家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)——维生素篇

贾良梁 夏俊花

摘  要：在种蛋孵化时，给胚胎注射维生素会影响家禽的孵化率、骨骼生长、免疫机能和抗氧化机能。

关键词：胚蛋注射技术;维生素;雏鸡

中图分类号：S815 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2020）03-0004-03

多个实验室探讨了维生素C、维生素E、维生素D3和叶酸对改善家禽入孵种蛋胚胎的健康状况和发育的潜在功效。El-Senousey等以中国的黄羽肉鸡为试验动物，研究了维生素C（L-抗坏血酸）对其抗氧化系统和免疫基因表达水平的影响。他们在黄羽肉鸡种蛋孵化第18天时将0.2 mL含有3 mg抗坏血酸的0.9%生理盐水溶液手工注入每枚种蛋的气室内。结果发现，所孵出雏鸡1日龄时的总抗氧化能力、血浆谷胱甘肽过氧化物酶水平以及谷胱甘肽过氧化物酶和脾脏中过氧化物歧化酶mRNA的表达水平均得到了提高，但是血清丙二醛水平、mRNA白细胞介素-1β、白细胞介素-6和脾脏中的肿瘤坏死因子-α1表达水平均下降。这些联合效应表明，在孵化第18天给种蛋胚胎注射3 mg抗坏血酸可以提高所孵出雏鸡的抗氧化能力和免疫力。Zhang等在罗斯708肉鸡种蛋孵化第17天用手工方式给胚胎注射0.5 mg、1.5 mg、4.5 mg或13.5 mg的L-抗坏血酸。将不同剂量的抗坏血酸溶于100 μL的0.85%无菌生理盐水中，并用配置长度为2.53 cm的22-G针头的注射器注入羊膜内。结果发现，虽然胚胎注射L-抗坏血酸未影响种蛋的孵化率，但与未注射L-抗坏血酸的对照组种蛋相比，入孵种蛋胚胎注射4种剂量抗坏血酸中的任一种后，所孵出的雏鸡会有一个更长的出壳时间。随后，El-Senousey等让每一个处理组的一半雏鸡等待48 h后入舍，研究雏鸡体重和卵黄吸收受影响情况。结果发现，所有由注射维生素C的种蛋孵出的雏鸡没有因为推迟入舍而使体重和卵黄吸收率受到不利影响。

Fatemi等在随后的一篇论文中进一步报道了给入孵种蛋胚胎注射L-抗坏血酸对所孵出肉雏鸡的早期生长速度和血浆抗氧化能力的影响。他们用商用多蛋注射系统对入孵的肉鸡种蛋胚胎注射   3 mg、6 mg、12 mg或36 mg的抗坏血酸。结果发现，与Zhang等完成的前一项研究结果相似，在孵化第17天给罗斯708肉鸡种蛋的胚胎注射100 μL添加抗坏血酸的0.85%无菌生理盐水溶液，当抗坏血酸的注射浓度为3 mg时，所孵出雏鸡7日龄时的体重以及0～7日龄的平均日增重均高于不注射的对照组种蛋所孵出雏鸡的，7～14日龄的平均日增重大于注射生理盐水溶液的对照组种蛋所孵出雏鸡的。此外，当抗坏血酸的注射剂量为3 mg或6 mg时，所孵出雏鸡出壳时和7日龄时的血浆丙二醛浓度下降，而 7日龄时血浆总过氧化物歧化酶水平得到了提高。因此，给入孵种蛋的胚胎注射3 mg或6 mg的抗坏血酸具有加快所孵出肉雏鸡早期生长速度以及提高它们全身抗氧化能力的潜力。

Gore和Qureshi探讨了利用胚蛋注射技术给火鸡和肉鸡的入孵种蛋胚胎注射维生素E作为提高家禽体液免疫力及细胞免疫力手段的潜力。在进行胚蛋注射时，他们以维生素E的一种商用水溶性溶液d-α生育酚聚乙二醇-1000琥珀酸酯（d-α tocopherol polyethylene glycol-1000 succinate）为试验制剂，用配置长度为2.54 cm的20-G针头的结核菌素注射器手工将维生素溶液（溶解于无菌蒸馏水的维生素E）注入孵化第25天（从孵化机转入出雏机的当日）的火鸡种蛋胚胎和孵化第18天（从孵化机转入出雏机的当日）的肉鸡种蛋胚胎的羊膜腔中。火鸡入孵种蛋胚胎的注射量为100 μL、200 μL和300 μL，维生素E的含量分别为10 IU、20 IU和30 IU;肉鸡入孵种蛋胚胎的注射量为300 μL含10 IU维生素E的溶液。火鸡和肉鸡的试验均以注射300 μL生理盐水的入孵种蛋作为假注射对照组。

