宫颈癌组织诱捕受体3在宫颈病变中的表达水平与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性研究

王碧霞 巴静 黄春优

[摘要]目的 探討宫颈癌组织诱捕受体3（DcR3）在宫颈病变中的表达水平与高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染的相关性。方法 回顾性分析2017年1月～2018年6月我院收治的80例宫颈癌及宫颈上皮内瘤病变（CIN）患者临床资料，经病理学分组分为CINⅠ组16例，CINⅡ组24例，CINⅢ组27例及宫颈癌组13例，比较各组DcR3表达水平，分析各组HR-HPV感染阳性检出率及与癌变程度相关性。结果 CINⅠ组HR-HPV阳性检出率为43.75%，CINⅡ组HR-HPV阳性检出率为62.50%，CINⅢ组HR-HPV阳性检出率为88.89%，宫颈癌组HR-HPV阳性检出率92.31%;CINⅠ组DcR3阳性检出率为31.25%，CINⅡ组DcR3阳性检出率为45.83%，CINⅢ组DcR3阳性检出率为66.67%，宫颈癌组DcR3阳性检出率为76.92%。经Spearman分析，CIN严重程度与HR-HPV感染、DcR3表达成正相关（r=0.426、0.324，P<0.05）;且DcR3在宫颈病变中表达水平与HR-HPV感染成正相关（r=0.681，P<0.05）。结论 高危型HPV感染、DcR3表达与宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变成正相关性，即HR-HPV、DcR3阳性率随CIN病变程度升高而升高，且DcR3在宫颈病变中的表达水平与HR-HPV感染成正相关。

[关键词]宫颈癌;宫颈上皮内瘤病变;高危型人乳头瘤病毒

[中图分类号] R737.33          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2020）5（b）-0118-03

Correlation between the expression level of expression of Decoy receptor 3 in cervical lesions and high-risk human papillomavirus infection

WANG Bi-xia   BA Jing   HUANG Chun-you

Department of Obstetrics and Gynecology， Humen Hospital of Dongguan City， Guangdong Province， Dongguan   523900， China

[Abstract] Objective To investigate the correlation between the expression of Decoy receptor 3 （DcR3） in cervical lesions and high-risk human papillomavirus （HR-HPV） infection. Methods The clinical data of 80 patients with cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia （CIN） from January 2017 to June 2018 were retrospectively analyzed. The pathological group was divided into 16 cases of CINⅠ group and 24 cases of CIN Ⅱ group. For example， 27 patients in the CINⅢ group and 13 patients in the cervical cancer group. The expression levels of DcR3 in each group were compared. The positive rate of HR-HPV infection and the correlation with the degree of carcinogenesis were analyzed. Results The positive rate of HR-HPV in CIN Ⅰgroup was 43.75%， the positive rate of HR-HPV in CIN Ⅱgroup was 62.50%， the positive rate of HR-HPV in CIN Ⅲ group was 88.89%. the positive rate of HR-HPV in cervical cancer group was 92.31%. The positive rate of DcR3 in CIN Ⅰgroup was 31.25%， the positive rate of DcR3 in CIN Ⅱgroup was 45.83%， and the positive rate of DcR3 in CIN Ⅲ group was 66.67%， the positive rate of DcR3 was 76.92% in the cervical cancer group. The Spearman analysis showed that the severity of CIN was positively correlated with HR-HPV infection and DcR3 expression（r=0.426， 0.324， P<0.05）; and the expression level of DcR3 in cervical lesions and HR-HPV infection is positively correlated（r=0.426， 0.324， P<0.05）. Conclusion The high-risk HPV infection and DcR3 expression are positively correlated with cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia. The positive rate of HR-HPV and DcR3 increases with the degree of CIN lesion， and the expression level of DcR3 in cervical lesions and HR-HPV infection is positively correlated.

