蔬菜水果中多菌灵等4 种苯并咪唑类农药残留量的测定

2020-06-20

河南农业 2020年6期

多菌灵等4 种苯并咪唑类农药因为可以有效防治由真菌引起的多种作物病害，所以在我国使用比较广泛，但是其残留能够引起肝病和染色体的畸变，对人体有一定的毒害。为了保证人民的身体健康，有效控制多菌灵等4 种苯并咪唑类农药的使用及对其残留量进行有效监控，促进农业投入品的科学性和产品的安全性，笔者用高效液相色谱仪对其进行了测定，该方法前处理操作简单，响应值高，特别适用于分析背景干扰严重、定性困难、被检测化合物含量很低的样品，缩短了样品分析和进样的时间，大大提高了检测效率。

一、材料与设备

（一）主要试剂与仪器设备

乙腈、二氯甲烷、甲醇、超纯水，以上试剂均为色谱级；氯化钠（140 ℃烘烤4 h）；液相色谱-串联质谱联用仪，配有电喷雾离子源（ESI）；离心机、氮吹仪、混匀器、1%天平、匀浆机、粉碎机等。

（二）农药标准品

多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2—氨基苯并咪唑，纯度≥98%（以上标液均购买于农业农村部环境保护科研所）。

二、测定步骤

（一）样品制备

按照NY/T 789—2001 要求抽取水果样品，取可食部分，用滤纸擦去表面泥土，切碎后，用对角线法充分混匀，用四分法缩份，缩份后将样品放入粉碎机中粉碎，制成待测样品备用，密封并标识。

（二）样品前处理

准确称取带测样20.0 g 放入离心管中，准确加入40.0 mL 乙腈，15 000 r/min 高速匀浆1 min，加入5.0 g氯化钠，在高速匀浆提取1 min，放入离心机里2500 r/min 离心5 min，静置25 min，使乙腈相和水相分层。

（三）净化

从离心管中准确吸取10.00 mL 上层液，放入15 mL 的刻度离心管中，然后放入水浴加氮吹仪上70 ℃蒸发近干，加入2 mL 的甲醇+二氯甲烷（5+95）溶解残渣，盖上铝箔纸，待用。将氨基柱用5.0 mL 的甲醇+二氯甲烷（5+95）预洗，当溶剂液面到达柱吸附表面时，立即倒入上述净化溶液，用15 mL 刻度离心管收集洗脱液，用5.0 mL 甲醇+二氯甲烷（5+95）冲洗烧杯后淋洗氨基柱，并重复1 次。将淋洗液放置水浴加氮吹仪上35 ℃蒸发近干，用甲醇+水（1+1）准确定容至5.0 mL，在混匀器上混匀，用0.2 um 滤膜过滤，放入2 mL 自动进样瓶中，供液相色谱-串联质谱仪测定分析。

（四）色谱条件

色谱柱C18，75 mm×2.0 mm，柱温40 ℃；扫描方式为MRM；气帘气CUR 为30 psi，碰撞气CAD 为Medium，IS 电压为5500V，离子源温度为5500 ℃，雾化气GAS1 为55 psi，辅助气GAS2 为60 psi，进样量为1 ul。溶剂梯度与流速见表1。监测离子对、碰撞器电压、去簇电压见表2。

表1 溶剂梯度流速时间

表2 监测离子对、保留时间、碰撞器电压、去簇电压

三、数据结果分析

（一）工作标准曲线

将多菌灵、噻菌灵、甲基硫菌灵、2-氨基苯并咪唑的标准品用甲醇+水（50+50）苹果空白基质分别配成0.01～0.2 mg/L 的浓度的标准溶液，按照液相串联质谱仪器条件进行测定，多菌灵等4 种苯并咪唑类农药在一定的质量浓度范围非均与峰面积成良好的线性关系，相关系数r=0.999 3～0.999 7，有很强的相关性。多菌灵等4 种苯并咪唑类农药定量离子（见下页图1 至图4）。

（二）加标回收率及计算公式

在蔬菜水果样品中进行加标回收试验，多菌灵等4种苯并咪唑类的添加量分别为0.01 mg/kg、0.1 mg/kg、0.2 mg/kg，每个添加浓度5 个重复，均可以取得较好的结果，回收率在87.0%～106%，相对标准偏差在0.62%～8.7%，满足检测要求。

式中，V1—分取试液体积，单位为毫升（mL）；V2—上机液定容体积，单位为毫升（mL）；V0—标液上机体积，单位为毫升（mL）；V3—试样上机体积，单位为毫升（mL）；V—定容体积，单位为毫升（mL）；m—样品质量，单位为克（g）；Ar—样品中被测农药的峰面积；A0—农药标准溶液中被测农药的峰面积。