖好平皿后，再37℃孵育30min，涂点变黄者为阳性，未变者为阴性。琼脂稀释法测定各种抗菌药物对淋球菌的最小抑菌浓度（MIC）[1]，即先精确称取纯品抗菌药物，溶于合适的溶剂中，用无菌蒸馏水稀释后加到培养基中，配成含系列浓度抗生素的琼脂平皿，将分纯后的淋病奈瑟菌配成107cfu/ml的菌悬液，用多头接种器接种到含不同浓度药物的琼脂平皿上，置36℃，5% CO2培养箱中培养，36h后观察结果，以淋病奈瑟菌不生长的最低药物浓度为MIC。每批实验均以WHO参考菌株（由中国医学科学院皮肤病研究所提供）作为质控菌株。

1.4 结果判定标准 以WHO西太区淋球菌耐药监测项目推荐的标准判断[2]，大观霉素MIC≤64mg/L为敏感，≥128mg/L为耐药；阿奇霉素MIC≤0.5mg/L为敏感，≥1mg/L为耐药；头孢曲松MIC＜0.125mg/L为敏感，≥0.125mg/L为低敏；头孢克肟MIC＜0.25mg/L为敏感，≥0.25mg/L为低敏；环丙沙星MIC≤0.03mg/L为敏感，（0.06～0.5）mg/L为中敏，≥1mg/L为耐药；青霉素MIC≤0.03mg/L为敏感，（0.06～0.5）mg/L为中敏，≥1mg/L为耐药；四环素≥16mg/L为TRNG阳性菌株。

2 结果

2.1 淋球菌耐药情况 详见表1。从性病门诊淋病患者中共收集91株菌株，未发现头孢曲松、头孢克肟和大观霉素的耐药菌株，阿奇霉素的耐药性也比较低（4/91），对环丙沙星和青霉素耐药率分别达到98.90%（90/91）和86.81%（79/91）。

2.2 质粒介导的淋球菌耐药情况 详见表1。PPNG菌株和TRNG菌株阳性菌株数目分别为51株（56.04%）和43株（47.25%）。其中PPNG阳性菌株在5年的监测中，2017年阳性菌株出现一个上升峰值（73.91%），其余年份阳性菌株总体上保持下降趋势。TRNG阳性菌株五年基本保持一个下降的趋势，由2015年的（71.43%）到2018年的（34.48%）再到2019年的（36.84%）。

表1 北海地区2015～2019年淋球菌抗生素的对七种抗生素的敏感性株(%)

3 讨论

淋病是由淋病奈瑟菌感染引起的，淋病若得不到及时有效的治疗，女性患者可能引起宫颈炎、附件炎、盆腔炎等，男性患者可能引起尿道炎、附睾炎、前列腺炎等，进而引起不孕不育。治疗淋病的药物主要是抗生素。

近年来淋病的发病率居高不下，抗生素的错用滥用，尤其是不规范用药易诱导淋球菌对抗生素产生耐药性。淋球菌的耐药性因时间和地区的变化而有所不同。因此世界各地有必要及时监测淋球菌对抗生素的敏感性。

在本地区开展淋球菌耐药监测尚属首次。（2015～2019）年广西北海共检出91株淋球菌，PPNG的检出率是56.04%，低于广西全区总检出率66.82%[3]，远高于南宁地区的29.17%[4]和广州地区的21.43%[5]。本地区检出率由2015年的57.14%到2019年的47.37%，说明本地区PPNG的流行在逐年下降，规范治疗及合理应用抗生素有明显效果。

质粒介导的四环素高度耐药（TRNG）检出率47.25%，低于全区检出率56.29%[3]和南宁地区的59.38%，高于广州地区的24.49%。本地区检出率由2015年的71.43%下降到2019年的36.84%，说明本地区TRNG逐年下降。虽然PPNG和TRNG阳性率总体在下降，说明滥用抗生素和不规则治疗有改善，但总阳性率也有47.25%，规范使用抗生素及规则治疗淋病在临床工作中仍至关重要。在本次监测中青霉素和环丙沙星的耐药率分别为86.81%和98.90%，耐药率极高，故青霉素和环丙沙星不能用于本地区治疗淋病首选药。

头孢曲松是治疗淋病的一线药，本次监测91株菌株，头孢曲松的低敏率为2.20%，低于全区的监测平均水平（3.66%）[3]，同时低于全国平均水平（4.40%）[6]。但近年来，有不少国家报道耐头孢曲松淋球菌株的出现，本地区虽然没有发现耐药病例，但临床上还是要密切监测。同为先锋药物，本次监测的头孢克肟中低敏菌株为2.20%，与头孢曲松可用于临床首选药物治疗淋病，但要规范使用并监测敏感性，及时发现耐药菌株与敏感性是否下降的情况，防止耐头孢类药物的菌株的爆发流行。

本次监测的阿奇霉素耐药率为4.40%，可与头孢曲松或者头孢克肟联合用药，作为临床一线抗生素治疗淋病。本次监测的大观霉素未发现耐药菌株，敏感率达100%。由于国内大部分地区未广泛使用该药，当各地普遍使用该药时，是否会引起耐药菌株大范围流行？相关人员应密切关注大观霉素的敏感性，及时发现耐药菌株。