基于QuEChERS-气相色谱法测定平菇中虫螨腈残留研究

甘玉晶

摘要    本文采用QuEChERS方法净化，建立了气相色谱法/电子捕获检测器（GC/ECD）检测平菇中虫螨腈残留的分析方法。样品用乙腈提取，提取液经含50 mg PSA、50 mg C18EC、50 mg GCB、150 mg MgSO4的2 mL净化管净化，GC/ECD检测，标准溶液外标法定量。虫螨腈在0.01～0.50 μg/mL范围内，线性关系良好，相关系数为0.999 32，方法检出限为0.001 mg/kg，方法定量限为0.003 mg/kg。0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4个含量水平的添标回收率在88.5%～105.4%之间，相对标准偏差（RSD）在3.11%～5.22%之间，本方法简便、快速、准确，能够满足平菇中虫螨腈残留检测的需要。采用该方法测定了虫螨腈在平菇中的残留量，结果满意。

关键词    QuEChERS;GC/ECD;平菇;虫螨腈

虫螨腈（Chlorfenapyr，CAS号122453-73-0），又名溴虫腈，分子式C15H11BrClF3N2O，分子量437.2，是新型吡咯类杀虫杀螨剂，具有触杀、胃毒作用，同时有一定的内吸作用。虫螨腈具有杀虫谱广、防效高及持效长的特点，被广泛应用于蔬菜、茶叶、水果、食用菌等农产品上。

虫螨腈持效长，在农产品中的半衰期较长，容易造成残留，危害农产品质量安全，在《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）中规定了蔬菜、水果、茶叶中的最大残留限量[1]，因而开展农产品中虫螨腈残留检测研究具有重要意义。目前，虫螨腈残留的检测方法主要有气相色谱法[2-5]、高效液相色谱法[6-9]、气相色谱质谱联用法[10-14]等。

食用菌含有丰富的蛋白质和氨基酸，是一类有机、营养、保健的绿色食品。平菇作为食用菌中的主要种植品种，物美价廉，口感好，深受人们的喜爱。由于平菇生产中采收期较长，单朵菇生长快，生长分散不集中，在栽培生产过程中易受病虫害危害，需使用农药进行病虫害防治。这样以来，容易造成农药残留。基于QuEChERS-气相色谱法测定平菇中虫螨腈残留方法的研究未见报道。本文研究建立QuEChERS测定平菇中虫螨腈残留的方法，该方法操作简单、快速、准确可靠、灵敏度高、实用性强，可为控制平菇中虫螨腈的残留危害和保护人民食品安全提供可靠的检测手段。

1    材料与方法

1.1    试验材料

1.1.1    供试样品。供试样品为平菇，购自厦门市农贸市场。

1.1.2    主要仪器设备。Agilent 7890A气相色谱仪带微池电子捕获检测器（μECD）及工作站（美国Agilent公司），HITACHI CF16RXⅡ离心机（日本日立公司），ZZDCH16水浴氮吹仪（广州智真公司），VORTEX GENIUS 3涡旋混合器（德国IKA公司），SCDEALL VX-Ⅲ多管涡旋振荡器，PL602-S电子天平（梅特勒-托利多公司）。

1.1.3    试剂、材料。QuEChERS萃取盐包（Part No.5982-7555，內含1.5 g NaCl、6.0 g MgSO4，美国Agilent公司）;QuEChERS净化管A（Part No.5982-5122CH，2 mL，内含50 mg PSA、50 mg C18EC、50 mg GCB、150 mg MgSO4）;QuEChERS净化管B（Part No.5982-5421CH，2 mL，内含50 mg PSA、50 mg C18EC、150 mg MgSO4）;乙腈、丙酮、正己烷、甲醇，均为色谱纯试剂，美国TEDIA公司生产;氯化钠，为优级纯上海国药集团化学试剂有限公司生产。

1.1.4    农药标准溶液。虫螨腈农药标准溶液，购自农业部环境保护科研监测所（天津），质量浓度为1 000.0 mg/L。首先以丙酮+正已烷（10+90）配制成100.0 mg/L的标准溶液储备液，再用丙酮+正已烷（10+90）将标准储备液稀释分别配制成浓度为0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 μg/mL系列标准溶液。

1.2    试验方法

1.2.1    样品制备。平菇样品取样按《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）附录A[1]执行，将整朵菇切碎，放入组织捣碎机搅碎充分混匀，制成待测样，装入洁净密封的塑料袋中备用。

1.2.2    提取。准确称取待测样10.00 g（精确到0.01 g）于50 mL塑料离心管中，加入10.0 mL乙腈，在涡旋混合器上涡旋振荡2 min后，再加入2 g萃取盐包，混匀后在多管涡旋振荡器剧烈振荡2 min，以9 000 r/min离心5 min，取出上清液待净化。

1.2.3    净化。准确吸取1.0 mL上清液至净化管，充分混匀，在多管涡旋振荡器剧烈振荡5 min，以15 000 r/min离心5 min，准确吸取0.5 mL上清液至10 mL试管中，50 ℃水浴中氮气吹至近干，准确加入0.5 mL丙酮+正已烷（10+90）复溶，待测。

