发酵饲料对大午金凤蛋鸡生产性能、蛋品质和抗氧化能力的影响

■易春霞 刘晓兰 王 燕 董 原

（齐齐哈尔大学食品与生物工程学院，黑龙江齐齐哈尔161006）

我国玉米产量居世界第二位，近10多年来，我国玉米深加工产能扩张迅速，深加工量（含饲料加工）年均增长11%。玉米深加工副产物玉米黄粉和玉米胚芽粕产量大，目前主要作为饲料使用。玉米黄粉蛋白质含量高，但是主要以醇溶蛋白为主，水溶性差，且氨基酸组成不平衡，适口性差，直接作为饲料使用蛋白质消化利用率低。玉米胚芽粕蛋白质含量低且粗纤维含量较高，限制了其在单胃动物饲料中的应用[1-3]。

微生物发酵饲料通过微生物的菌体繁殖和代谢，将饲料中的大分子物质和抗营养因子进行分解或转化，含有高活性益生菌及其代谢产物[4]。微生物发酵饲料具有提高饲料消化利用率，改善畜禽生产性能，促进动物肠道健康和具有替抗潜力等优点，在蛋鸡养殖中广泛应用[5-7]。黄竹等[8]研究结果表明，在基础日粮中添加不同比例的玉米-豆粕发酵饲料，可在一定程度上提高海兰褐蛋鸡的生产性能及蛋品质，5%添加水平的效果最佳。丁小青等[9]研究结果表明，以茶渣、豆粕和麸皮为底物的发酵饲料使仙居鸡血清超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著升高，丙二醛含量显著降低，有效改善机体抗氧化能力。

大午金凤蛋鸡具有红羽产粉壳蛋、啄死淘率低、生产性能稳定、蛋壳颜色好等特点，近几年在粉壳蛋鸡市场占有率大幅提高[10]。以玉米黄粉和玉米胚芽粕为底物的发酵饲料在大午金凤蛋鸡中的应用未见报道。本试验以玉米黄粉和玉米胚芽粕为底物，采用益生菌发酵制备发酵饲料，研究在玉米-豆粕型日粮中添加发酵饲料对大午金凤蛋鸡生产性能、鸡蛋品质和抗氧化能力的影响，旨在为发酵饲料在大午金凤蛋鸡生产中合理利用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

原料：玉米黄粉购自黑龙江某公司；玉米胚芽粕购自公主岭某公司；结晶葡萄糖母液购自黑龙江某公司。

菌种：地衣芽孢杆菌、啤酒酵母菌和保加利亚乳杆菌菌种均保藏于齐齐哈尔大学食品学院生物工程实验室。

1.2 发酵饲料的制备

采用单向阀发酵袋（25 kg）进行生料发酵，装料量为15 kg/袋，物料配比为玉米黄粉∶玉米胚芽粕=2∶3（w/w），料水比为1∶1（g/ml），总接种量4 ml/100 g湿基，菌液体积比为地衣芽孢杆菌、啤酒酵母菌和保加利亚乳杆菌数量比1∶1∶1，活菌数108cfu/ml，发酵温度30 ℃，发酵时间4 d。发酵结束后，60 ℃烘干8 h即为发酵饲料（含水量≤10%）。

1.3 试验设计及饲养饲粮

试验在齐齐哈尔市齐佳生态养殖场进行，采用单层直形式笼养，自由采食和自由饮水，每天早上8:00和下午16:00 喂食2 次。每天下午16:00 捡蛋1 次，每天清扫鸡笼1次。光照时间为每天16 h，温度控制在21～22 ℃。按正常免疫程序接种免疫。选用健康且产蛋性能相近的56 周龄大午金凤蛋鸡160 只，随机分成2 组，每组5 个重复，每个重复16 只鸡。预饲期7 d，正式试验期分前期（1～21 d）和后期（22～42 d）共42 d。参照NY/T 33—2004《鸡饲养标准》配制日粮。各组饲粮配方及营养水平见表1。对照组饲喂基础日粮；试验组：10%发酵饲料替代10 %基础日粮的配方日粮。

