吸烟对稳定期COPD患者Th17/Treg细胞表达的影响及其与血清炎性因子的相关性分析

叶彩虹 王辉 陈斯亮 咸子超

【摘要】 目的 研究吸烟对稳定期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者辅助性T细胞17/调节性T细胞（Th17/Treg）细胞表达的影响及其与血清炎性因子的相关性。方法 选取50例稳定期COPD患者作为观察组， 根据患者吸烟情况分为吸烟组（15例）、戒烟组（20例）、非吸烟组（15例）;另选取同期体检健康志愿者50例作为对照组。检测并对比两组肺功能指标及实验室指标[第1秒用力呼气容积（FEV1）、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比例（FEV1/FVC）、辅助性T细胞17/调节性T细胞（Th17/Treg）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）]， 对比吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平， 采用Pearson相关系数分析FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8的相关性。结果 观察组FEV1（42.59±7.52）%、FEV1/FVC（43.24±8.26）%均显著低于对照组的（89.40±10.43）%、（90.62±10.33）%， 差异有统计学意义（P<0.05）;观察组Th17/Treg（3.11±0.54）%、TNF-α（14.25±6.32）ng/L、IL-6（19.52±8.98）ng/L、IL-8（78.52±7.85）ng/L均顯著高于对照组的（1.06±0.21）%、（5.34±2.40）ng/L、（8.85±5.95）ng/L、（62.43±3.24）ng/L， 差异有统计学意义（P<0.05）。吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。经相关性分析， FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）。经相关性分析， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（r=0.547、0.526、0.634， P=0.000、0.000、0.000<0.05）。结论 稳定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈现出高表达， 且Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升与吸烟密切相关， 患者应当及早戒烟。

【关键词】 吸烟;稳定期慢性阻塞性肺疾病;辅助性T细胞17;调节性T细胞;炎性因子

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.15.004

Effect of smoking on Th17/Treg cell expression in stable COPD patients and its correlation with serum inflammatory factors   YE Cai-hong， WANG Hui， CHEN Si-liang. Department of Clinical Laboratory， Shenzhen Mental Health Center （Shenzhen Kangning Hospital）， Shenzhen 518000， China

【Abstract】 Objective   To study the effect of smoking on helper T cells 17/ regulatory T cells （Th17 / Treg） cell expression in stable chronic obstructive pulmonary disease （COPD） patients and its correlation with serum inflammatory factors. Methods   A total of 50 stable COPD patients were selected as the observation group， which were divided into smoking group （15 cases）， smoking cessation group （20 cases） and non-smoking group （15 cases） by smoking status. Another 50 healthy volunteers were selected as the control group. The pulmonary function indexes and laboratory indexes [forced expiratory volume in 1st second （FEV1）， FEV1 / force vital capacity （FVC）， Th17 / Treg， tumor necrosis factor-α （TNF-α）， interleukin-6 （IL-6）， interleukin-8 （IL-8）] were detected and compared between the two groups. The levels of FEV1， FEV1 / FVC， Th17 / Treg， TNF-α， IL-6 and IL-8 in smoking group， smoking cessation group and non-smoking group were compared. Pearson correlation coefficient was used to analyze the correlation between FEV1， FEV1 / FVC and Th17 / Treg， TNF-α， IL-6， IL-8， Th17 /

1. 2. 2 排除标准 ①临床资料不完善;②COPD急性发作期;③严重心肝肾功能障碍或伴有恶性肿瘤;④伴

有其他肺部疾病， 如肺结核、肺炎等。

1. 3 方法 ①资料收集：收集两组基础资料（性别、年龄、FEV1、FEV1/FVC）及实验室指标（Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8）。②FEV1、FEV1/FVC检查：分别在患者及志愿者入院2～3 d后使用德国JAEGER公司生产的MS-IOS型肺功能仪检测FEV1、FEV1/FVC。③血清检查：分别在患者及志愿者入院2～3 d后抽取清晨空腹静脉血， 离心后送检;制备外周血单个细胞核后使用流式细胞术检测Th17/Treg;TNF-α、IL-6、IL-8使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测， 检测仪器为HY-perionMR酶标仪（美国）， 试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司生产。