所孵出雏鸡7日龄时接种绵羊红细胞，抗体反应表明向入孵种蛋胚胎羊膜腔内注射维生素E可以提高所孵出雏火鸡和肉雏鸡的体液免疫力和细胞免疫力。然而，当维生素E的注射水平为20 IU或30 IU时，火鸡的入孵种蛋孵化率急剧降低，但10 IU的注射剂量不会显著影响种蛋的孵化率。不过，维生素E的三种注射剂量均未影响所孵出雏火鸡0～35日龄的增重以及35日龄时法氏囊和脾脏的相对重量。与此相似，给肉鸡的入孵种蛋胚胎注射10 IU的维生素E后，所孵出雏鸡0～35日龄的增重以及35日龄时法氏囊和脾脏的相对重量均未受到显著影响。总之，虽然该研究未能说明给入孵种蛋胚胎注射维生素E对所孵出雏禽35日龄时生产性能的影响情况，但是，雏禽出壳后的免疫力可以很快得到增强。

Bello等在一系列研究中探讨了向入孵种蛋注射100 μL含不同浓度纯晶体25-羟胆骨化醇[25-hydroxycholecalciferol，25-（OH）D3]的商用稀释液的效果。他们在孵化第18天用商用多蛋自动注射系统将商用稀释液注入罗斯708肉鸡的入孵种蛋胚胎羊膜腔内。Bello等首先指出，入孵种蛋胚胎注射0.30 μg～1.20 μg的25-（OH）D3可以提高孵化第19天胚胎血清中25-（OH）D3的浓度，还可以用于消除注射商用稀释液对所注射種蛋孵化率的不利影响。Bello等随后指出，给入孵种蛋胚胎注射0.15 μg～1.20 μg的25-（OH）D3不会影响所孵出的不同性别肉雏鸡出壳当日和21日龄时骨骼的发育或矿化;这些注射剂量不会影响所孵出雏鸡随后的存活率和生产性能。然而，由注射0.20 μg、0.60 μg或1.80 μg 25-（OH）D3的入孵种蛋胚胎所孵出的公雏鸡28日龄时的骨骼抗断裂强度大于注射稀释液的对照组种蛋所孵出公雏鸡的。Bello等还发现，入孵种蛋胚胎注射  0.60 μg 25-（OH）D3可以消除因胚胎性别不同导致的卵黄钙含量的差异，该指标可能会影响与性别相关的卵黄钙的吸收率，并且其可能与早先在雏鸡骨骼强度上发现的性别相关的差异有关。

Yair等探讨了将维生素D3 （剂量为240 IU）与磷酸盐和有机微量元素（锌、锰和铜）同时注入入孵种蛋胚胎后对所孵出雏鸡和成年肉鸡骨骼性能的影响。在孵化第17天，他们向科宝500肉鸡的入孵种蛋胚胎羊膜腔中手工注入0.6 mL的溶液。结果表明，无论是否与维生素D3一起注射，给入孵种蛋胚胎补充矿物质均可以提高所孵出雏鸡对卵黄中微量元素的吸收量;另外，给入孵种蛋胚胎同时注射有机微量元素和维生素D3不会延长落盘时间，但是会提高成年肉鸡骨骼中的灰分含量以及骨质和整体骨架的强度。这些结果表明，给入孵种蛋的胚胎注射含有维生素D3和微量元素的溶液可以提高所孵出肉鸡的骨骼强度。

Nouri等用配置22-G针头的注射器手工将40 μL含80 μg或120 μg叶酸的灭菌水注入孵化第18天的罗斯308肉鸡种蛋的蛋白中。虽然种蛋的孵化率没有受到影响，但注射叶酸提高了所孵出雏鸡42日龄时血液中葡萄糖、叶酸和血磷的水平，同时降低了血液中胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白以及钙和碱性磷酸酶的水平。注射叶酸同时改善了所孵出雏鸡的增重和饲料转化率。这些研究人员总结道，叶酸会对肉鸡产生全面的积极影响。此外，Liu等（2016）在孵化第11天向科宝肉鸡种蛋胚胎的卵黄囊中手工注入0.1 mL含 50 μg、100 μg或150 μg叶酸的溶液。结果发现，向入孵种蛋胚胎的卵黄囊中注射150 μg叶酸可以上调胚胎中胰岛素样生长因子-2的表达，因此能够促进种蛋胚胎的生长和组织发育。这些研究的结果表明，给入孵的肉鸡种蛋胚胎注射叶酸可以促进胚胎以及所孵出雏鸡的生长。

原题名：In ovo applications in poultry： a review（英文）

原作者：E. D. Peebles （美国密西西比州立大学）