白细胞群落参数在败血症病人中的临床应用价值

李光友

作者单位：芜湖市第二人民医院检验科，安徽 芜湖241001

败血症是一种由感染引起的全身炎症反应综合征，全球每年报告约3 100万例，死亡率为17%[1-3]。早期诊断和及时治疗对于限制多器官衰竭和改善病人预后具有重要意义[4-5]。然而，由于败血症和非感染性全身性炎症的许多临床症状相互重叠，且微生物感染的证据获得需要时间长，敏感性低，因此很难对其进行早期鉴别诊断[6]。目前广泛用于败血症诊断的生物标志物是C反应蛋白和降钙素原，也均存在一些局限性，如诊断性能不足，费用高等缺陷[7-9]。因此，对败血症的诊断，专家建议多参数联合使用[10]。新一代血液分析仪利用多项创新技术，扩大了全血细胞计数的信息范围，一些新的参数正在成为对多种疾病的诊断和预后判断有用的指标[11]。我们通过对白细胞群落参数（CPD）结果进行分析，以评价CPD参数作为败血症诊断新的生物标志物的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1月至2019年2月芜湖市第二人民医院疑似败血症住院病人91例和20例健康体检为研究对象。败血症组：经血培养阳性，确诊为败血症病人59例，其中，男性31例，年龄范围为47～94岁；女性28例，年龄范围为47～87岁；血培养阴性组：经血培养为阴性的病人32例，男性20例，年龄范围为25～96岁；女性12例，年龄范围为16～88岁；健康组：选择20例健康体检者，男性10例，女性10例，年龄范围为25～77岁。本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求，征得病人或其近亲属同意并签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂 BACT/ALERT 3D全自动血培养仪及配套的血培养瓶及VITEK2全自动微生物分析系统均由法国梅里埃公司提供；日本希森美康公司Sysmex XN9000血细胞分析仪及配套试剂。

1.3 检测方法 血培养在使用抗菌药物之前，严格无菌操作静脉采血。采集EDTA-K2抗凝血2 mL，进行血常规检测。使用Sysmex XN9000检测血常规并一起自动生成CPD参数。所有操作均严格按照操作规程进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0软件进行适当的统计学分析，计量资料采用表示，两组间比较采用t检验；多组间比较采用方差分析。用Medcalc软件进行受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic，ROC）曲线分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CPD参数在不同组别中的比较 在败血症病人中，除了NE-SSC、LY-X、LY-WY、MO-WX、MOWY、MO-WZ外，其它的CPD值均与健康组差异有统计学意义（P＜0.05）。其中NE-FSC、NE-WY、NEWZ、MO-Y、LY-Z、MO-X与血培养阴性组差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 CPD参数在不同组别的比较/

表1 CPD参数在不同组别的比较/

注：CPD为白细胞群落参数，NE-SSC为中性粒细胞细胞复杂性，NE-FSC为中性粒细胞细胞大小，NE-WX为中性粒细胞的复杂性和弥散宽度，NE-WY为中性粒细胞的荧光强度和弥散宽度，NE-WZ为中性粒细胞的细胞大小和弥散宽度，LY-X为淋巴细胞细胞复杂性，LY-Y为淋巴细胞荧光强度，LY-Z为淋巴细胞细胞大小，LY-WX为淋巴细胞的复杂性和弥散宽度，LY-WY为淋巴细胞的荧光强度和弥散宽度，LY-WZ为淋巴细胞的细胞大小和弥散宽度，MO-X为单核细胞细胞复杂性，MO-Y为单核细胞荧光强度，MO-Z为单核细胞细胞大小，MO-WX为单核细胞的复杂性和弥散宽度，MO-WY为单核细胞的荧光强度和弥散宽度，MO-WZ为单核细胞的细胞大小和弥散宽度；与败血症组比较，aP＜0.05

