注射用奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂的制备工艺优选

晋苗苗

【摘要】目的：优化注射用奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂的制备工艺。方法：以单因素试验法优化注射用奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂的处方工艺，并分析此制剂的稳定性。结果：优选的成型工艺以5%甘露醇溶液为冻干保护剂，而且冻干后的制剂Zeta电位、粒径、药物包封率与冻干前相比无明显变化。结论：在优选的处方和冻干工艺条件下制备注射用奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂稳定可行，可推广应用。

【关键词】奥沙利铂纳米结构脂质载体;冻干制剂;制备工艺

奥沙利铂属于第3代铂类化合物，为临床治疗恶性肿瘤的主要化疗药物，与紫杉醇、吉西他滨、卡培他滨、培美曲塞、氟尿嘧啶等具有良好的协同增强作用。在临床上，奥沙利铂的抗癌谱较为广泛，但药物副作用较大。纳米结构脂质载体为一种新型的静脉给药制剂，可控制药物释放，在不影响药效的同时还可降低毒性[1]。然而，奥沙利铂在溶液中极易被水解，故当奥沙利铂纳米结构脂质载体以水为分散剂的形式储存时，此药的膜材料容易被氧化而影响药物制剂的稳定性，不利于贮存、运输及其治疗应用[2]。鉴于此，笔者所在单位以甘露醇为冻干保护剂，优化制备工艺，将奥沙利铂纳米结构脂质载体制备成冻干制剂，使此药以固态形式贮藏，保障药物的质量，具体过程报道如下。

1 实验仪器和药物

1.1 实验仪器 美国贝克曼Optima MAX-XP台式微量超速冷冻离心机;上海卢湘仪TG16-WS（LCD）台式高速离心机;上海舜制仪器LGJ18-C真空冷冻干燥机;赛多利斯BS110S电子天平。

1.2 实验药物 奥沙利铂;大豆磷脂（供注射用）;蓖麻油聚氧乙烯醚;甘露醇;单硬脂酸甘油酯;无水乙醇;甲醇;中链甘油三酸酯。

2 实验方法和结果

2.1 制备奥沙利铂纳米结构脂质载体[3] 根据处方中各个成分含量要求，称取奥沙利铂、大豆磷脂、单硬脂酸甘油酯、甘油三酸酯，将其放在水中加热熔融，水温维持60～80℃，作为油相。与此同时，称取适量蓖麻油聚氧乙烯醚，添加适量注射用水，加热维持到60～80℃，作为水相。然后，一边搅拌一边将水相液体加入到油相中制作成初乳。经超声细胞粉碎机处理后放在冰水中冷却制作成奥沙利铂纳米结构脂质载体混悬液。

2.2 选择合适的冻干保护剂 取适量奥沙利铂纳米结构脂质载体混悬液，分别在其中加入甘露醇、葡萄糖、蔗糖冻干保护剂，并以不添加保护剂的样本作为阴性对照品。通过观察制剂的外观、再分散时间以判断各种冻干制品对药物的保护作用。结果显示，选用甘露醇作为冻干保护剂制备的冻干产品保护效果最好，其外观致密、光滑，再分散时间为6min，复溶迅速。其余冻干保护剂制得的产品外观萎缩或有气泡，影响药物结构。

2.3 筛选冻干保护剂的用量 选择2%甘露醇、5%甘露醇、10%甘露醇作为冻干保护剂进行实验，观察其制备的冻干产品保护效果（操作方法与“2.2”相同）。结果显示，选择2%甘露醇作为冻干保护剂制备的冻干产品复溶速度虽快，但产品外观出现萎缩;选择10%甘露醇其在冻干制备过程中有“喷瓶”情况，难以复溶，故选择5%甘露醇更为合适。

2.4 筛选冻干体积 量取2ml经2倍超滤浓缩的样品和2ml未经浓缩的样品于10ml西林瓶中，分别添加5%甘露醇，依次放在冷冻干燥机中处理。随后用水复溶，测定药物粒径。结果显示：经超滤浓缩的样本复溶后出现多个杂峰，粒径变宽，更有达到微米级的大粒子存在。因此，奥沙利铂纳米结构脂质载体无需经浓缩处理，可直接进行冻干制备，其产品的粒径符合静脉注射要求。

2.5 明确冻干工艺 根据上述明确的条件以及冷冻干燥制备的基本原理，最终明确冻干制剂制备工艺具体如下：取奥沙利铂纳米结构脂质载体混悬液，添加5%甘露醇，经直径为0.22μm的微孔滤膜过滤除菌，放在冷冻干燥机中先进行预冻处理12h，随后让制剂在真空下自然升温升华，持续10小时，取出制剂加盖密封。

2.6 评价冻干产品的制备效果

2.6.1 冻干产品形态 取适量已制成的奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂，加注射用水复溶稀释，经过滤、染色处理后，自然干燥，在电镜下观察冻干制剂的形态。结果发现，奥沙利铂纳米结构脂质载体未进行冻干处理前的形态结构呈圆形，粒子之间分散均匀，见图1;而经冻干处理后的制剂粒子分散较好，只有少数粒子之间略有黏连，见图2。

2.6.2 冻干制剂的粒径 经测定，奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂复溶后的产品粒径（121.03±18.41）nm，较冻干处理前的（118.56±20.33）nm略有变大，但差异不明显。

2.6.3 冻干制剂的Zeta电位 冻干前的奥沙利铂纳米结构脂质载体的Zeta-15.9mV，冻干处理后的Zeta电位-15.2mV，无显著的差异。

2.6.4 冻干制剂的包封率 未进行冻干前，奥沙利铂纳米结构脂质载体的包封率为70.2%，冻干处理后的包封率68.9%，提示经冻干处理后药物制剂的包封率无明显改变，可满足药物实际需求。

2.6.5 冻干制剂的稳定性 将冻干制剂在常温下保存3个月，结果显示，保存第1个月、2个月、3个月的制剂外观无显著变化，平均粒径依次为（121.21±18.59）nm、（121.95±18.01）nm、（122.03±17.84）nm，包封率依次为68.6%、68.4%、68.3%，提示冻干制剂的稳定性良好。

3 讨论

冻干保护剂，又称为骨架支撑剂，主要是用于维持纳米结构脂质载体的微观结构稳定，使粒子之间不容易出现聚集黏连。甘露醇结构上的羟基可与粒子表面的基团结合形成氢键，其在脱水中能够代替水的作用，阻止粒子聚集，故应用甘露醇作为冻干保护剂可获得外观致密光滑、复溶迅速的制剂。与此同时，本研究經单因素试验后发现，在优选的处方和冻干工艺条件下制备的注射用奥沙利铂纳米结构脂质载体冻干制剂稳定可行，符合制备要求，可推广应用。

参考文献：

[1] 魏晓慧，徐宇虹.脂质体纳米药物的“成分-结构-性质”关系研究[J].中国医药工业杂志，2019，50（10）：1126-1135.

[2] 曾春颖，陆萧筠，梅兴国.奥沙利铂溶液的水解氧化机制及稳定性研究进展[J].中国药学杂志，2013，48（5）：326-330.

[3] 王健昭，李亚楠，熊晔蓉，等.奥沙利铂脂质体的制备及体外释药研究[J].药学研究，2016，35（4）：217-221，225.