[Key words] Cervical cancer; Cervical intraepithelial neoplasia; High-risk human papillomavirus

宫颈癌是一种常见女性生殖系统恶性肿瘤，其发病率较高且近年来呈年轻化趋势[1]。宫颈癌病变位于机体子宫颈鳞状上皮部位或腺上皮部位，分为鳞癌、腺癌和鳞腺癌，由病毒感染、不健康性生活、多孕多产等引起，可造成患者阴道排液、阴道流血、下肢肿痛、尿频尿急等症状，严重者可出现贫血、恶病质等全身衰竭症状甚至死亡，对女性身心健康及生命健康造成严重影响[2-3]。但宫颈癌癌前病变期对病灶进行切除将不会威胁患者生命安全，故早期诊断和治疗对宫颈癌患者有重要意义。高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）常侵入机体皮肤及黏膜组织，是诱发宫颈上皮内瘤病变（CIN）和宫颈癌的主要病原菌，是宫颈癌的发病与发展中的重要因素，故确定HR-HPV与宫颈癌及宫颈上皮内瘤病变的关系，对宫颈癌筛查及指导治疗有关键作用[4]。本研究采用PCR-反向点杂交法检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变患者HR-HPV阳性表达率，探讨宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变与高危型HPV感染的相关性，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

回顾性分析2017年1月～2018年6月我院收治的80例宫颈癌及CIN患者的临床资料，经过病理学分组分为CINⅠ组16例，CINⅡ组24例，CINⅢ组27例及宫颈癌组13例。CINⅠ组中，年龄25～67岁，平均（43.66±5.03）岁;产次0～3次，平均（1.23±0.28）次;孕次0～6次，平均（3.53±0.21）次。CINⅡ组中，年龄20～68岁，平均（43.09±5.16）岁;产次0～3次，平均（1.26±0.32）次;孕次0～5次，平均（3.49±0.22）次。CINⅢ组中，年龄22～65岁，平均（43.24±5.32）岁;产次0～3次，平均（1.26±0.20）次;孕次0～6次，平均（3.50±0.29）次。宫颈癌组中，年龄22～66岁，平均（43.78±5.02）岁;产次0～3次，平均（1.25±0.22）次;孕次0～6次，平均（3.55±0.33）次。四组的一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2纳入及排除标准

纳入标准：符合《宫颈癌及癌前病变规范化诊疗指南（试行）》[5]中宫颈癌、CIN诊断标准，经宫颈液基细胞学检查确诊;7 d内无阴道用药史者;签署知情同意书。排除标准：心肺、肝肾等重要脏器障碍者;妊娠或哺乳期妇女;宫颈手术史或子宫切除者;有精神、沟通障碍者。

1.3方法

对宫颈癌、CIN患者进行宫颈癌组织诱捕受体3（DcR3）、HR-HPV检测，采用免疫组织化学法检测DcR3蛋白表达，非经期采集患者DNA样本，专用HPV取样器置入宫颈外口，顺时针旋转5周，存入细胞保存液管并放入2～8℃保存，于1周内采用PCR-反向点杂交法检测。利用HPV的基因特点设计特异引物，将18种高危型（HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83）和5种低危型（HPV6、11、42、43、81）在内的分型探針进行杂交，依据杂交信号的有无判断各HPV基因型号存在。

1.4观察指标及评价标准

DcR3检查，细胞质内检出棕黄色颗粒，随机选取5个有代表性的视野，每个视野计数100个细胞，若阳性细胞数>20%即为阳性。高危型HPV阳性为HPV-DNA含量≥1.0 pg/ml，即RLU比值≥1.0;阴性为HPV-DNA含量<1.0 pg/ml，即RLU比值<1.0。

1.5统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件处理数据，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验;计数资料以率表示，采用χ2检验，采用Spearman检验进行相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1四组高危HPV、DcR3阳性检出率的比较

