黛茶生物黏附贴片制备工艺研究*

宋玉桂 付英杰

(济宁医学院药学院，日照 276826)

口腔溃疡是一种发病率较高、易反复发作的口腔疾病。其病因复杂，多为细菌或病毒感染，可发于口腔黏膜的任何部位，如唇、颊、舌缘等[1]。该病的特征为周期性、复发性及自限性等，起病时有强烈疼痛感，影响进食和说话，给患者带来极大的痛苦和不便，尤其是在遇酸、咸、辣的情况下，疼痛感加重[2]。目前该病的治疗方法及治疗药物的种类也复杂多样，其中中药治疗是一种较为普遍的方法，常见的中成药有传统散剂石膏散、青黛散、西瓜霜、冰硼散，以及其他剂型口炎清颗粒、牛黄清胃丸、牛黄解毒片等[3-4]。

本研究选择名老中医宋文山临床验方，以清热药青黛、儿茶、硼砂、冰片、风化硝、人中白和甘草为处方组成，其中两味君药分别是具有清热解毒功效的青黛，常与冰片配伍，以及具有收湿敛疮功效的儿茶，常与硼砂配伍[5]，均为治疗口腔溃疡的药对。方中去除了传统散剂中常用的朱砂、轻粉等重金属矿物药，加入善治牙疳的人中白及缓急止痛的甘草等，使组方更加安全可靠；原方为散剂，为解决散剂入口之后容易顺着唾液流入咽喉等问题，减轻局部症状、促进溃疡愈合，因此，将其制备为具备分散性好、黏附力强、稳定性好、给药部位局部浓度高等特点的生物黏附凝胶剂，可充分体现中药传统与现代技术结合的优势。

1 材料

1.1 仪器

XP204型天平(云南紫真科技有限公司)；UV754N紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；TDP-5型压片机(广州旭朗机械设备有限公司)；YD-1片剂硬度测试仪(天津创兴电子设备制造有限公司)；CS-1脆碎度测试仪(天津市国铭医药设备有限公司)；BJ-4D型崩解仪(南京沃拓仪器设备有限公司)；RC1208D溶出试验仪(上海巴玖实业有限公司)；SHK-III-S循环水式多用真空泵(郑州科泰实验设备有限公司)。

1.2 试剂与试药

明胶(天津市广成化学试剂有限公司，批号：20160315)；黄原胶(化学纯，上海埃彼化学试剂有限公司，批号：20171009)；阿拉伯胶(药用级，天津市大茂化学试剂厂)；羟乙基纤维素(HEC，药用级，青岛优索化学科技有限公司)；羧甲基纤维素钠(CMC,分析纯，天津市巴斯夫化工有限公司)；羟丙基甲基纤维素(HPMC，药用级，杭州普修生物科技有限公司)；低取代羟丙基纤维素(L-HPC,药用级，杭州普修生物科技有限公司)；聚乙二醇(PEG6000，天津市永大化学试剂有限公司)；卡波姆(青岛优索化学科技有限公司)；硬脂酸镁(化学纯，天津市巴斯夫化工有限公司)。

青黛、儿茶、玄明粉、冰片、硼砂、人中白、甘草均购于北京同仁堂日照药店；儿茶素标准品(中国食品药品检定研究院，批号：110877-201604)；靛蓝标准品(中国食品药品检定研究院，批号：110716-201612)。

2 方法

2.1 各药材及辅料处理

冰片、青黛、儿茶、玄明粉分别经乳钵研细，过80目筛；人中白、硼砂水飞后干燥；甘草先用粉碎机粗粉，再用70%乙醇冷浸甘草粗粉24h，70℃回流提取2h，连续回流提取2次后，提取物蒸干得甘草干浸膏[6]，粉碎研细，过80目筛。

阿拉伯胶等生物黏附材料分别经乳钵研细，过80目筛、备用。

2.2 处方筛选及制备工艺

按照处方组成分别称取经处理后药材粉末(青黛20g、儿茶15g、硼砂15g、冰片5g、玄明粉10g、人中白25g、甘草浸膏3g)，等量递加、混合均匀，作为主药。按设计处方分别称取主药、黏附材料、硬脂酸镁适量，等量递加、过筛、混合均匀后，采用粉末直接压片工艺，选择φ8mm浅凹冲头、片重150mg、硬度(60±5)N，进行压片。

2.3 体外黏附时间和崩解时限的测定

按上述压片工艺，取含有不同黏附材料的自制片剂各5片，分别贴放于50ml烧杯的侧壁上，吸取适量的人工唾液(磷酸二氢钾：0.19g；磷酸氢二钠：2.38g；氯化钠：0.8g；蒸馏水:1000mL)[7-8]，滴于药片周围，自然吸附5min；再加适量的37℃人工唾液至完全浸没药片，并置其于37℃恒温水浴中，观察药片的脱落情况，记录体外黏附时间；观察药片的崩解程度，记录溶解程度及完全崩解所需的时间。

2.4 君药(青黛和儿茶)的含量及含量均匀度的测定

参考《中国药典》2015版四部[9]，通则<0931>所规定的检查方法及标准进行测定：取药片于一定量人工唾液的烧杯中并置其于37℃的恒温水浴中，至药片完全崩解时，对其进行取样、过滤，续滤液采用紫外分光光度法[10-11]分别对君药青黛和儿茶中靛蓝及儿茶素的含量进行测定。最后测定含量均匀度：按照最大载药量的配比，取重量为0.15g的药片10片，分别测定每一片以标示量为100的相对含量Xi，求其均值U、标准差S以及标示量与均值之差的绝对值A。