1. 4 观察指标 ①对比两组肺功能指标及实验室指标， 包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。②对比吸烟、戒烟、非吸烟COPD患者肺功能指标及实验室指标， 包括FEV1、FEV1/FVC、Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8。③相关性分析：以Pearson相关系数分析FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8的相关性。

1. 5 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 两组比较采用t检验， 多组比较采用方差分析;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验;相关性分析以Pearson系数检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组肺功能指标及实验室指标对比 观察组FEV1、FEV1/FVC均低于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）;观察组Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8均高于对照组， 差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者肺功能指标及实验室指标对比 吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相关性分析 经相关性分析， FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）。见表3。

2. 4 Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8相关性分析

经相关性分析， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（P<0.05）。见表4。

3 讨论

COPD是以持续性、进行性气流受限为特征的一种疾病， 罹患群体多为40岁以上人群， 发病后常见有慢性咳嗽、咳痰、喘息等一系列症状， 不利于患者健康， 严重者甚至可导致患者死亡[7]。目前临床上对COPD的具体发病机制尚未明确， 但众多临床医师普遍认为与环境及个体因素密切相关， 如吸烟及粉尘、化学物质吸入等[8]。本次研究對COPD吸烟患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平进行观察， 尝试探讨吸烟对Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的影响， 旨在为该疾病的临床治疗工作提供帮助。

本次研究结果显示， 观察组FEV1、FEV1/FVC水平均显著低于对照组， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平均显著高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）;表明稳定期COPD患者发病后肺功能下降， 此时患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈现出高表达。COPD是一种呼吸系统受损疾病， 可导致肺功能下降， 本次研究中， 稳定期COPD患者FEV1、FEV1/FVC明显低于健康者， 与既往相关研究结果相符[9， 10]。

COPD发病后会引起免疫功能低下及全身炎症反应， 导致TNF-α、IL-6、IL-8水平上升。Th17是新发现的亚

群， 与炎症反应密切相关， 能够清除机体病原微生物， Terg也是新发现的T淋巴细胞亚群， 具有免疫抑制作用， 能够抑制炎症反应， 避免过度的炎症反应对机体产生损伤， 而Th17/Treg处于平衡时不仅能够清除机体病原微生物， 还能避免炎症反应对机体产生损伤， 对维持机体免疫平衡具有重要意义[11， 12]。本次研究中， 观察组Th17/Treg水平明显上升， 分析原因可能与患者体内炎症因子异常表达有关， Th17/Treg平衡受到破坏， 导致Th17/Treg水平提高。与张占强等[13]研究结果基本相符。

本次研究结果中， 吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的FEV1、FEV1/FVC水平呈升高趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;吸烟组、戒烟组、非吸烟组患者的Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平呈下降趋势， 组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）。表明吸烟可导致患者肺功能降低， Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平高表达。可能与香烟中的某些物质促进炎症表达及影响肺部微生态有关[14， 15]， Th17与炎症反应密切相关， 当Th17释放更多的炎症因子时Treg无法抑制过度的炎症反应， 导致Th17/Treg平衡被打破， 因此患者体内Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8异常升高。

为明确吸烟与COPD患者Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8间的关系， 本文就FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8相关性及Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8相关性进行分析， 证实FEV1、FEV1/FVC与Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8呈负相关（P<0.05）， Th17/Treg与TNF-α、IL-6、IL-8呈正相关（P<0.05）， 表明Th17/Treg、TNF-α、IL-6、IL-8水平的上升与吸烟密切相关， 与上述研究结果一致。因此， 稳定期COPD患者应当重视吸烟对COPD的影响， 应及早戒烟。

综上所述， 稳定期COPD患者Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8水平呈现出高表达， 且Th17/Treg、TNF-α、

IL-6、IL-8与FEV1、FEV1/FVC呈现出负相关， 患者吸烟可导致炎症反应加重， 不利于疾病的治疗。

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[收稿日期：2020-02-17]