CINⅠ组HR-HPV阳性检出率为43.75%，CINⅡ组HR-HPV阳性检出率为62.50%，CINⅢ组HR-HPV阳性检出率为88.89%，宫颈癌组HR-HPV阳性检出率92.31%;CINⅠ组DcR3阳性检出率为31.25%，CINⅡ组DcR3阳性检出率为45.83%，CINⅢ组DcR3阳性检出率为66.67%，宫颈癌组DcR3阳性检出率为76.92%（表1）。

2.2宫颈癌、CIN与HPV感染、DcR3的相关性分析

经Spearman分析，CIN严重程度与HPV、DcR3感染成正相关（r=0.426、0.324，P=0.000、0.003）;DcR3在宫颈病变中的表达水平与HR-HPV感染成正相关（r=0.681，P=0.003）。

3讨论

宫颈癌是女性生殖系统发病率最高常见肿瘤疾病，发生于机体子宫颈鳞状上皮部位或腺上皮部位，分为鳞癌、腺癌和鳞腺癌，可通过淋巴扩散和转移或直接蔓延，其发病率及致死率保持较高水平[6-8]。宫颈癌多由病毒感染、多个性伴侣、不健康生活方式引起，可造成患者阴道流血、米泔状排液、尿频、尿毒症等症状，病情延误至晚期可造成患者恶病质等全身衰竭症状，严重威胁患者生命安全及健康[9]。宫颈癌由CIN病变发展而来，而CIN患者中仅小部分可发展为宫颈浸润癌，大多数CIN最终可通过病灶切除消退，不会威胁患者生命安全[10]。早期诊断和治疗对宫颈癌患者有重要作用。

HPV是一种球形DNA病毒，属于乳多空病毒科，可通过母婴传播、医源性感染、间接性或密切接触、性传播等感染途径侵犯黏膜上皮和皮肤，诱发寻常疣、尖锐湿疣等良性肿瘤或宫颈癌等恶性肿瘤[11]。HPV是CIN和宫颈癌发生和发展的危险因素，根据其感染危险性高低可分为HR-HPV及低危型人乳头瘤病毒（LR-HPV），其中持续性HR-HPV感染可诱发和推动CIN发展为宫颈癌，是宫颈CIN及宫颈癌发生、发展的重要影响因素[12]。确定HR-HPV与宫颈癌及宫颈CIN的关系对宫颈癌筛查及指导治疗有关键作用。本研究结果显示，CINⅠ组高危型HPV感染阳性检出率为43.75%，CINⅡ组高危型HPV感染阳性检出率为62.50%，CINⅢ组高危型HPV感染阳性检出率为88.89%，宫颈癌组 HR-HPV感染阳性检出率为92.31%，且经Spearman分析，CIN严重程度与HPV感染成正相关（r=0.426，P=0.000）;结果提示，高危型HPV感染与宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变成正相关性（r=0.681，P=0.003），HR-HPV阳性率随CIN病变程度升高，对高危型HPV干预可改变癌前病变发展。分析其原因可能为：HPV进入机体后长期的隐匿和大量复制，造成机体免疫功能下降，通过微创伤造成阴道局部感染;HPV病毒整合后为宫颈上皮细胞提供生长优势环境，使HPV癌基因持续性高表达;HPV的E6和E7蛋白结合p53后使其失活，造成HIF-1α降解，导致机体失去抑癌作用。研究表明，宫颈发生HR-HPV感染后逐渐从上皮基底层病变过渡到上皮全层至基底膜引起浸润癌的过程要10年，且逆转率较大，感染后有足够时间对其干预，故积极采取各种手段减少HR-HPV感染可降低宫颈癌发生可能性[13]。HR-HPV感染平均清除时间长达13个月，且其时间与患者生殖道炎症、性伴侣个数、吸烟史、年龄等因素相关[14]。临床通过药物治疗、光动力疗法、冷冻、微波治疗、激光、电灼疗法及综合疗法等，各有其优、劣势。本研究结果显示，DcR3表达与宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变成正相关性。结果提示，DcR3阳性率随CIN病变程度升高，其水平可在一定程度上反应癌前病变程度。分析其原因可能为DcR3在人体胃、肺、脑等正常组织中表达呈较低水平，在肺癌、女性生殖道恶性肿瘤等癌细胞株呈高表达状态，且可能与淋巴结转移、肿瘤细胞分化程度等相关[15]。

