虾青素复方制剂的安全性及改善记忆、增强免疫作用研究

朱立平，邹圣灿，李新爱

(1.济南市儿童医院，山东 济南 250000；2.青岛颐圣康和生物制药有限公司，山东 青岛 266100；3.解放军第960医院南院区，山东 济南 250000)

虾青素是类胡萝卜素的含氧衍生物，呈粉红色，主要存在于壳类、海洋生物及少量植物中，具有强大的抗氧化能力[1-2]。研究报道虾青素的抗氧化能力是β-胡萝卜素的10倍，是维生素E的100倍，且易透过血脑屏障，对年龄相关的视黄斑退化和中枢神经系统疾病(如帕金森、阿尔兹海默症和脊髓损伤)效果明显[3-4]。此外，虾青素主要以全反式异构体存在，具有多种生物活性功能，如防止心脑血管疾病，提高机体免疫能力和抗癌作用等[5]。近年来虾青素的消费市场不断扩展，国内外研究机构围绕其预防与治疗疾病潜在的机理进行探索和研究[6-7]。本品以新食品原料雨生红球藻粉经萃取制成虾青素油，另外辅以新食品原料磷脂酰丝氨酸和DHA制成复方，探讨该复合物人体食用的安全性及改善记忆和增强免疫的作用。

1 研究材料与方法

1.1 对象选择

采用随机整群抽样法，在某大学抽取大一年级体检健康的学生150名，18±2岁，男女各75名。

1.2 受试物

虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方制剂由聊城澳健生物技术有限公司提供，剂型为凝胶糖果，内容物呈红色，1.0g/粒，推荐用量2粒/天，配方各原料占比分别为磷脂酰丝氨酸20%、DHA30%、虾青素10%。同时提供外观性状一致的安慰剂样品。

1.3 对象分组

随机将学生分为安慰组和干预组，各组男女生比例一致，干预组每天按推荐用量服用虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方，安慰组服用安慰剂，均连续服用一个月。

1.4 观察指标

1.4.1 安全指标

(1)比较两组学生在服用受试物和安慰剂后的一般情况，如精神状态、睡眠、饮食、大小便等，每天由受试者记录；(2)血压、血象、肝、肾功能；实验前后各检查一次，观察各个指标的变化情况；(3)实验开始前进行一次胸部透视、心电图和腹部B超检查，以排出患有重要脏器疾病的自愿者。

1.4.2 功效指标

(1)观察比较两组学生在服用受试物和安慰剂后白细胞介素-2活性、白细胞吞噬率、NK细胞活性、T细胞亚群占比。(2)比较两组学生在服用受试物和安慰剂后临床记忆量表测试得分。

2 实验结果

2.1 一般情况

试验中受试者失访、退出、不按要求服用样品共12例，最终进入有效统计例数为138例。其中安慰组70例，男36例，女34例；干预组68例，男女均34例。两组受试者在试验期间的生活和饮食情况基本无改变。

2.2 安全性指标

试食前后，两组受试者的精神、睡眠、饮食、大小便状况均未见异常；血压、心率、血象、肝肾功能、尿常规、便常规、胸部透视、心电图及腹部B超检查结果均未见异常，表明该剂量下，虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方对人体的健康无损害作用。

2.3 功效性指标

2.3.1 增强免疫功能试验结果

实验前分别对干预组和安慰组的血清IL-2水平、白细胞吞噬率、NK细胞活性能力、T淋巴细胞各项指标进行检测，组间各指标无显著性差异(P>0.05)，表明试食前两组学生免疫力水平无差异，表1。

表1 干预前后2组免疫指标情况

表示与安慰组比较：*P<0.05；表示与实验前比较：#P<0.05

受试人群分别服用虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方和安慰剂一个月后，干预组的IL-2水平、白细胞吞噬率、NK细胞活性能力、CD4+占比、CD4+/CD4+比值较实验前与安慰组均显著升高，差异具有显著性(P<0.05)，而CD4+和CD4+值基本未发现变化。表明虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方可以增强机体白细胞的吞噬能力，提高NK细胞活性能力，提高T淋巴细胞活性水平，见表1。