1.3    气相色谱条件

色谱柱：Agilent DB-1MS，30.0 mm×250 μm×0.25 μm;进样口温度为240 ℃，微池电子捕获检测器（μECD）温度为320 ℃。柱温为程序升温，初始温度80 ℃，保持1.0 min，以15 ℃/min的升温速率升到230 ℃，保持1.0 min，再以40 ℃/min的升温速率升到270 ℃，保持2 min。气体及流量：载气为高纯氮气（纯度>99.999%），恒流模式，流速1.0 mL/min，检测器尾吹气气体为高纯度的氮气，流速60.0 mL/min。进样方式为不分流进样，进样口隔垫吹扫流量3.0 mL/min，0.75 min打开吹扫，吹扫流量60.0 mL/min，进样量1.0 μL。自动进样器洗针：进样前依次用正己烷、样品洗进样针3次，进样后再用丙酮洗进样针3次。

2    结果与分析

2.1    色谱条件优化建立

配制虫螨腈标准溶液进行上机分析，多次优化进样口温度、检测器温度、柱温的升温程序及气体流量等仪器参数，使虫螨腈能够得到较好的峰型和最好的响应强度，同时缩短分析时间。优化色谱条件后得到的虫螨腈标准溶液（0.1 μg/mL）色谱图，如图1（a）所示。

2.2    前处理方法优化

本试验分别采用乙腈、乙酸乙酯、丙酮作为提取溶剂进行添标回收试验，结果表明，用乙腈提取该农药的添标回收率优于乙酸乙酯、丙酮，因而选择乙腈作为提取溶剂。同时，本试验进行了2种净化管的净化效果对比试验，结果表明，2种净化管的添标回收率均在85%以上，但用净化管A净化后的样品色谱图杂峰明显比用净化管B净化后的样品色谱图杂峰少，净化效果更好，因而选择含50 mg GCB的净化管A作为前处理净化管。

2.3    定性与定量

由自动进样器吸取1.0 μL虫螨腈标准溶液和净化后的待测样品溶液注入色谱仪中，以保留时间（RT）定性，测得样品溶液中未知组分的保留时间分别与标准溶液在同一色谱柱上的保留时间相比较，如果样品溶液中某组分的保留时间与标准溶液中某一农药的保留时间相差在±0.05 min内的可认定为该农药。同时，以色谱柱获得的样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。空白平菇基质色谱图和空白平菇基质添加0.10 μg/mL虫螨腈标准溶液色谱图分别如图1（b）、（c）所示。

2.4    方法的线性关系及检出限

在优化建立的色谱条件下，对不同质量浓度的虫螨腈标准工作溶液进行测定，每个浓度重复进样测定3次，以质量浓度（X，μg/mL）为横坐标，以峰面积平均值（Y）为纵坐标，获得虫螨腈的标准曲线Y=54 834.176 6X+161.936 32，结果表明，在0.01～0.50 μg/mL范围内，线性良好，相关系数（r）为0.999 32。以信噪比的3倍计算得出方法的检出限（LOD）为0.001 mg/kg，以信噪比的10倍计算得出方法的定量限（LOQ）为0.003 mg/kg，在《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）中规定了蔬菜、水果和茶叶中虫螨腈的残留限量，而没有規定食用菌中残留限量，参照其中最低的芥蓝最大残留限量0.1 mg/kg[1]，该方法能够满足实际检测要求。

2.5    方法的回收率与精密度

应用建立的方法在空白平菇样品分别添加0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4个含量水平进行加标回收试验，每个添加水平重复测定5次，计算平均回收率及精密度，虫螨腈的添标回收率在88.5%～105.4%之间，相对标准偏差（RSD）在3.11%～5.22%之间，结果表明该方法具有良好的回收率和精密度。

2.6    实际样品检测

应用本方法对市售的10份平菇样品进行检测，9份样品未检出，1份样品检出虫螨腈，浓度为0.0281 mg/kg，色谱图见图1（d）。在《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2019）中规定了蔬菜、水果和茶叶中虫螨腈的残留限量，而没有规定食用菌中残留限量[1]，应引起相关部门的重视。将该样品应用《食品安全国家标准 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018）[15]进行测定，测定的结果与本方法相一致。结果表明，本方法能应用于市场平菇中虫螨腈残留实际检测。

3    结论与讨论

本文通过对平菇中虫螨腈进行气相色谱法的测定，结果表明，在0.01～0.50 μg/mL范围内，线性关系良好，相关系数为0.999 32，方法检出限为0.001 mg/kg，方法定量限为0.003 mg/kg。在0.02、0.05、0.10、0.20 mg/kg 4个含量水平的添标回收率在88.5%～105.4%之间，相对标准偏差（RSD）在3.11%～5.22%之间，本方法简便、快速、准确，能满足实际检测分析要求。

4    参考文献

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