慢性牙周炎合并冠心病患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平与牙周临床指数相关性探讨*

张美娜，张 斌

锦州医科大学附属第一医院口腔科（锦州121000）

牙周炎（Periodontitis）是临床上常见的口腔疾病，主要表现为口臭、牙龈出血、溢脓等，在我国成人中发病率高达50%，常威胁牙齿健康，甚至还会威胁到人体心脏、肾、肝脏等的健康［1］。慢性牙周炎（Chronic periodontitis，CP）是导致成年人失牙的主要原因，多种因素如感染、免疫力降低等都可引起慢性牙周炎的发生［2］。研究发现，牙周炎患者罹患冠心病（Coronary heart disease，CHD）的概率大大增加［3］，然而其发病机制尚不清楚。内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂

（Visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一种新型的炎症因子，研究发现其可能通过影响血管内皮细胞参与动脉粥样硬化的发生发展过程［4］。脂肪因子（Apelin）是人类孤独G 蛋白耦联受体的内源性配体，研究表明，Apelin 可参与调节血压和血液流量［5］。研究报道，脂肪因子趋化素（Adipokine chemokine，Chemerin）在冠心病发生发展中起到重要作用。张国明等［6］在冠心病患者的动脉粥样硬化斑块组织中发现牙周致病微生物。然而三者在慢性牙周炎合并冠心病中的作用尚不清楚，本研究拟通过检测慢性牙周炎合并冠心病患者血清中的Vaspin、Apelin、Chemerin水平，探讨其在慢性牙周炎合并冠心病病情发展中的作用。

对象与方法

1 研究对象 选取2017年9月至2019年10月在本院收治的CP患者160例为研究对象，其中CP合并CHD 患者80例为试验组，男性37例，女性43例，年龄28～60岁，平均年龄（45.62±8.16）岁。病例纳入标准:①符合CP、CHD 临床诊断标准，CP诊断标准参照Ramachandra等推荐的相关标准［7］，CHD 诊断标准参照《临床冠心病诊断与治疗指南》［8］；②全口余牙总数≥20个；③至少2个磨牙有一个PD≥4 mm，PAL≥1 mm；④探针出血结果为阳性者；⑤未接受牙种植术或者其他牙周治疗；⑥冠状动脉血管至少有一支出现狭窄者；⑦无严重心肝肾等器质性病变；⑧3个月之内未服用抗生素者。排除标准:①其他炎症、感染合并冠心病患者；②肝功能指标异常、各种慢性、急性病患者；③孕妇、肿瘤患者、长期酗酒者。另选单纯慢性牙周炎患者80例为对照组（NC 组），男性38例，女性42例，年龄27～61岁，平均年龄（44.98±9.15）岁。两组患者性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经锦州医科大学附属第一医院伦理委员会批准通过，所有样品采集均取得患者及家属知情同意并签字。

2 主要试剂与仪器 Vaspin ELISA 试剂盒（货号:69-80016）、Apelin ELISA 试 剂 盒（货 号:69-99460）、Chemerin ELISA 试剂盒（货号:69-98960）购自武汉默沙克生物科技有限公司；ELX800 型全自动酶标仪购自美国Bio-Tek公司。

3 样品采集与保存 所有患者使用真空采血管采集清晨空腹静脉血5 ml，分别置于促凝管中，标记后于4℃静置30 min，3000 r／min离心10 min，取血清分装于1.5 ml无菌EP管中，-80℃冷冻保存备用。

4 血清中Vaspin、Apelin、Chemerin含量测定

采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平，检测操作严格按照试剂盒说明书进行。本次研究所有样品的检测均由检验科同一批人员在同台仪器上操作，每个样本均设三次重复。

5 牙周临床指数检测 ①牙周探诊深度（PD）检测:PD 是指龈缘至袋底或龈沟底的距离，每个受试牙记录6个位点（颊／舌侧近中、中央、远中）；健康牙龈PD≤2～3 mm。②牙周附着水平（PAL）检测:无牙龈退缩时，PAL 为PD 与釉牙骨质界到龈缘的距离之差；牙龈退缩时，PAL 为PD 与釉牙骨质界到龈缘的距离之和。③菌斑指数（PI）:PI记录标准，0 为无菌斑，1为表面有菌斑。④探诊出血指数（BI）:用钝头探针轻轻探入龈沟或牙周袋内，取出探针30 s后观察牙龈出血情况。分为6级:1级为0分，牙龈健康；2级为1分，牙龈颜色有炎性改变，探诊不出血；3级为2分，探诊后牙龈有点状出血；4级为3分，探诊出血并沿龈缘扩散；5级为4 分，探诊出血并溢出龈沟；6 级为5分，牙龈自发出血。⑤牙龈指数（GI）:检查舌侧边缘龈、颊侧近中龈乳头、颊侧边缘龈及颊侧远中龈乳头4个区域，分别记录各区域炎症情况。共分为4级:1级为0分，牙龈正常；2级为1分，牙龈轻度炎症；3级为2分，牙龈中度炎症；4级为3分，牙龈重度炎症。计算每个牙和每位受检者（4个牙位得分之和）的分值。

6 统计学方法 利用SPSS 23.0统计学软件进行统计学分析，计数资料采用［例（%）］表示，行卡方检验；正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，行t检验；Pearson 检验对Vaspin、Apelin、Chemerin水平与各牙周临床指数进行相关性分析，Logistic回归分析CP患者发生CHD 的危险因素。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 两组一般资料比较 试验组和NC 组在性别、年龄上差异无统计学意义（P＞0.05），试验组有吸烟史和高血压史的人数显著多于NC 组（P＜0.05），见表1。