综上所述，HR-HPV感染与宫颈癌、宫颈上皮内瘤病变成正相关性，DcR3、HR-HPV阳性率随CIN病变程度升高，且DcR3在宫颈病变中的表达水平与HR-HPV感染成正相关。

[参考文献]

[1]魏长慧，朱继存，牛媛娜，等.2004-2016年中国女性生殖系统恶性肿瘤死亡趋势分析[J].中华疾病控制杂志，2019， 23（5）：506-511.

[2]王本敬，刘敏娟，李文静，等.人乳头瘤病毒52型E6和E7基因突变与宫颈癌及癌前病变关系的研究[J].中国计划生育和妇产科，2018，10（6）：24-30.

[3]李伟英，范长玲，张敏，等.p16蛋白在宫颈癌中的表达及其与患者临床特征和预后的关系[J].癌症进展，2019，17（10）：1222-1224，1240.

[4]王国荣，韩延霞.高危型人乳头瘤病毒16、18型感染与宫颈癌及癌前病变的相关性分析[J].中国妇幼保健，2018， 33（1）：67-69.

[5]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.宫颈癌及癌前病变规范化诊疗指南（试行）[J].中国医学前沿杂志（电子版），2013，5（8）：40-49.

[6]王利霞.宫颈上皮内瘤病变和宫颈癌与高危型HPV病毒感染的相关性分析[J].实用癌症杂志，2018，33（6）：1021-1023.

[7]田甜，华震，王灵芝，等.S100A7在子宫颈癌组织中的表达及其对子宫颈癌Hela和Caski细胞迁移侵袭及上皮间质转化的影响[J].中华妇产科杂志，2018，53（2）：99-105.

[8]张磊，毕庆庆，陈文，等.宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者人乳头瘤病毒基因型流行率和归因分析[J].中国全科医学，2019，22（17）：2042-2046.

[9]王春兰，吴婉莉，钱琴伟，等.人乳头瘤病毒感染与宫颈癌及癌前病变的相关性分析[J].中国妇幼保健，2017，32（19）：4676-4678.

[10]冯家成，陈咏梅，黎秀珍，等.p16/Ki-67双染联合高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测对子宫颈癌前病变诊断意义的初步评价[J].诊断病理学杂志，2019，26（7）：427-431.

[11]李娜，李洪林，尹利荣.HPVE6/E7mRNA与YAP在宫颈癌中的表达与相关性研究[J].天津医科大学学报，2018， 24（4）：307-311.

[12]武丽蕊，王兰朋，李红霞，等.免疫细胞及肿瘤标志物与高危型HPV感染宫颈癌患者HPV水平的相关性及与预后的关系[J].癌症进展，2019，17（11）：1342-1346.

[13]杜利君，邢晏，張兵，等.高危型人乳头瘤状病毒基因分型与宫颈病变的相关性分析[J].西部医学，2018，30（11）：1686-1690.

[14]张韦，韩萍，肖远革，等.HPVL1壳蛋白、Survivin蛋白及高危型HPV感染在不同程度宫颈病变中的相关性研究及临床价值[J].中国妇幼保健，2018，33（22）：5258-5261.

[15]葛智成，屈翔，余和芬，等.死亡诱骗受体3对乳腺癌预后及乳腺癌细胞的体外功能的影响[J].中华医学杂志，2019，99（14）：1081-1085.

（收稿日期：2019-09-06  本文编辑：崔建中）