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快速测试片在食品微生物检测中的应用

2020-07-04崔雨明

质量安全与检验检测 2020年3期
关键词:大肠菌群滤纸菌落

崔雨明

(盘锦检验检测中心(盘锦市疾病预防控制中心) 辽宁盘锦 124010)

1 前言

食品作为人类生活的物质基础,与人们的身体健康息息相关。因此,食品安全至关重要。微生物是影响食品安全的主要因素,本文对快速测试片法在食品微生物检测中的应用进行分析,为食品微生物检测探究更为有效的方法,以期保证食品卫生的安全。

2 方法与结果

2.1 传统检测方法

筛选白色、无毒、中速、密度均匀、吸附力合格的滤纸,将滤纸裁剪成合适的尺寸。将灭菌氯化三苯四氮唑(TIC)加入到无菌培养基后,将无菌滤纸浸入其中,根据需要控制滤纸的培养基吸附量,在适宜的温度下干燥,分装于已灭菌的聚丙烯塑料口袋内,密封备用。TIC是氧化还原指示剂,接受氢后可形成非水溶性的红色三苯甲脂。在滤纸上形成红色点状物出现,对红点进行计数,即得细菌总数。

2.2 快速测试片检测法

检验前需要做好准备工作,合理选择快速测试片进行食品微生物检验工作。测试片可以采用培养基系统和冷水可溶性凝胶进行制备,并在同时准备好指示剂。在进行菌落总数测试时,必须使用白色无毒、密度均匀、中速且吸附力合格的测试片。除此之外,还要合理裁剪滤纸,大小控制在1~5 cm左右。在无菌培养基中加入2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)灭菌,再将无菌滤纸缓慢浸入;滤纸浸入后,对滤纸吸附量及干燥温度进行合理控制;最后,用灭菌聚丙烯塑料袋进行分装,密封处理。使用时,需要在纸片上方加入1 mL待测液,经压平处理后,放置于37℃培养箱中培养16~20 h,然后计数。由于滤纸间隙较大,纤维之间会存在菌体,此变化肉眼不可见,同实际菌数进行比较后,结果显示,菌落程度减小。检测试片使用后要进行焚烧处理,不可重复使用。

在食物微生物检测中,以对大肠杆菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌的检测作为普遍检测技术。传统方法需要较多人力、物力,且培养时间过长,而选择大肠杆菌计数纸片、大肠菌群和金黄色葡萄球菌测试片进行检测,培养时间在24~48 h[3]。通过测试,可对大肠杆菌及大肠菌群数进行确定。

2.3 结果

传统检测法一般需要较长的时间,且需要在相对稳定的温度下进行,但是采用测试片法,可以在短时间内无固定温度条件下进行操作,提升了检测效率,结果详见表1。

表1 食品微生物检测时间分析(单位:h)

2.4 讨论

通过以上食品微生物的检测结果可以看出,快速测试片法有检测率高、培养时间短、操作较为简单等优点。但是快速测试片法也存在一定的问题,仍需不断进行探索,以实现快速测试片法的广泛应用。

3 快速测试片在食品微生物检测中的应用

3.1 以滤纸为基础的测试片

大肠菌群、大肠杆菌纸片荧光法中所用的测试片由上海医科大学研制。此方法利用细菌会产生代谢酶或代谢产物这一特点,建立了一种酶底物反应法。通过检测大肠菌群、大肠杆菌产生的相关酶的活性,达到检测目的。目前,2种测试可以分别检测大肠菌群和大肠肝菌,在37℃培养箱中培养24 h后可以在荧光灯下得到相应的结果,方法用时短、操作简单,被广泛应用于我国的食品微生物检测中。

3.2以Petrifilm作为基础的测试片

Petrifilm测试片主要由上、下2层薄膜组成,下层的聚乙烯薄膜上有网格,覆盖在培养基上,上层是聚丙烯薄膜。微生物生长以及生化试验所需的营养试剂,由冷水可溶性凝胶剂附着在上、下2层膜上。Petrifilm纸片已经通过国际认可,我国已经有400多个实验室使用此测试片进行微生物检测,主要研究对象为大肠菌群、金黄色葡萄球菌。此检测片的检测率较高,检测数据准确有效,被广泛运用于食品微生物的检测中。

4 结语

快速测试片可测量少量样品,整个操作过程较为简单,便于消毒保存和运输携带。快速测试片的价格较低,不会对环境造成污染,在减少工作量的同时降低了成本,适用于我国食品实验室微生物的检测[4]。

另外,快速测试片法可以在取样的同时进行接种,在一定程度上避免了细菌繁殖造成的数量增多现象,可以反映样品的真实细菌数。快速检测法不须特定温度,检测前也无须进行大量的准备工作,缩短了试验过程,提高了测试效率,能及时将检测结果反馈给食品企业。

目前,我国对快速测试片法的研究已有部分成效,但快速测试片法仍存在许多问题。例如,滤纸滤孔过大,双面都有菌落生长,无法计数,且滤纸保水性较差,在检验过程中,不能保持合适的湿度,导致菌体的生长较差;另外,滤纸检验卡上营养物质分布不均匀,样品中的细菌不能迅速扩散,进而导致菌体生长分布不均匀;快速测试片的显色指示剂系统较为单一,不能对细菌、真菌进行有区别的计数,因此,很难全面推广;Petrifilm测试片上覆盖有一层薄膜,如果细菌产气、产粘液较多,会出现菌落的扩散和融合,也会使最终结果存在一定的误差[5]。

虽然测试片已经在我国食品微生物的检测中有了一定的发展,但其仅局限于几个单一的指标检测,因此,需要开发更为优质的载体以及更高效的显色物质,做进一步研究,为食品微生物的检测提供不同类型的测试片。相关人员应该重视快速测试片在食品微生物检测中的应用,研究更多新型的高分子聚合物,弥补现有方法的不足,推出更为有效、准确的优质快速测试片,让快速测试片法充分发挥其作用,提高食品微生物的检测质量,从而保证食品卫生安全。

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