1.4 样品采集与制备

在试验第21 d 和第42 d 时，以每组每重复为单位随机选取6枚鸡蛋测定鸡蛋品质，每组每重复随机选取2只健康蛋鸡进行翅下静脉采血，采血前禁食不禁水12 h，每只鸡采集5 ml 血液，采用肝素钠负压采血管，待血清自然析出后，3 000 r/min 离心10 min，分离出血清，待测血清抗氧化指标。第42 d 时采血后解剖取左侧肝脏约2 g 置于无菌试管中，液氮速冻，保存于-80 ℃，待测肝脏抗氧化指标。

1.5 试验指标和测定方法

1.5.1 发酵饲料营养成分测定

常规营养成分粗蛋白质、粗纤维、氨基酸、钙、磷和活菌数分别参考中华人民共和国农业行业标准GB/T 6432—1994、GB/T 6434—2006、GB/T 18246—2000、GB/T 6436—2002、GB/T 6437—2002 和GB 4789.2—2016 方法测定[11-16]，可溶性蛋白含量采用Folin-酚法测定[17]。

表1 试验日粮组成及营养水平（风干基础）

1.5.2 蛋鸡生产性能测定

试验期间每天按每重复为单位记录产蛋数量、产蛋重量、投料量和破软蛋数。并计算1～21 d 和22～42 d平均蛋重、产蛋率、料蛋比、平均日采食量和破软蛋率。

1.5.3 鸡蛋品质指标测定

鸡蛋品质指标包括蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋壳颜色、蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位和蛋形指数。分别采用日本Robotmation 公司的EFG-0503 蛋壳强度测定仪、EFT-1601 蛋壳厚度测定仪和EMT7300 多功能蛋品质分析仪测定。

1.5.4 蛋鸡抗氧化指标测定

血清用于测定总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶活力（CAT）、丙二醛含量（MDA）、超氧化物歧化酶活力（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶活力（GSH-Px）；肝脏组织液测定T-AOC、MDA、SOD 和GSH-Px。测定过程严格按照南京建成生物研究所提供的试剂盒说明书进行测定。

1.6 统计分析

试验数据运用SPSS 17.0 软件进行统计，用单因子方差分析进行差异显著性检验，最小显著差数法（LSD）进行多重比较，结果均以“平均值±标准差”表示，“P＜0.05”作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 发酵前后饲料的营养成分

成分分析是饲料评价的基础，通过对发酵物的成分分析可以更好地评价其价值和品质，发酵前后的饲料常规成分含量的变化如表2所示。与发酵前相比，发酵后可溶性蛋白含量提高了181.31%，蛋鸡第一、第二限制性氨基酸蛋氨酸和赖氨酸含量分别增加了46.42%和26.92%，必需氨基酸总和增加了25.76%；检测到的17 种氨基酸总和增加了23.47%，活菌数增加了40.19%，差异均显著（P＜0.05）；粗蛋白质、钙和磷含量均有增加，粗纤维含量降低了3.92%，差异均不显著（P＞0.05）。

表2 发酵前后的饲料营养成分变化

2.2 发酵饲料对蛋鸡生产性能的分析

生产性能是蛋鸡养殖中最关键的指标，与经济效益密切相关。发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响如表3所示。与对照组相比，试验组蛋鸡试验前期的平均产蛋率显著增加（P＜0.05）和破损蛋率显著降低（P＜0.05）；试验后期的平均产蛋率增加了3.85%（P＞0.05）；整个试验期间，试验组平均采食量有所增加，料蛋比和蛋重略有下降，但无明显差异（P＞0.05）。

2.3 发酵饲料对鸡蛋品质的分析

发酵饲料的添加对鸡蛋的品质影响如表4所示，试验第21 d 时，两组蛋鸡所产鸡蛋品质无显著差异（P＞0.05）；试验第42 d时，与对照组相比，试验组蛋鸡所产鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位均显著提高（P＜0.05），蛋壳厚度显著下降（P＜0.05）。随着蛋鸡周龄的增加，对照组鸡蛋的蛋黄颜色逐渐变浅，而试验组鸡蛋蛋黄颜色逐渐加深。

