铁皮石斛组培快繁技术研究进展

王朝雯

摘要    铁皮石斛是濒危药材之一，本文通过查阅铁皮石斛相关文献，对其组织培养繁殖技术研究现状进行了综述，以期为铁皮石斛组培快繁技术研究提供参考。

关键词    铁皮石斛;组织培养;快繁技术

中图分类号    S567.239        文献标识码    A

文章编号   1007-5739（2020）11-0068-01     开放科学（资源服务）标识码（OSID）

铁皮石斛为多年生草本植物，可有效提升人体免疫力，具有延缓衰老、增强血管扩张的效果。由于铁皮石斛种子小且没有胚乳，只有在真菌环境下才有萌发的可能，因而栽培难度较大[1]。组织培养是快速繁殖铁皮石斛的主要方式，目前国内外专家进行了大量研究，并取得了较为显著的成果。

1    外植体的选取

外植体除种子外，还有无菌幼苗茎段。饶宝蓉等[2]通过分析发现，以种子作为外植体较茎段外植体其无菌系的建立效率较高，种子诱导感染率更低。同时，种子外植体的长势更加整齐。总体来说，选取种子作为外植体较为理想。

2    初代培养基选择

培养基选择是组培的关键，不同的物种、品种以及外植体材料所采用的培养基也应有所区别。同时，处于不同培养阶段、基于不同目的而进行的培养，应从培养基上进行区分。

2.1    基本培养基

诱导培养基是常见的初代培养基，也可采用分化培養基作为初代培养基。铁皮石斛有多种培养基，可根据外植体的不同而选择适合的培养基。林江波等[3]采用SRR检验方法对各处理因子进行检验后发现，从原球茎诱导率方面分析，MS培养基与1/2MS培养基并没有明显差异，而二者与VW培养基的诱导率差异较为明显。杨立昌等[4]对铁皮石斛的愈伤组织情况进行了分析，结果发现，与MS培养基相比，1/2MS培养基的出芽率更高，表明在激素浓度适合的情况下，培养基的盐含量较低对不定芽的分化更加适合。

2.2    激素及添加物

有利于铁皮石斛愈伤组织的培养基种类较多，NAA与IBA等激素的应用较为常见;此外，还有6-BA等激素。合理进行生长素与细胞分裂素的比例调配最为关键，细胞分裂素可以有效诱导不定芽的萌发，生长素与细胞分裂素的合理调配有利于愈伤组织的形成。以天然有机物作为添加物可以使铁皮石斛的外植体吸收丰富的微量元素，为其生长提供必要的激素与活性物质，有利于原球茎的快速增殖与分化。王福喜[5]对培养基进行改良发现，改良型MS培养基的增殖率有明显增长。蒋向辉等[6]以幼叶为外植体进行芽分化和根诱导试验，采用赤霉素作为处理激素，结果表明，铁皮石斛的成苗率显著提升，成苗效果最佳的浓度为1.5 mg/L。

3    继代培养基选择

原球茎增殖在组培中极为重要，诱导铁皮石斛产生原球茎，有利于后续原球茎分化，也是壮苗生根的重要条件。植物生长调节剂的添加会对植物细胞分裂产生影响，有利于铁皮石斛器官形成和次生产物的快速合成。由于铁皮石斛品种或增殖方式存在差异，最终得出的分析结果也有所不同。

3.1    原球茎增殖与分化

唐桂香等[7]通过分析发现，在培养基中加入适量的6-BA与NAA激素对铁皮石斛的原球茎具有明显的诱导增殖效果，以1/2MS为基本培养基，6-BA 1.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L最有利于原球茎增殖。

3.2    芽增殖

杨平飞等[8]通过大量试验发现，在合理配置生长素与细胞分裂素的条件下，二者比值会对铁皮石斛幼芽萌发效果产生影响，比值越低，幼芽生长状况越好。同时，将适量的活性碳加入到培养基中，可以有效促进植物组织的酚类物质排出，有利于促进铁皮石斛器官形成，对其形态的改变有积极的促进作用，活性碳的添加浓度范围以0.5～10.0 g/L为佳。

4    展望

鉴于铁皮石斛培养阶段、品种、外植体等差异会对研究成果产生直接影响，在铁皮石斛组培过程中，应根据品种、外植体及培养阶段的不同科学选择培养基，有效提升铁皮石斛快速繁育效果。我国铁皮石斛组织培养技术已趋于成熟，但在育种和药用等方面还需加强研究，一是利用诱变、杂交和转基因等现代生物育种技术，结合植物组织培养技术，快速培育抗虫抗病性强、药用价值高的优良品种;二是加强探索组培过程中药用活性成分的积累规律和不同培养添加物及培养条件对药用活性成分的影响。

5    参考文献

[1] 李志贤，林永珍，叶思群，等.铁皮石斛组培苗移栽与仿野生树栽研究[J].绿色科技，2017（11）：231-232.

[2] 饶宝蓉，陈泳和，江文清，等.铁皮石斛不同外植体组培快繁技术比较[J].安徽农业科学，2017（4）：138-141.

[3] 林江波，王伟英，李海明，等.铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生[J].福建农业学报，2016，31（10）：1075-1079.

[4] 杨立昌，乙引，张宇斌，等.铁皮石斛快速繁殖体系研究[J].北方园艺，2010（22）：136-138.

[5] 王福喜.铁皮石斛组织培养研究[J].阴山学刊（自然科学），2011（1）：31-34.

[6] 蒋向辉，佘朝文，王善粉.不同激素浓度对铁皮石斛高效快繁体系的影响[J].江苏农业科学，2010（1）：76-78.

[7] 唐桂香，黄福灯，周伟军，等.铁皮石斛的种胚萌发及其离体繁殖研究[J].中国中药杂志，2005（20）：4.

[8] 杨平飞，吴明开，宋智琴，等.不同激素配比对铁皮石斛组培丛生芽增殖的影响[J].北方园艺，2016（6）：106-108.

收稿日期   2020-03-10