images/BZ_160_1286_752_2240_811.png0.295 0.000 0.048 0.000 0.000 0.603 0.043 0.000 0.000 0.334 0.000 0.000 0.000 0.000 0.487 0.088 0.113例数NE-SSC NE-FSC NE-WX NE-WY NE-WZ LY-X LY-Y LY-Z LY-WX LY-WY LY-WZ MO-X MO-Y MO-Z MO-WX MO-WY MO-WZ 20 154.60±4.20 94.04±5.65a 298.65±14.25a 593.30±25.77a 709.30±24.12a 81.14±1.77 68.43±2.85a 61.63±1.09a 456.10±42.75a 870.00±104.83 616.60±21.62a 120.67±2.05a 116.52±5.57a 71.23±2.39a 264.95±31.59 626.60±99.0 699.30±71.60 32 152.73±4.32 92.94±6.18a 311.06±18.60 643.84±63.79a 753.25±90.17a 80.23±3.32 70.81±6.16 60.57±3.11a 509.21±60.08 896.34±130.68 659.40±54.76 121.95±3.45a 120.05±11.13a 67.54±3.65a 258.34±25.92 710.62±103.78 746.34±100.97 59 152.52±5.86 88.04±5.70 316.50±34.28 760.69±186.79 824.28±89.56 80.57±3.39 73.10±8.90 59.08±2.79 537.38±49.00 922.47±158.15 681.94±99.90 124.66±5.24 131.22±13.12 64.39±5.46 267.98±42.38 697.16±166.5 765.44±142.09 1.23 11.71 3.12 13.60 17.61 0.50 3.21 7.83 8.19 1.10 5.12 8.00 16.80 17.84 0.72 2.47 2.23

2.2 败血症病人CPD参数（NE⁃FSC、NE⁃WY、NE⁃WZ、MO⁃X、MO⁃Y和LY⁃Z）与血培养阴性病人的ROC曲线分析 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的ROC曲线下面积（AUC）、95%CI等结果见表2。

2.3 CPD参数（NE⁃FSC、NE⁃WY、NE⁃WZ、MO⁃X、MO⁃Y和LY⁃Z）对败血症诊断的评价 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值等结果见表3。

3 讨论

固有免疫系统是宿主抵御病原微生物入侵机体的第一道防线，外周血白细胞是该系统的主要组成部分，活化的中性粒细胞和单核细胞具有较强的变形、迁移、黏附、吞噬和释放细胞因子等能力[12-13]。随着全自动血细胞分析仪技术的改进，反映特定细胞详细状态的各种细胞群体数据变得可用。Sysmex XN9000使用流式细胞术来测量单个细胞：以侧散射光反映细胞内的颗粒来进行白细胞分类计数；以前散射光反映细胞体积和形状；独特的表面活性剂及荧光染料可以穿透活化的细胞并结合细胞质和核酸的细胞器来反映细胞核酸/蛋白含量。这些白细胞差异的光学信号在WDF散点图的三个轴上显示，形成CPD参数[14]。CPD参数反应有关中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞的形态学及功能特征的定量信息，可以更详细地研究细胞在各种刺激（如感染）下的形态学发生变化，从而提供有关细胞激活状态的有价值的信息[10]。

表2 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的ROC曲线分析

表3 NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-X、MO-Y和LY-Z的败血症诊断评价

本研究结果显示，NE-FSC、NE-WY、NE-WZ、MO-Y、LY-Z和MO-X在败血症病人变化显著。这些结果表明，败血症的发展可引起造血系统的变化[15-16]，导致外周血白细胞形态及功能特征改变。中性粒细胞和单核细胞的细胞质的复杂性随着败血症的发生而增加。两者的体积在败血症病人中较正常人相比，显得更为不均匀[17]。类似地，核酸的增加对感染刺激，可激活细胞因子的产生[10]。ROC曲线分析显示，NE-FSC、NE-WY、NE-WZ和MO-Y的ROC曲线下面积（AUC）均高于0.7，其中NE-WY的AUC为0.75，与文献报道相近（0.71）[18]，表明这些CPD参数在败血症诊断中具有较高的价值。在最佳Youden指数（Youden指数＝敏感性+特异性-1）时，中性粒细胞相关CPD参数NE-FSC（0.42）、NE-WY（0.39）和 NE-WZ（0.44）具有较好的敏感度，其中NE-WY敏感性为83.05%，与文献相近（86.20%）[19]。本研究结果发现，单核细胞相关CPD参数MO-X和MO-Y在败血症诊断方面具有较好的特异性。考虑到本研究尚存在的缺陷，一方面样本量较少和败血症感染类型选择不全面，从而使得研究结果在某些方面发生一定程度的偏倚；另一方面未能反映CPD参数与败血症严重程度之间的关系。

综上所述，Sysmex XN-9000提供的CPD参数在败血症的诊断方面具有一定的价值。同样值得注意的是，CPD参数不需要额外的血液样本，因为其与血常规参数一起在Sysmex XN-9000上自动生成的，因此便于临床医生对败血症的早期诊治。