表1 两组研究对象一般资料比较

2 两组血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比较 与NC 组比较，试验组Vaspin、Apelin 水平较低，Chemerin水平较高（P＜0.05），见表2。

表2 两组血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平比较（μg／L）

3 两组PD、PAL、PI、BI、GI指数比较 与NC组比较，试验组PD、PAL、PI、BI、GI指数较高（P＜0.05），见表3。

表3 两组各牙周临床指数比较（±s）

表3 两组各牙周临床指数比较（±s）

组 别 n PD（mm） PAL（mm）PI BI GI试验组 80 3.69±0.75 4.46±1.15 2.14±0.69 3.49±0.51 3.28±0.78 NC组 80 2.06±0.23 0.00±0.00 0.00±0.00 1.78±0.31 0.59±0.13 t值 — 18.585 34.688 27.740 25.627 30.427 P 值 — ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

4 CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平与PD、PAL、PI、BI、GI指数相关性分析 CP合并CHD 患者血清Vaspin水平与PD、PAL、PI、BI、GI指数呈负相关（P＜0.05）；血清Apelin水平与PD、PAL、PI、BI、GI指数呈负相关（P＜0.05）；血清Chemerin水平与PD、PAL、PI、BI、GI指数呈正相关（P＜0.05）。见表4。

表4 试验组患者血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平与各牙周临床指数相关性分析

5 CP患者发生CHD 危险因素的Logistic分析 多因素Logistic回归分析结果显示年龄、高血压史、吸烟史、Chemerin高水平均为影响CP患者发生CHD的独立危险因素，Vaspin、Apelin高水平为独立保护因素（P＜0.05），见表5。

表5 CP患者发生CHD 危险因素的Logistic分析

讨 论

有研究者认为，无论任何病因导致的慢性炎症都与心血管疾病风险的增加有关［9］。Ziebolz等［10］研究发现，终末期冠心病患者最终需要通过心脏移植手术的患者合并慢性牙周炎的比率超过90%。程景明［11］研究对比冠心病患者中患有慢性牙周炎和牙周健康的人数时，发现两者人数差异有统计学意义。近期研究表达，慢性牙周炎已成为冠心病的独立危险因素［12］。诸多证据表明慢性牙周炎与冠心病有较强的相关性。关于两者之间的联系或者发生机制如何，目前尚不清楚，为了解释两者之间是由何种方式产生的联系，研究者大多偏向以下几种生物机制:炎症和免疫机制、血栓机制、血脂机制、胰岛素抵抗机制等［13］。

研究表明，脂肪细胞可分泌血清Vaspin等脂肪细胞因子，具有明显的抗炎症反应作用，有利于保持斑块的稳定，对体内血管平滑肌细胞生长和冠状动脉粥样硬化的形成有一定抑制作用［14］。对于冠状动脉粥样硬化的形成以及心血管事件具有重要的影响。罗庆慧等［15］对比观察冠心病患者血清中Vaspin水平变化时发现，无论是急性心梗死组、不稳定型心绞痛组还是稳定性心绞痛组，其血清中Vaspin水平均显著低于健康对照组，并且Vaspin水平与Gensini积分呈负相关，说明冠心病患者血清Vaspin与冠状动脉狭窄程度有关。研究表明Apelin 具有心肌保护作用，可介导血管再生，改善心肌缺血，改善循环障碍等一系列心血管效应［16］。曾文平等［17］研究发现冠心病患者血清Apelin水平显著低于对照组，认为Apelin水平变化与冠心病发生发展有关，参与了冠状动脉粥样硬化的生理过程。Chemerin是脂肪因子家族的成员之一，具有趋化白细胞的功能，可募集表达Chemerin受体的炎性细胞聚集于组织的受损部位发生炎症反应［18］。近期研究发现，Chemerin可能与冠状动脉斑块形成有关，参与了血管重构过程［19］。闫晓红等［20］研究发现，冠心病患者血清中Chemerin水平随着冠状动脉病变程度加剧而上升，并且发现单支病变患者高水平Chemerin具有明显的促炎症作用。Ozcan等［21］研究发现，牙周炎患者唾液中Chemerin含量显著上升，提示Chemerin与牙周炎发生有关，与上述结果一致。本研究发现，Vaspin、Apelin在CP 合并CHD 患者血清中下降，Chemerin则上 升，提 示Vaspin、Apelin、Chemerin 与CP 合 并CHD 有关，其水平高低可反应CP 合并CHD 患者冠状动脉病变。

慢性牙周炎直接导致牙周临床指标的变化，牙周临床指标可反映慢性牙周炎的病变程度。肖燕等［22］研究CP合并CHD 患者时发现，经过治疗改善后的患者牙周临床指标均有显著下降，本研究结果与之相似，PD、PAL、PI、BI、GI指标相对于对照组均显著升高。进一步对CP 合并CHD 患者血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平与牙周临床指标进行相关性分析发现，Vaspin、Apelin 与PD、PAL、PI、BI、GI 呈 负 相 关，Chemerin水平与PD、PAL、PI、BI、GI呈正相关，提示血清中Vaspin、Apelin、Chemerin水平与牙周临床指标可同时反映CP 合并CHD 患者病情严重程度。同时本研究显示Chemerin高水平为影响慢性牙周炎患者发生冠心病的危险因素，Vaspin高水平、Apelin 高水平为独立保护因素，提示血清Vaspin、Apelin、Chemerin水平可能作为判断CP合并CHD 患者冠状动脉病变的辅助指标。

综上所述，CP 合并CHD 患者血清Vaspin、Apelin水平较低、Chemerin水平较高，与患者牙周指数有关，均为CP患者发生CHD 的影响因素。本研究不足之处在于样本量不足，需扩大样本量进一步研究。