2.4 发酵饲料对蛋鸡抗氧化指标的影响

2.4.1 发酵饲料对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

发酵饲料的添加对蛋鸡的血清抗氧化指标的影响如表5 所示。试验第21 d 时，与对照组相比，试验组蛋鸡的血清MDA 和CAT 含量显著降低（P＜0.05）；试验第42 d 时，与对照组相比，试验组蛋鸡的血清CAT、SOD和GSH-Px含量均显著增加（P＜0.05）。

表3 发酵饲料对蛋鸡生产性能的影响

表4 发酵饲料对蛋品质的影响

表5 发酵饲料对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

2.4.2 发酵饲料对蛋鸡肝脏抗氧化指标的影响

发酵饲料对蛋鸡的肝脏抗氧化功效的影响如表6所示，与对照组相比，试验组蛋鸡的肝脏T-AOC、SOD 和GSH-Px 含量都有升高趋势，但差异均不显著（P＞0.05）；MDA 含量降低了35.37%，差异不显著（P＞0.05）。

表6 发酵饲料对蛋鸡肝脏抗氧化指标的影响

3 讨论

3.1 发酵对物料营养成分的影响

发酵饲料的营养成分受所用菌种和发酵参数的影响。本试验中，采用单向阀发酵袋作为发酵介质，结合了好氧菌和厌氧菌的发酵优势，在发酵过程中微生物快速大量繁殖，使得发酵饲料中活菌数显著增加和粗蛋白质含量有所提高；微生物代谢过程中产生蛋白酶将大分子蛋白质水解成小分子的小肽和游离氨基酸，使得蛋氨酸、赖氨酸、必需氨基酸和总氨基酸含量显著增加，改善了饲料中玉米黄粉赖氨酸不足和氨基酸组成不平衡的缺点，提高了其蛋白质水溶性，也解释了可溶性蛋白质含量的增加。地衣芽孢杆菌在发酵过程中分泌纤维素酶，对玉米胚芽粕中部分纤维素进行降解，使得发酵饲料中粗纤维含量降低，提高饲料的利用率。韩国栋等[3]利用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母菌和嗜热乳杆菌混菌固态发酵玉米黄粉、豆粕和麸皮，可溶性蛋白含量由发酵前的59.09 mg/g 提高到发酵后的103.55 mg/g。魏炳栋等[18]利用复合菌发酵玉米黄粉，结果表明总必需氨基酸和总氨基酸含量分别增加了12.58%和12.37%。以上结果与本试验基本一致。

3.2 发酵饲料的添加对蛋鸡生产性能的影响

生产性能是蛋鸡养殖中最关键的指标，与经济效益密切相关。产蛋后期，蛋鸡因机体退化，免疫力下降等原因，导致产蛋性能下降，蛋品质受损。所以在产蛋后期，如何维持良好的产蛋性能尤其重要[19]。夏圣奎等[20]在蛋鸡饲粮中添加2.5%玉米豆粕发酵饲料，结果发现能延缓产蛋率和破蛋率下降幅度，降低次蛋率和死淘率。Linguo Zhao 等[21]将发酵银杏叶饲料饲喂给海兰褐蛋鸡，发现黑曲霉发酵组和混菌（产朊假丝酵母菌和黑曲霉）发酵组显著提高产蛋率和饲料转化率（P＜0.05）。上述的结论与本试验结果基本一致。

