2018年德州市病毒性腹泻监测分析*

刘季钊 杜蒙育 朱晓萌 韩田田 魏 胤

(济宁医学院公共卫生学院，济宁 272013)

病毒性腹泻又称病毒性胃肠炎，是人类最常见的疾病之一。临床表现基本类似，水样泄泻是其标志性症状，血便和黏液便较为少见，呕吐为其另一常见症状。引起胃肠炎的腹泻病毒主要包括轮状病毒(rotavirus，RV)、诺如病毒(norovirus，NV)、星状病毒(astrovir-us，ASTV)和腺病毒(adenovirus，ADV)等[1-4]。为掌握德州市病毒性腹泻的病原体分布现况及流行特点，给防控工作提供一定的参考依据，本研究对2018年1月-12月本地区病毒性腹泻患者的粪便标本,进行轮状病毒(A组)(RV)、诺如病毒Ⅰ型(NVGⅠ)和诺如病毒Ⅱ型(NVGⅡ)的核酸检测。

1 材料与方法

1.1 材料

本次研究分析的样本来自于2018年1月-12月德州市各监测网络哨点医院急性腹泻患者粪便标本588份。病例定义为:24h内排便3次或3次以上，且粪便性状有改变，呈蛋花样、稀糊样、黏液样及稀水样，排除脓血便，并经常规细菌鉴定为阴性。所采集样本均立即送检，或于-80℃冷藏保存备检。

1.2 方法

1.2.1试剂与仪器 NP968核酸提取仪及核酸提取试剂盒(苏州天隆生物科技有限公司)；轮状病毒(A组)实时荧光PCR检测试剂盒、诺如病毒GⅠ/诺如病毒GⅡ核酸双重实时荧光PCR检测试剂盒及全自动荧光PCR检测仪(北京卓诚惠生生物科技股份有限公司)。

1.2.2病毒核酸的提取 在1.5ml EP管中加入1000μ l PBS缓冲液，随后加入100 μ l上清液或黄豆粒大小的粪便，制成10%粪便悬液，8000r/min离心5min，取200μ l上清液加入核酸提取试剂盒中，具体操作严格遵守使用说明书，提取的核酸置于-80℃保存备用。

1.2.3实时荧光PCR检测 使用轮状病毒及诺如病毒PCR检测试剂盒，将提取的病毒核酸于全自动荧光PCR检测仪上进行反应，试剂配制及反应条件严格遵守使用说明书。

1.3 统计学方法

采用IBM SPSS 20.0版本软件进行卡方检验，取95%CI，即P<0.05为差异有显著性。

2 结果

2.1 总体检出情况

588份腹泻粪便标本中，至少含有一种病毒核酸的标本为172份，包括15份混合感染。总检出阳性率为29.25%(172/588)，其中RV阳性率为18.20%(107/588)，构成比为62.21%(107/172)；NV阳性率为11.05%(65/588)，其中NVGⅠ阳性率为2.21%(13/588)，构成比为7.56%(13/172)；NVGⅡ阳性率为8.84%(52/588)，构成比为30.23%(52/172)。见表1。本年度检测的混合感染率为2.55%(15/588)，占总阳性病例的8.72%(15/172)，RV和NVGⅠ混合感染3份，RV和NVGⅡ混合感染9份，NVGⅠ和NVGⅡ混合感染3份。见表2。

表1 2018年德州市病毒性腹泻标本病原感染构成情况

表2 2018年德州市病毒性腹泻标本双重病原感染构成情况

2.2 年龄分布

腹泻病毒在各年龄组均有检出，588份病毒标本中年龄范围为0.1～91岁。诺如病毒感染中以1～<5岁组的阳性率最高，为18.35%，轮状病毒感染阳性率最高的年龄组是0～<1岁组，为27.10%。总体病毒感染阳性率以0～<1岁组最高，为32.26%,其次为1～<5岁组，阳性率为31.65%；10～<50岁组检出率最低，为14.78%。各年龄组检出阳性率比较，差异有统计学意义(χ2=15.234,P<0.05)。见表3。

表3 2018年德州市病毒性腹泻标本不同年龄组病原检出情况

注:因为存在混合感染，所以合计数不等于2种病原之和。

2.3 时间分布

病毒性腹泻阳性标本在各月均有出现，第一季度阳性率明显高于其他季度，其中2月份阳性率最高，为56.60%，全年8月份阳性率最低，为4.17%。不同病毒各月阳性率有明显的不同。NV病毒无明显季节性，3月份阳性率较高，为22.73%；RV病毒流行高峰期为1～3月，2月份最高，为52.83%，8月份未检出。各月份总体检出阳性率的比较，差异有统计学意义(χ2=86.131,P<0.05)。见表4。