2.5 释放性能和累积释放度曲线的测定

释放性能采用凡士林基质测定法[12-13]：将凡士林溶化后，装入刻度试管中，待其冷凝后，在其表面各贴一片贴片，分别在贴药后1、2、3、4、5、6h取下药片，刮取凡士林，根据青黛固有颜色，计算药物扩散距离。并将刮取的凡士林加水浸提，用2.4项下方法测定其中靛蓝及儿茶素的含量，绘制累积释放度曲线。

3 结果

3.1 黏附材料的筛选

根据文献[14]及预实验，主药、生物黏附材料、硬脂酸镁比为10∶40∶0.25，分别配制混粉50.25g，测定休止角，并压片。PEG、HEC、卡波姆的休止角θ>40°，无法满足生产过程中的流动性需求且有粘冲现象；而含明胶的片剂，口感差，难以接受长时间在口腔中停留。因此，黏附材料可选取阿拉伯胶、CMC、黄原胶、HPMC、L-HPC 5种辅料进行压片。见表1。

表1 主药与不同辅料混合后休止角测定结果

3.2 体外黏附时间、崩解时限测定结果

采用不同生物黏附材料、相应设计处方制备得到的片剂，测定体外黏附时间和崩解时限等。由于黏附材料HPMC和L-HPC黏附时间太短、黏附力太低，无法达到规定黏附时间。因此，选取黄原胶、阿拉伯胶、CMC 3种材料，按照不同处方进一步压片，结果见表3。从黏附时间、溶解程度及崩解时限3个方面综合考虑，优选的生物黏附材料为阿拉伯胶，且主药/辅料比为1∶3。见表2、3。

表2 自制片体外平均黏附时间测定结果

表3 自制片黏附时间、崩解时限测定结果(n=3)

3.3 片剂制备

由于硬脂酸镁加入过多易造成崩解迟缓，而本处方的崩解时间已经非常长，因此仅使用最低量的硬脂酸镁作为润滑剂，即0.3%。以阿拉伯胶为黏附材料优化后处方制备片剂，优化后的处方组成为主药∶阿拉伯胶∶硬脂酸镁(10∶30∶0.12)。压片后测得片剂的硬度、脆碎度、含量均匀度等指标，各指标均满足质量要求。见表4。

表4 优化后自制片硬度等测定结果(n=3)

3.4 标准曲线及含量等测定结果

靛蓝的最大吸收波长为610nm，标准曲线为A=107C+0.109，r=0.9998；儿茶素最大吸收波长为280nm，标准曲线A=104C+0.12，r=0.9996，对照品溶液的吸光度和浓度呈现良好线性关系。依据标准曲线分别测定原药材中(即青黛、儿茶)和自制片剂中儿茶素和靛蓝的含量，并计算含量均匀度。见表5。

表5 君药中有效成分含量、含量均匀度测定结果(n=10)

注：药片的含量均匀度满足A+2.2S≤15的关系，药片的含量均匀度符合药典规定

3.5 释放性能测定结果

片剂具有较好的药物释放性能,并具有缓释作用。见表6。

表6 片剂释放性能测定结果(n=3)

3.6 释药曲线测定结果

采用黏附材料阿拉伯胶制备的片剂，体外释药曲线平缓，无突释，样品(n=3)在2、6h的释放量为标示量的30%以上、60% 以上，符合缓释制剂的基本要求。释放数据用SPSS19.0对其进行释放方程的拟合，释放方程选用Higuchi方程、一级方程、零级方程、Ritger-peppas方程。最终结果显示采用Ritger-peppas方程拟合相关系数最高，方程为：Q=13.834t1.0886，r=0.9981(Q为t时间的儿茶素累计释放率);Q=12.988t1.1223，r=0.9973(Q为t时间的靛蓝累计释放率)；相关性显著，释放参数n>0.89，片剂主要以骨架溶蚀机制进行释放。见图1。

图1 自制片剂l～6h释药曲线的测定

4 结论

黏附材料PEG、HEC、卡波姆无法满足生产过程中的流动性需求而被筛除；黏附剂明胶由于味臭而被筛除；黏附剂HPMC和L-HPC黏附力太低而被筛除。

最终确定优化处方及制备工艺为，原料：青黛20g、儿茶15g、硼砂15g、冰片5g、风化硝10g、人中白25g;辅料：阿拉伯胶270g;润滑剂：硬脂酸镁1.0g。采用等量倍增法混合均匀，采用粉末直接压片法在60N的压力下压制成直径为8mm、厚度为3mm、重为0.15g的圆片，加上药料的损耗，共压制2200片。处方与制备工艺的确定，为以后黛茶贴片的进一步优化提供了基础。

自制片剂的黏附力强，体外黏附时间达720min以上；体外累积溶出时间达6h，呈现出缓释效果，其中两味君药的主要成分儿茶素和靛蓝的释放参数n均大于0.89，表明片剂主要以骨架溶蚀机制进行释放，达到了延长给药时间的目的。