产蛋率是衡量家禽产蛋性能的一个重要指标，蛋鸡进入产蛋后期，产蛋率会因为自身的机体退化等加速降低。本试验表明，添加10%发酵饲料显著提高了平均产蛋率，随着蛋鸡日龄增加，产蛋率趋于平稳甚至有小增长趋势，可能原因是发酵饲料中富含益生菌，提高了机体抗氧化和免疫性能，延缓了机体退化，从而稳定了产蛋率。破损蛋主要受饲料营养、蛋自身、环境等因素影响，而饲料营养中对蛋壳质量影响较大的是钙、磷与维生素D[22]。本试验表明，在试验前期饲喂发酵饲料替代豆粕显著降低了破损蛋率，试验后期无显著影响。可能是因为发酵饲料中钙磷含量较高和啤酒酵母菌菌体本身所富含的氨基酸、消化酶、维生素、核糖核酸等有益物质可以提高饲料的消化性和营养价值，从而降低了破损蛋率；而随着产蛋周期的增加，蛋鸡机体受损，破损蛋率都有所增加。料蛋比是衡量家禽养殖经济效益的一个重要指标，在保证产蛋重量的前提下，料蛋比越低，养殖利润越大。本试验表明，饲喂发酵饲料替代基础日粮对料蛋比有降低作用，可能原因是玉米黄粉和玉米胚芽粕经过益生菌发酵后，饲料中部分大分子蛋白质降解成易吸收的小分子的小肽、游离必需氨基酸等增加了动物采食量，提高了饲料利用率。

3.3 发酵饲料的添加对鸡蛋品质的影响

蛋白高度和哈氏单位是衡量蛋白品质的有效指标，数值越大，蛋白黏稠度越高，鸡蛋品质越好[8]。研究表明，在蛋鸡日粮中添加发酵饲料可以有效提高鸡蛋哈氏单位[9，23]。在本试验中，试验后期，试验组鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位显著高于对照组。蛋壳强度越大，在运输中受损几率越小，蛋的保鲜程度越高。本试验表明，试验后期添加发酵饲料使蛋壳厚度均显著降低，但整个试验期间，两组鸡蛋的蛋壳强度无明显差异，这可能是由于随着蛋鸡日龄的增加，蛋鸡对钙的吸收降低，整体蛋壳厚度下降。蛋黄颜色是衡量鸡蛋品质的一项重要指标，一般认为蛋黄颜色越黄，营养价值越高，且蛋黄颜色鲜艳或者蛋黄比例大更易受到消费者青睐[24-25]。本试验表明，两组鸡蛋的蛋黄颜色无显著差异，但随着饲喂时间延长，饲喂发酵饲料的鸡蛋蛋黄颜色加深，可能原因是玉米黄粉富含叶黄素，而蛋黄的着色程度与饲料中的叶黄素的有效供给量和在蛋鸡体内沉积的总量有关[26]。饲喂发酵饲料可以部分改善鸡蛋品质，说明发酵玉米黄粉和玉米胚芽粕饲料对蛋鸡的养殖具有有利影响。

3.4 发酵饲料对蛋鸡抗氧化指标的影响

超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶能共同清除机体活性氧和自由基，减轻和阻止活性氧的过氧化作用[27]。总抗氧化能力和丙二醛含量高低可以反映机体细胞受自由基攻击的严重程度及机体健康程度[28]。本研究表明，玉米黄粉和玉米胚芽粕经过发酵后对蛋鸡的血清抗氧化能力有显著提高作用，具体表现为试验前期蛋鸡的血清MDA 含量显著降低，试验后期蛋鸡的血清CAT、SOD和GSH-Px含量显著增加。可能是因为发酵过程中益生菌的生长和微生物降解作用产生的小肽类物质可以提高饲料的抗氧化功能。饲喂发酵饲料可以部分改善蛋鸡的肝脏抗氧化功能，说明发酵玉米黄粉和玉米胚芽粕饲料可以有效改善机体抗氧化水平，进而保障蛋鸡的健康养殖。

4 结论

本试验条件下，①玉米黄粉和玉米胚芽粕经过益生菌发酵后营养价值提高。②大午金凤蛋鸡日粮添加10%发酵饲料后，在生产性能方面，可以显著提高蛋鸡产蛋率，对降低料蛋比和破损蛋率有一定效果；在鸡蛋品质方面，鸡蛋的蛋白高度和哈氏单位显著提高；在抗氧化指标方面，蛋鸡血清抗氧化功效显著改善，对肝脏抗氧化功效起到积极作用。综上所述，本试验结果在一定程度上提高了玉米深加工副产物的附加值，发酵饲料在大午金凤蛋鸡的应用上得到较好的结果，有一定的经济价值。