PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的临床研究

陈亥　许梦洁　陈杨芳　许锴

【摘  要】目的：探究PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的临床价值。方法：选取温州市人民医院收治的48例细菌性阴道炎患者，均通过PCR检验法（PCR组）、细菌培养法（细菌培养组）进行检验， 对比两组阳性检出率和细菌检出率。结果：阳性检出率比较，PCR组高于细菌培养组，差异显著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR组加特纳菌、棒状杆菌、肠球菌的细菌检出率，均高于细菌培养组，无显著差异（P>0.05）。结论：在进行阴道细菌检验时，PCR检验法的阳性检出率和细菌检出率比细菌培养法高，值得在临床应用。

【关键词】细菌性阴道炎;阴道细菌检验;PCR检验法;细菌培养法

【中图分类号】R446;R711      【文献标识码】A       【文章编号】1672-3783（2020）01-0038-02

阴道炎属女性常见炎性疾病，由阴道细菌感染所致，发病率较高，病情严重时可造成严重后果，如不孕、异位妊娠、慢性盆腔炎等，危害患者身体健康，影响其正常的生活和工作^[1]。因此，必须予以患者有效的诊断方法，为下一步治疗奠定好基础。基于此，本次研究将以温州市人民影院收治的48例患者为例，均进行PCR检验法和细菌培养法进行阴道细菌检验，报道如下：

1 资料与方法

1.1一般资料

本次研究由温州市人民医院伦理委员会批准，选取在2017年1月～2019年2月期间，我院收治的细菌性阴道炎患者48例，符合临床诊断标准。患者均知情同意参与本次研究，并签署研究知情书其基线资料：（1）年龄：最小年龄28岁，最大年龄46岁，平均年龄（35.68±2.25）岁;（2）病程：最短病程4个月，最长病程20个月，平均病程（12.65±3.67）个月;（3）细菌类型：加特纳菌7例，棒状杆菌16例，肠球菌25例。

1.2方法

在患者阴道后穹窿部，用无菌棉签，采集阴道分泌物，并用生理盐水贮存。

1.2.1PCR组

行PCR检验，首先将贮存阴道分泌物的生理盐水，取出1000μL，放于离心机中，采用12000r/min，时间为15min进行离心分离。取出上清液制成DNA模板，再放入PCR仪进行循环处理，并分析所具有细菌类型。

1.2.2细菌培养组

行细菌培养法，首先将贮存阴道分泌物的生理盐水，均匀涂抹在琼脂培养基上，并放在二氧化碳恒温培养箱内，进行培养，培养时间3d，当菌落长成后，选择光滑、灰色、半透明、“露滴”型的细菌，进行生化检验。采用全自动微生物鉴定仪，鉴别细菌的种类。

1.3观察指标

观察并记录两组阳性检出率，以及细菌检出率。PCR阳性检验标准：1mm以内的条带宽度，整齐条带边缘，无药斑和引物二聚体的背景。细菌培养法阳性诊断标准：长出典型菌落，经生化仪鉴定。

1.4统计学方法

利用SPSS21.0统计学软件，对计数资料进行数据处理，X²检验，率表示，P<0.05，表显著差异。

2 结果

PCR组检出情况：加特纳菌7（14.58%）例，棒状杆菌14（29.17%）例，肠球菌23（47.92%）例。细菌培养组检出情况：加特纳菌5（10.42%）例，棒状杆菌12（25.00%）例，肠球菌20（41.67%）例。PCR組阳性检出率为91.67%（44/48），细菌培养组阳性检出率为77.08%（37/48）。阳性检出率比较，PCR组高于细菌培养组，差异显著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR组加特纳菌、棒状杆菌、肠球菌的细菌检出率，均高于细菌培养组，无显著差异（P>0.05）。

3 讨论

在健康女性的阴道内，寄生菌群处于相对平衡状态，以维持内环境稳态，若出现失衡状况，大量死亡维持细菌平衡的重要细菌，使病菌迅速繁殖，并消耗大量营养物质，导致酸碱平衡紊乱，最终引起细菌性阴道炎的发生^[2]。

细菌培养法是一种检测细菌性阴道炎的方法，操作简单，普遍使用率较高，但应用中细菌培养法却暴露出较多的弊端。如：（1）在操作过程中，对实验室的器皿、无菌环境等要求较高，且检验过程较为复杂，易受到外来因素的影响，造成培养失败;（2）细菌培养时间较长，大都为3d左右，易延误患者病情;（3）在进行检验时，易受到认为因素的影响，使培养失败，延长检验时间^[3]。

而PCR检验法，一种新型的细菌性阴道炎检验方法，不仅具备PCR敏感性，还具有DNA杂交的特异性^[4]。且对环境要求低、样本需求量少，还可当天得出检测结果，为医师提供诊断帮助。PCR具体操作流程为：（1）标准双链DNA在高温条件下，氢键断裂变为单链DNA;（2）单链DNA降温并与引物结合，形成局部双链DNA;（3）在活动最佳状态下，延伸并形成模板互补的DNA链，使引物DNA链增长，突显DNA杂交特异性，提高PCR敏感性。虽PCR检验法具有阳性检出率高，操作简单，检测时间短等特点，但也会存在一定的漏诊率^[5]。因此，在检测期间更应注意：（1）在取样期间，尽量多选取位置，避免对诊断结果带来影响。（2）即使操作简单，也要注意操作手法，以降低人为因素造成的影响。因此，医生需提高自我业务能力和专业素质，提升阳性检出率。

在本次研究的结果显示，PCR组阳性检出率，显著高于细菌培养组，差异显著（X²=3.872，P=0.049）。表明在检验阴道细菌检验时应用PCR检验法比细菌培养检验，阳性检出率高，提供临床诊断帮助，使患者尽早获得对症治疗。另外，PCR组细菌检出率明显高于细菌培养组，进一步说明PCR检验法能够为患者争取更多的治疗时间，有利于患者恢复健康。

综上所述，在阴道细菌检验时，选择PCR检验的阳性检出率高，细菌检出高，能够为临床诊断提供帮助，值得推荐应用。

参考文献

[1]      张婷，徐小婕，李静.阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床价值体会[J].临床检验杂志（电子版），2019（4）：60-61.

[2]      刘秀卿，王革非，李卓成，等.PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用[J].临床检验杂志，2017，35（7）：495-498.

[3]      刘晓琦，杜琼，刘祥琴.阴道分泌物念珠菌感染检测方法对比分析[J].重庆医学，2017， 46（35）：4927-4929.

[4]      李晓青.分析在阴道细菌检验中PCR检验法与细菌培养法的应用价值[J].齐齐哈尔医学院学报，2018（12）：1383-1384.

[5]      李美珠，李炜煊.PCR法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果对比[J].临床检验杂志（电子版），2019，8（1）：162-163.