表4 2018年德州市病毒性腹泻标本不同月份病原检出情况

注：因为存在混合感染，所以合计数不等于2种病原之和。

2.4 性别分布

588份腹泻标本中，女性共224例，占38.10%(224/588)，阳性率为28.57%(64/224)，男性364例，占61.90%(364/588)，病毒阳性率为29.67%(108/364)。不同性别患者间阳性率的差异无统计学意义(χ2=0.081,P>0.05)。

2.5 地区分布

在德州市11个辖区之中，病毒性腹泻阳性率最高的3个地区依次是禹城、夏津和陵城，分别为43.48%、42.86%和42.00%；阳性率最低的3个地区依次是乐陵、齐河和武城，分别为6.66%、14.28%和15.00%。轮状病毒感染中，阳性率最高及最低的地区分别是陵城和乐陵，为42.00%和3.33%；而诺如病毒感染阳性率最高的地区是禹城，为23.91%，陵城最低，未检出诺如病毒感染。不同地区总体检出阳性率的比较，差异有统计学意义(χ2=43.723,P<0.05)。见表5。

表5 2018年德州市病毒性腹泻标本不同地区病原检出情况

注：因为存在混合感染，所以合计数不等于2种病原之和。

3 讨论

腹泻病是危害我国儿童健康的常见多发病。每年约60万婴幼儿因腹泻导致严重水电解质紊乱、酸碱失衡[5]。轮状病毒和诺如病毒是引起肠胃炎的两种最常见的腹泻病毒。轮状病毒变异性很强，不同年份、不同地区流行株都有差别，目前没有特效药用于治疗轮状病毒引起的腹泻。自2013年以来，我国突发公共卫生事件中诺如病毒感染导致的暴发疫情呈现逐年上升趋势[6]。 因此,对腹泻病毒的流行情况进行监测，为疫苗的研究以及有针对性的控制轮状或诺如病毒引起的腹泻意义重大。本研究对2018年1月-12月期间报告的胃肠炎聚集性疫情进行回顾性分析，了解疫情流行特征，指导制定更有效的疫情预警和防控措施。德州市地区导致腹泻的病毒中，轮状病毒占62.21%(107/172)，为主要病原。这一结果与国内报道基本一致[6]。阳性率为18.20%(107/588)，结果与德州市相近的石家庄地区2012-2017年学龄前儿童研究结果基本相似[1]。腹泻病毒的感染者主要为<2岁的婴幼儿[6]。本文结果显示德州市2018年中<1岁是腹泻感染的的高发年龄，据资料显示，存在于母乳内的免疫球蛋白，能起到被动免疫的作用，可以增强婴幼儿的免疫力，而超过六个月后的母乳中，分泌性 IgA抗体和特异性IgG抗体含量逐渐减少，同时婴幼儿免疫系统尚未完全发育成熟，缺少对腹泻病毒足够的抵抗能力[7-9]；也有可能是相对年龄较高的人群组感染且出现症状后未引起足够重视，未即时去医院就诊而未被监测到。轮状病毒感染中阳性率最高的人群组是0～<1岁，为27.10%；诺如病毒感染中以1～<5岁的阳性率最高，为18.35%。2018年德州市病毒性腹泻发病高峰出现在每年的1月份至3月份，与相关研究报道基本一致[4]。德州市RV病毒感染有明显的季节性特征，1月至3月是流行高峰期。据有关资料显示，轮状病毒的传播途径除了以粪-口传播途径之外，还与通过飞沫接触呕吐物相关(即空气传播)，并且在20℃左右的气温下活跃。在冬春季节，低温度不但会使轮状病毒的存活时间变长，同时还会减慢分子的热运动，使其沉降速度加快，聚集程度增高，令气溶胶颗粒物浓度高于其他季节，轮状病毒更易凭借气溶胶的途径经呼吸道传播，这使得冬春寒冷季节成为该病毒的发病高峰期。从监测数据检测结果可以看出，病毒性腹泻阳性率存在着显著性差异。有4个辖区阳性率超过40%，依次是禹城、夏津、陵城和德城，而乐陵阳性率远低于平均水平的26.70%，仅有6.66%。腹泻病毒主要以粪-口传播为主[10]，阳性率的高低与当地公共卫生政策、群众卫生意识以及该地区环境卫生条件等方面有着密切关联。

本研究通过对2018年德州市病毒性腹泻监测数据的病原体构成、年龄分布、时间分布及地区分布的系统分析和总结，发现德州市病毒性腹泻散发病例以NVGⅡ型和RVA组感染为主，感染人群以<1岁婴幼儿居多，要提倡母乳喂养并加大冬春季针对婴幼儿和儿童腹泻病毒疫苗的接种或口服减毒活疫苗力度，此外还注意流行季节及聚集地的水源、食物和环境卫生。采取综合性预防措施的同时，还要防止医源性感染。广泛宣传病毒性腹泻的症状和危害，以提高自我保护的意识。本研究由于仅分析了2018年的数据资料，样本量有限，下一步将延长监测时间，从更深层次探索流行特点，为病毒性腹泻的防控提供科学依据。