2.3.2 改善记忆功能试验结果

实验采用多媒体临床记忆量表软件CM对各组学生的指向记忆、联想学习、图像自由回忆、无意义图形再认、人像特点联系回忆5个方面进行分量表得分评价，实验前干预组的各分量表得分和总分与安慰组相比，差异无统计学意义(P>0.05)，表明试食前两组学生记忆力水平无差异，表2。

表2 实验前后2组记忆量表得分情况比较

表示与安慰组比较：*P<0.05；表示与实验前比较：#P<0.05

由评测结果可知，安慰组实验前后的各分量表得分和总分差异无统计学意义(P>0.05)，说明安慰剂对学生记忆力改善无作用；干预组实验后的各分量表得分和总分较试食前有显著性提高，差异有统计学意义(P<0.05)，说明受试者服用虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方经一段时间持续强化补充后，学生语言和非语言的记忆能力均有显著改善和提高。此外，实验后干预组与安慰组在各分量表得分和总分方面差异有统计学意义(P<0.05)，干预组的指向记忆、联想学习、图像自由回忆、无意义图形再认、人像特点联系回忆分量表得分均数较安慰组均明显提高(P<0.05)，说明服用虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方具有显著提高和改善学生对言语和非言语记忆力的实际意义。

3 结果

机体的免疫力和记忆力均是由一个复杂的系统实现的。本实验选择白细胞介素-2、白细胞吞噬能力、NK细胞活性及淋巴细胞亚群占比4个指标，以观察虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方对人体的免疫调节作用。实验结果表明：在食用虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方一个月后，干预组人群的IL-2活性、白细胞吞噬能力、NK细胞活性及淋巴细胞亚群CD4+占比、CD4+/CD8+比值升高，较食用前及安慰组实验后差异均有显著(P<0.05)，证实虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方具有增强机体免疫力的作用。由于影响记忆力的因素较多，如遗传、兴趣、疲劳、精神状态、营养情况，本实验选择文化程度相同，属同一年龄阶段、未接受过类似测试、未服用过改善记忆有关的药品或保健食品的学生作为受试对象，消除了文化程度、年龄、药物因素对结果的影响。实验前随机分组并进行记忆测评，消除组间差异，保证结果的公平和客观。通过对各组服用受试物前后进行统计学分析发现，试食前后安慰组各分量表得分无显著性差异。试食后，干预组各分量表得分结果较实验前和安慰剂组均有差异(P<0.05)，证实虾青素DHA磷脂酰丝氨酸复方具有改善记忆和提高学生记忆力的作用。

4 讨论

实验中受试物凝胶糖果有效成分为虾青素、二十二碳六烯酸(DHA)、磷脂酰丝氨酸(PS)。其中，DHA是-3系列一种长链多不饱和脂肪酸，俗称“脑黄金”。研究表明，DHA在婴儿脑和视网膜的发育中发挥重要作用，补充一定量的DHA能促进大脑神经发育、增强学习记忆能力[8]。新的研究发现，DHA是营养免疫因子的重要组成部分，可以影响机体的免疫功能，适当补充DHA能增强机体的免疫力[9]。磷脂酰丝氨酸是存在于动植物细胞中的一种重要膜磷脂，是大脑中主要的酸性磷脂[10]，对多种细胞的代谢具有重要调节作用，能提高脑细胞活力，对治疗脑萎缩、预防老年人痴呆症、改善记忆等方面功效显著，同时能促进脑疲劳修复、平衡情绪、缓解抑郁症、修复大脑损伤、治疗儿童多动症具有一定的疗效等[11]。目前，随着世界范围的抑郁症、阿尔兹海默症等各种疾病的蔓延，虾青素、DHA、磷脂酰丝氨酸等受到了越来越多学者的关注，从来源、提取、合成、功效作用等方面均有诸多研究。本实验仅证实以虾青素、DHA、磷脂酰丝氨酸为原料制成的复合物具有改善受试人群的记忆力及提高免疫力的作用，且在本实验研究剂量下虾青素、DHA、磷脂酰丝氨酸复合物具有安全性，但关于虾青素、DHA、磷脂酰丝氨酸提高学习能力、增强免疫力的最佳剂量和作用机制有待进一步研究。